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HCMV UL97 mRNA序列特异性M1GS的构建及其体外切割活性研究 总被引:4,自引:0,他引:4
HCMV UL97基因编码一种蛋白激酶,该酶参与调控病毒DNA的复制和衣壳的形成,且序列异常保守,可作为抗HCMV治疗的重要靶位。基于HCMV UL97 mRNA T3位点附近的序列,设计一段与该位点互补的引导序列(Guide Sequence,GS),并将其与大肠杆菌核酶P催化亚基(M1 RNA)的3’末端共价连接,构建了一种序列特异性的M1GS(M1-T3)。体外实验证实,所构建的M1-T3可与UL97 mRNA的T3位点特异性结合并产生有效的切割作用。进一步研究M1-T3的结构与其对底物片段靶向切割活性的关系,结果发现在M1 RNA与GS之间增加一段88核苷酸桥连序列的M1-T3(即M1-T3’),其靶向切割活性大大增强。此外,去除M1-T3 3’末端的CCA序列,其靶向切割活性将基本丧失。上述结果表明,这段桥连序列和3’末端的CCA序列是M1-T3重要的结构元件。这不仅有助于阐明M1GS与其底物的相互作用机制,同时也为进一步评价M1-T3在体内对UL97基因表达及病毒复制的抑制活性奠定了基础。 相似文献
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丙型肝炎病毒 (Hepatitis C virus,HCV) 是引起慢性肝炎的重要病因之一,严重危害公众健康。目前临床HCV感染常采用干扰素联合病毒唑进行治疗,然而应答率不高且易反复。因此,探索新型抗HCV治疗策略及药物显得尤为迫切。针对HCV核心基因的序列,设计与之互补的引导序列 (Guide Sequence,GS),通过PCR的方法将其共价连接于大肠杆菌核糖核酸酶P(RNase P) 催化性亚基 (M1 RNA) 的3¢末端,成功构建了一种靶向性M1GS核酶 (M1GS-HCV/C141)。经体外切割试验、胞内反义效应及胞内毒性研究,结果表明:M1GS-HCV/C141核酶不仅能够在体外对靶RNA片段产生特异性切割,在HCV感染的Huh7.5.1细胞中,也能显著抑制病毒核心蛋白的表达,进而使HCV RNA的拷贝数减少约1 000倍。因此,文中构建的M1GS-HCV/C141核酶在体外具有显著的抗HCV活性,这为HCV治疗研究提供了一条新的潜在途径。 相似文献
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受害与未受害棉田的数学模型 总被引:2,自引:0,他引:2
农田系统的模拟研究已见许多报导。Stapleton以光照、温度为输入,模拟棉花生长动态。Bowen模拟了花生的生长模型。Ritchiel(1983)作了小麦的模拟模型。这些模拟模型均以作物生理生态为基础并对产量形成原因作了合理的解释。齐文虎首先运用自动控制理论研究了套作玉米生态系统的数学模型。裴絧文也运用这一理论对中稻密植生态系统作了研究,显示了应用自动控制理论解决生态系统问题之前景。本文在前人工作基础上对有棉蚜为害和无棉蚜为害的两类棉田作了比较研究,为棉田优化管理提供理论依据。 相似文献
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运动昆虫密度和疾病传染数量估计的两类模型 总被引:1,自引:1,他引:0
根据推导,得到用于运动昆虫密度和疾病接触传染数量估计的二维和三维空间模型.两类模型分别适用于爬行昆虫和飞行昆虫的种群密度估计.二维空间模型可用于描述昆虫疾病的接触传染数量,针对不同的用途,将两类基本模型进行了数种拓广.两类模型的建立,为运动昆虫的密度估计及疾病流行研究提供了重要的定量工具. 相似文献