Erwinia herbicola冰核活性蛋白的分离、电泳分析鉴定

对Erwinia herbicola(A25)菌株的冰核活性蛋白的分离纯化及电泳进行研究。主要方法①按双温培养的方法,获得了较高的生物量积累和强冰核活性的诱导表达。②实验采用渗透压冲击法破碎细菌细胞,破碎率达98．67％。③通过差速离心法获取不同冰核活性蛋白组分,测定各组分的冰核活性和SDS－PAGE电泳图谱分析。建立了冰核活性因子的高冰核活性与离心力之间的关系;利用SDS－PAGE还建立了具冰核活性蛋白的分子量的大小与冰核活性蛋白组分之间的关系。证实了具高冰核活性蛋白质最小结构单位约为26．0kD。     

蛋白纳米颗粒与细胞力电平衡

人体细胞的生命活动依赖于膜电位极化和胞内外离子不对称动态平衡(也称生物渗透压平衡)。膜电位改变及离子含量组成变化均参与了细胞对环境理化刺激的应激反应,调控其对环境改变的适应。最近的研究发现：人体血浆及细胞内的蛋白纳米颗粒变化参与了细胞膜电位的调控,与细胞内外离子的重新分布及跨膜渗透压的改变密切相关。电压依赖离子通道的激活及开放程度,是诱导细胞离子重新分布的重要调控机制,其活性与蛋白纳米颗粒调控的膜电位改变密切相关,且离子组成也参与了蛋白纳米颗粒吸附离子诱导膜电位变化的调节。因而,蛋白纳米颗粒是调控细胞膜电位平衡及生物渗透压平衡的重要物理机制,这一协同调控的力电活动与多种与蛋白纳米颗粒相关疾病的发生及治疗密切相关,该机制的阐明能为解析当前多种临床疑难疾病的发病机制提出新的研究方向。     

溶液渗透压计算公式P=RTiC中的C应该是物质B的浓度CB

稀溶液渗透压(或渗透势)的计算公式是：P=RTiC(或ψw=-RTiC)。 (1)从它诞生至今已有100多年了,但其中的C究竟是物质B的浓度cB,还是溶质B的质量摩尔浓度bB,在植物生理学界观点尚不一致。文献1、2都认为C为溶液的摩尔(克分子)浓度M;文献3则认为C为溶液的重量克分子浓度m,并直接以m作为一个物理量表达于公式中,即：但在实际运算时,文献3又不是用重量克分子浓度m的单位,而是用克分子浓度的单位;文献4认为"C为溶液的重量克分子浓度",但在配制蔗糖溶液时,又用M作为蔗糖溶液的量度单位;文献5认为C为浓度(应以重量克分子浓度为单位,但实际上当溶液较稀时,可认为克分子浓度与重量克分子浓度相等),所以在实际运算时,他们以克分子浓度作为C12H22O11的组成量度;文献6认为渗透压公式"式中V是指溶剂即水分子的体积(而不是溶液的体积!)",公式"式中n2／V(相当于C)是指单位体积(因水的比重是1,亦即单位重量)溶剂分子中所含溶质分子的摩尔数,所以C应为质量摩尔浓度(molality,m)";文献7对C的含义的观点与文献6的观点一致,并提出了在测定植物组织渗透势时,将体积摩尔浓度换算成质量摩尔浓度,再代入公式P=-RTiC中的四步     

渗透压突然改变对大肠埃希菌水通道蛋白GlpF基因表达的影响

目的 探讨水-甘油通道蛋白(glycerol protein ficilitator,GlpF)的生理功能及对细菌生长繁殖的影响.方法 将大肠埃希菌接种于等渗透压的液体培养基(1 IM)培养,18h后,突然改变培养液的渗透压,在30、60、120 min时间点检测细菌的A600nm值,RT-PCR分析其GlpF的表达.结果 突然改变渗透压后,大肠埃希菌数量均有不同程度的减少.在1/2 IM组、1/4 IM组细菌的A600nm值与其各自对照组相比,变化并不明显,但其细菌GlpF表达量明显降低.在高渗组,2 IM组的A600nm值与等渗组相比变化不大,而其GlpF表达量明显高于等渗组.结论 在环境渗透压突然改变时,细菌可以通过调控GlpF的表达来实现对细菌细胞内外水份的调节,以维持胞内环境稳定.     

TRPV4在渗透压对大鼠心肌收缩性影响中的作用

本文旨在探讨低渗和高渗内环境对心肌收缩性的影响及机制.取Sprague-Dawley(SD)大鼠左心室乳头状肌,在电刺激引起兴奋的条件下,分别记录在低渗、等渗和高渗灌流液中肌条的收缩力;同样条件下观察在低渗、等渗和高渗灌流液中加入渗透压敏感蛋白瞬时感受器电位离子通道家族香草素受体亚家族IV型(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)的拮抗剂和激动剂后肌条收缩力的变化.结果显示:(1)与等渗(310 mOsm/L)时心肌收缩力相比,渗透压为290、270和230 mOsm/L时心肌收缩力分别增加11.5%、21.5%、25.O%(P<0.05);渗透压为350、370、390 mOsm/L时心肌收缩力分别降低16.0%、23.7%、55.2%(P<0.05).(2)在低渗液(270 mOsm/L)中加入TRPV4拮抗剂钌红(ruthenium red,RR),低渗对心肌收缩力的增强作用被抑制36%(P<0.01);在高渗液(390 mOsm/L)中加入RR,高渗对心肌收缩力的抑制作用增加56.1%(P<0.01).(3)在等渗液中(310 mOsm/L)加入TRPV4激动剂4-α-佛波醇-12,13-二癸酸(4-α-phorbol-12,13-didecanoate,4 α-PDD),心肌收缩力没有改变;在高渗液中(390 mOsm/L)加入4α-PDD,高渗对心肌收缩力的抑制作用增加27.1%(P<0.01).以上结果提示,TRPV4参与渗透压引起的心肌收缩力变化.     

对渗透现象的一种解释

提出溶液中溶质分子的热运动以热弹性振动为主,只有极少一部分高能分子才可以定向移动的假说。溶质分子的热振动会产生压力,而溶液压力是其中热振动的溶质分子产生的压力与连通的溶剂压力的叠加作用,因而溶液中的溶剂的压力总是比溶液的宏观压力低;渗透现象以及溶液的蒸气压降低、冰点下降现象正是由于溶液中溶剂的压力比溶液本身的宏观压力低而造成的。     

中华蟾蜍蝌蚪对高渗溶液的耐受性

为了解中华蟾蜍蝌蚪对高渗溶液的耐受性,采用常规静态实验,用蔗糖调节溶液渗透压对蟾蜍蝌蚪进行渗透耐受实验;采用方差分析统计溶液渗透压对蟾蜍蝌蚪的存活率、体积变化和活动性的影响。结果显示,蟾蜍蝌蚪能够忍受溶液渗透压在一定范围内的变化,对渗透压较低的溶液其适应对策为调节,而对渗透压较高的溶液则为协变。蝌蚪对水溶液的耐受渗透压为1485．24mOsm,其存活率随渗透压增高而降低;同一渗透压下,蝌蚪存活率随在溶液中暴露时间的延长而降低。蟾蜍蝌蚪体内水分在不同浓度溶液中丧失的程度存在显著差异,即使在同一浓度的溶液中,体积会随时间的增加而不断缩小,并且溶液浓度越高,体积减小的速率越大。身体失水对蝌蚪的行为性会产生一定的影响,蝌蚪的活泼性随时间的延长而降低。     

不同渗透压的稀释液对猕猴精子低温冷冻保存的影响

以稀释液TTE(382mOsm/kg)为对照,研究了5种渗透压(688、389、329、166、43mOsm/kg)的TEST稀释液(TEST、mTEST1、mTEST2、mTEST3、mTEST4)在冷冻过程中对猕猴精子功能的影响。精液一步稀释于含甘油的防冻液中,甘油的终浓度为5%(v/v)。在冷冻前后分别检测精子的运动度和质膜完整性,后者用Hoechst33342和碘化丙锭双色标记流式细胞术分析。结果表明:冷冻之前,与鲜精相比,用TEST和mTEST4稀释的精子运动度和质膜完整性显著降低(P<0·001),其余组中除mTEST2稀释的精子质膜完整性显著降低(P<0·05)外,精子运动度无差异;冷冻复苏后,TTE、mTEST3和mTEST1冻存精子的运动度和质膜完整性最高,其次是mTEST2,TEST和mTEST4冷冻效果最差(P<0·05)。提示等渗、适当高渗或低渗的稀释液适合猕猴精子的冷冻保存;对精子产生高渗毒害作用是导致猕猴精子用TEST冷冻存活率低的主要原因。     

花药预处理对玉米游离小孢子存活率的影响

以大田种植的甜玉米“申甜1号”和糯玉米“沪玉糯1号”的花药为供试材料,比较了预处理液的渗透压(甘露醇浓度)、添加不同浓度秋水仙碱、脯氨酸和预处理温度对游离小孢子存活率的影响。结果表明：由低到高的渗透压变化处理(0．35mol／L 24h→0.40mol／L 24h→0．45mol／L 24h,添加秋水仙碱(200mg／L)、脯氨酸(200mg／L)和15℃、48h的预处理分别能明显地提高游离小孢子的存活率。对上述处理的可能作用机理进行了推测。