多普勒彩色血流成像中流速估计方法的研究

目的：探讨多普勒彩色血流成像中流速估计的方法。方法：对多普勒彩色血流成像中流速估计的两种算法-相域自相关和时域互相关进行了理论分析,在FieldII软件平台上对两种算法进行仿真。分别在中心流速为0．5m／s（中低速）和0．5m／s（高速）时进行血流速度仿真,得出了各自不同中心流速的血流速度分布曲线,并对其进行了对比分析。结果：相域自相关方法对中低速血流进行流速传计的精确度和稳健性都强于时域互相关方法;对于高速血流相域方法估计结果产生了混叠,但时域方法可以通过加大最值的搜索范围仍然能够得到正确的估计结果。结论：两种方法各有优缺点,互为补充。在实际应用中可以考虑结合使用两种方法,充分利用二者的优点。     

彩超系统中壁滤波器设计和性能比较

本文首先介绍了多普勒原理和血流多普勒信号模型,推出了壁滤波器设计在彩色超声成像系统中具有极其重要的地位;其次分析了如何通过无限脉冲冲激响应（IIR）滤波器和回归型滤波器设计壁滤波器的原理,其中无限脉冲冲激响应（IIR）滤波器根据初始状态的不同又可以分为零初始化、阶跃初始化和投影初始化三种滤波器;然后根据上述原理分别对各种形式的壁滤波器进行设计,得到它们的频谱图;最后根据频谱图,对这几种壁滤波器进行性能比较,得到它们的优缺点,对从事壁滤波器设计相关的工作者有一定得借鉴意义。     

高原移居者记忆与肢体运动能力的改变

目的：采用神经心理测验方法探讨海拔高度及时间对移居者记忆与肢体运动能力的影响及返回平原后的恢复情况。方法：选择即将进入高原的241名健康青年,在其进入高原前、初期、5个月、1年及返回平原时分别采用DDX-200型多功能心理生理能力测试康复仪进行左右手交叉敲击动作频率和数字记忆广度顺背数测验。结果：与进入高原前比较,进入高原5个月至1年,数字记忆广度顺背数测验得分降低,左右手交叉敲击动作频率总次数和正确次数减少,错误次数增多（P〈0．05,或P〈0．01）,进入高原初期,5个月及返回平原5个月与进入高原1年相比,数字记忆广度顺背数测验得分增高,左右手交叉敲击动作频率总次数和正确次数增多,错误次数减少（P〈0．05,或P〈0．01）。移居5个月后4700m组各项测试指标均优于移居5000m以上地区组（P〈0．05,或P〈0．01）。结论：移居高原5个月后记忆力及肢体运动能力降低,特别是移居5000m以上地区,而这些能力在返回平原5个月将得到恢复。     

利用重组大肠杆菌生产α-环糊精葡萄糖基转移酶

将来源于软化类芽孢杆菌（Paenibacillus macerans）的α-环糊精葡萄糖基转移酶（α-CGT）基因插入含pelB信号肽的质粒pET-20b（＋）中,构建了表达载体pET-20b（＋）／cgt,并将其转化表达宿主E.coli BL21（DE3）。对重组菌E．coli BL21／pET-cgt进行摇瓶发酵条件的优化,确定了其胞外表达α-CGT酶的最适条件：葡萄糖8g/L,乳糖0．5g/L,蛋白胨12g/L,酵母膏24g/L,K2HPO472mmol／L,KH2PO417mmol／L,CaCl2 2．5mmol／L;初始pH为7．0,诱导温度为25℃。在该条件下培养90h后最终α-CGT酶的胞外比活达到22．1u／mL,与来源菌Pmacerans所产天然酶比活相比提高了42倍,实现了α-CGT酶的高效生产。将基因工程菌在上述条件下于3L发酵罐中发酵,90h后胞外酶比活达到22．6U／mL,证实了工业化放大的可能性。     

埃他卡林对低氧性肺动脉高压患者某些血清酶活性及自由基代谢的影响

目的:研究埃他卡林对低氧性肺动脉高压(HPH)患者血中心肌酶活性与自由基代谢的影响,为埃他卡林临床治疗HPH的作用机制提供依据。方法:在海拔5 000m以上高原,将110名HPH患者随机分为埃他卡林治疗组(试验组,n=74)和安慰剂对照组(n=36),治疗前、治疗6个月后分别采血检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性。结果:服药前试验组较对照组ALT、AST、γ-GT、CK、LDH、MDA、NO、SOD、NOS的活性无统计学差异(P0.05);服药6个月后试验组较对照组ALT[(56.70±9.87)vs(65.90±10.40)]、AST[(56.30±11.40)vs(66.47±9.73)]、γ-GT[(66.53±8.96)vs(74.97±6.51)]、CK[(200.90±25.38)vs(222.60±30.21)]、LDH[(285.85±25.97)vs(309.92±38.18)]、MDA含量均降低,SOD[(71.09±8.78)vs(64.18±7.28)]、NO[(57.70±12.80)vs(48.10±7.99)]含量增高,NOS[(40.24±6.64)vs(34.40±7.01)]活性增高,MDA[(6.74±1.64)vs(8.67±1.77)]含量降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:氧自由基参与了HPH的发生发展过程,埃他卡林减轻脂质过氧化反应,并对低氧造成应激损伤的心肌细胞具有明显的保护作用。     

基于CRISPR/Cas9系统筛选猪流行性腹泻病毒复制相关基因及其验证

【背景】成簇规律间隔的短回文重复序列相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein,CRISPR/Cas9)已被广泛证实是高效、强大的第三代基因编辑工具,在发现功能基因等领域取得了重要进展,但至今尚无利用该方法挖掘猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)宿主基因的报道。【目的】利用CRISPR/Cas9系统在全基因组范围内筛选PEDV复制相关基因,并进行候选基因的初步验证,为培育抗PEDV种猪提供科学参考。【方法】通过CRISPR/Cas9技术构建人肝癌细胞系(Huh-7)全基因组敲除文库,利用PEDV感染Huh-7文库细胞,随后经过高通量测序筛选影响PEDV复制的关键宿主因子,结合基因干扰和检测病毒效价等相关试验对影响PEDV复制的候选基因进行初步验证。【结果】构建了CRISPR/Cas9系统在全基因组范围内筛选PEDV复制相关基因的方法,将富集程度排名靠前的整合素α11(integrin α11,ITGA11)、哺乳动物复制蛋白A2(replication protein A2,RPA2)、驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)、诱导髓系白血病细胞分化蛋白1(induced myeloid leukemia cell differentiation protein 1,MCL1)、多聚ADP核糖化酶1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP1]和囊泡单胺转运蛋白(vesicular monoamine transporter,SLC18A1)基因进行了验证;采用siRNA对上述基因分别进行干扰后,结果与对照组相比,干扰ITGA11可显著降低PEDV猪源靶向细胞IPEC-J2中PEDV-NmRNA、蛋白表达水平及子代病毒滴度。【结论】基于CRISPR/Cas9系统的全基因组敲除文库可作为挖掘PEDV复制相关功能基因的有效工具,ITGA11基因可作为一种制备抗PEDV猪种潜在的靶基因。     

ycjX和ycjF基因在布鲁氏菌热应激中的作用

【背景】细菌应对环境压力的能力对其存活和增殖及引起感染具有重要意义。充分揭示布鲁氏菌应激机制,可为防控布鲁氏菌病提供理论依据。研究发现,ycjX基因在细菌热应激时高表达且可能受σ³²调节,ycjF基因在细菌败血症期间表达显著上升,二者在革兰阴性菌中可能构成操纵子。【目的】研究ycjX和ycjF基因在布鲁氏菌热应激中的作用。【方法】对布鲁氏菌(Brucella)及其ycjX和ycjF双基因缺失株(△ycjXF)和回补株(C△ycjXF)进行热应激试验,计算3株菌的存活率。利用RT-PCR和β-半乳糖苷酶活性检测试验鉴定ycjX和ycjF的操纵子模式和启动子区域活性。利用ChIP试验分析σ³²与ycjX和ycjF的靶向调节关系。表达并纯化pGEX-4T-1-σ³²重组蛋白,凝胶电泳迁移试验分析σ³²与ycjX和ycjF之间的结合关系。【结果】热刺激后△ycjXF存活显著低于Brucella suis S2和C△ycjXF。明确布鲁氏菌ycjX和ycjF为同一转录本,确定其启动子区域具有活性。ChIP试验表明,σ³²可靶向富集在ycjXF启动子区,凝胶电泳迁移试验确定σ³²可与ycjXF体外直接结合。【结论】在σ³²的调节下,ycjX和ycjF在布鲁氏菌热应激中发挥正向作用。     

元谋干热河谷20年生人工恢复植被生物量分配与空间结构特征

采用分层收获法,对元谋干热河谷20年生赤桉、新银合欢纯林及其混交林的生物量分配与空间结构进行对比研究.结果表明:混交林林分生物量(82.99t·hm-2)介于赤桉纯林(60.64t·hm-2)与新银合欢纯林(127.79t·hm-2)之间;混交林内赤桉单株平均生物量(44.32kg)较其纯林(29.58kg)提高了49.8%.新银合欢纯林的枝叶生物量分配比例(25.4%)显著高于赤桉纯林(8.9%),且地上部生物量分配比例(78.0%)显著高于赤桉纯林(73.4%).新银合欢纯林及混交林中新银合欢的根系主要分布于0～40cm土层,赤桉纯林及混交林中赤桉的根系则主要分布于0～80cm和0～60cm土层.混交林中新银合欢的侧根(中根、小根和细根)分配比例均高于其纯林,而赤桉则相反.新银合欢的引入在一定程度上可促进赤桉生长,尤其是增加其地上部生物量及表层土壤(0～20cm)中的侧根生物量,对该地区的水土保持具有重要意义.     

基于京津冀一体化构想下的中医医疗联盟模式探讨

在中央提出京津冀协同发展的重大战略背景下,为了适应区域医疗均质化和医改的需要,为区域内百姓提供更优质的医疗服务,试构想创建中医医疗联盟。在医疗一体化建设方面,北京中医医院有着很好的中医联盟建设基础,试从北京中医医院医疗联盟建设的角度,对京津冀一体化构想下的医院托管模式进行探讨。     

柠檬UBE2I同源基因的克隆及表达模式分析

前期从香水柠檬自交不亲和花的转录组数据中筛选到一个上调表达的泛素结合酶UBE2I同源基因片段,为了弄清该基因的特性,开展了本研究。以香水柠檬(自交不亲和)和白花柠檬(自交亲和)为试材,根据从香水柠檬花转录组中获得的UBE2I基因片段设计引物,采用同源克隆方法获得了香水柠檬和白花柠檬这2个品种中UBE2I同源基因的ORF全长和DNA全长,对其序列进行生物信息学分析,再对其表达模式进行探讨。结果显示UBE2I基因在香水柠檬和白花柠檬中的ORF长度均为483 bp,二个品种ORF全长仅有一个核苷酸的差异,编码160个氨基酸,但其氨基酸序列无差异;DNA全长为2 267 bp,拥有有5个外显子和4个内含子,在第2个和第4个内含子序列中存在2个类似于启动子(TATAA)框的结构。UBE2I泛素连接酶蛋白理论等电点为7.64,分子量为17 981.474 44 Da,三级结构中有4个α螺旋、7个β折叠和10个无规卷曲,不是分泌蛋白,没有跨膜结构,肽链呈现疏水性。时空表达分析表明,UBE2I基因在香水柠檬的不同组织中均表达,但在不同组织中的表达存在差异,其中在花粉中的表达量明显高于其它组织,UBE2I在自交(香水柠檬♀×香水柠檬♂)后柱头中的表达量均比(香水柠檬♀×白花柠檬♂)杂交后柱头中的表达量高。本研究为进一步探索发现自交不亲和过程的泛素结合酶UBE2基因奠定基础。