LPS诱导肝细胞LO2释放HMGB1蛋白的研究

以人单核巨噬细胞系U937细胞为对照,探讨肝细胞LO2分泌晚期炎症介质高迁移率族蛋白HMGB1过程的特点.400 μg/L LPS作用于人U937细胞和LO2细胞,MTT和荧光TUNNEL结果显示0～24 h,两种细胞均未见明显坏死和凋亡.RT-PCR结果表明LO2细胞HMGb1 mRNA表达水平高于相应对照组的时相(20 h)晚于U937细胞(16 h).Western blOT显示LO2细胞上清中检测到HMGB1蛋白的时相(16 h)晚于U937细胞(8h);两者上清HMGB1蛋白水平呈时间依赖性,但U937细胞分泌HMGB1蛋白的量占有绝对优势.细胞免疫荧光观察到两者均有HMGB1从细胞核向胞浆移位的现象,但LO2细胞晚于U937细胞.由此可见,LPS诱导肝细胞分泌晚期炎症介质HMGB1具有时相晚、量少的特点,且其分泌HMGB1的过程与HMGB1蛋白移位有关,而并不依赖于细胞坏死与凋亡.     

LPS诱导肝细胞L02释放HMGB1蛋白的研究

以人单核巨噬细胞系U937细胞为对照,探讨肝细胞L02分泌晚期炎症介质高迁移率族蛋白HMGB1过程的特点.400μg/L LPS作用于人U937细胞和L02细胞,MTT和荧光TUNEL结果显示0～24 h,两种细胞均未见明显坏死和凋亡.RT-PCR结果表明L02细胞HMGB1 mRNA表达水平高于相应对照组的时相(20 h)晚于U937细胞(16 h).Western blot显示L02细胞上清中检测到HMGB1蛋白的时相(16 h)晚于U937细胞(8h);两者上清HMGBl蛋白水平呈时间依赖性,但U937细胞分泌HMGB1蛋白的量占有绝对优势.细胞免疫荧光观察到两者均有HMGB1从细胞核向胞浆移位的现象,但L02细胞晚于U937细胞.由此可见,LPS诱导肝细胞分泌晚期炎症介质HMGB1具有时相晚、量少的特点,且其分泌HMGB1的过程与HMGB1蛋白移位有关,而并不依赖于细胞坏死与凋亡.     

脂多糖诱导肝细胞HepG2释放HMGB-1的研究

观察小剂量LPS(lipopolysaccharide)刺激下非坏死HepG2细胞是否存在HMGB1(high mobility group box-1 protein)移位及释放.以终浓度为100μg/L的LPS作用HepG2和RAW264.7细胞0、4、8、12、16、20、24h.LPS作用16~24h,HepG2和RAW264.7细胞培养上清中均可以检测到明显的HMGB1,与对照组差别有显著性(P<0.05).而MTT法和上清中LDH(lactate dehydrogenase)含量测定显示,LPS处理24h的HepG2存活率仍然非常高.免疫荧光观察到HMGB1的释放伴随着其从细胞核向胞浆的移位.由此可见,经LPS诱导,非坏死状态的HepG2细胞可发生HMGB1的移位及释放.     

抑制性寡脱氧核苷酸对实验性肝损伤细胞因子的影响

探讨抑制性寡脱氧核苷酸（suppressive oligonucleotides,Sup ODN）对刀豆蛋白A（Con A））诱导的小鼠实验性肝损伤的保护作用．实验采用Balb／C小鼠40只,随机分4组．分别为生理盐水（NS）组、对照寡脱氧核苷酸（control oligonucleotides,Con ODN）组、环孢菌素A（cyclosporin A,CsA）组、Sup ODN组．Con A（20mg,kg）尾静脉注射Ba1b/C小鼠,2h时腹腔给药,给药8h时观察小鼠的血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性、死亡率;检测血清TNF-α、IFN-γ、TIL-4水平;RT-PCR检测肝组织TNF-α、IFN-γ mRNA的表达;并观察肝组织的病理改变．发现Sup ODN组与NS组、Con ODN组相比,ALT活性明显降低（P〈0．01）;与NS组、Con ODN组和CsA组比较,IFN-γ明显降低（P〈0．01）,IL-4明显升高（P〈0．01）,TIFN-γ mRNA表达亦显著减少：而且Sup ODN可明显减轻肝脏炎性细胞浸润和肝细胞坏死（P〈0．05）．实验表明Sup ODN对Con A小鼠实验性肝损伤有明显保护作用．     

长江安庆江段刀鲚耳石微化学及洄游生态学意义

刀鲚(Coilia nasus)属辐鳍鱼纲、鲱形目、鳀科,是我国长江下游一种传统的名贵经济鱼类。长江安徽江段为刀鲚的主要分布区之一,但近年来由于人类活动干扰、栖息地衰退及过捕等原因,资源量急剧下降。近期发布的《国家重点保护野生动物名录》水生野生动物调整方案已拟将刀鲚列入国家二级重点野生动物保护名录。为客观了解长江安庆江段刀鲚的生境"履历"及探讨其洄游史,利用X射线电子探针微区分析技术对2008年7月捕获于长江安庆江段的10尾刀鲚(均为传统意义上的长颌鲚)进行了耳石微化学研究。结果表明:这些个体均具典型的溯河洄游习性。从耳石核心到边缘定量线分析结果表明,耳石的沉积过程中元素Sr/Ca比值波动显著,不仅有对应淡水生境的低值(3)阶段,还具有对应河口半咸水、海水生境的高值(3)阶段。这种现象亦得到了16色Sr元素面分布分析结果的印证。根据耳石淡水系数、Sr/Ca比值高低波动特征及Sr元素面分布图谱的差异性可以将这些刀鲚分为3种淡-海水生境转换生活史类型。这种现象明显地反映出长江安庆江段刀鲚的群体具有个体组成和洄游模式的多样性。     

基于耳石微化学的长江安徽和县江段刀鲚生境履历重建

为了解长江刀鲚(Coilia nasus)的“生境履历”, 利用电子探针微区分析技术研究了2015年5月17日在长江安徽和县江段捕获的刀鲚短颌鲚与长颌鲚类型耳石Sr和Ca微化学特征。短颌鲚的耳石Sr/Ca值变化动态为2类, 一类比值稳定在2.00左右(1.65±0.87—2.03±0.96), 反映了其纯淡水的生境履历; 另一类比值波动显著, 不仅具有对应淡水生境的低值(2.39±1.18—2.63±0.85), 还具有对应半咸水生境的高值(3.22±1.17—3.29±1.14), 显现了其江海生活的生境履历。长颌鲚耳石的Sr/Ca值均波动显著, 同时具有对应淡水生境的低值(1.35±1.07—2.37±1.04)和半咸水、海水生境的高值(3.47±1.09—8.35±1.25), 表现了其均为溯河洄游的生境履历。Sr面分析结果也与上述Sr/Ca值的结果相印证。长江安徽和县江段刀鲚资源组成复杂, 群体可由纯淡水型和江海生活型的个体共同组成。     

超声引导下精索阻滞麻醉对阴囊急诊手术患者应激反应和并发症的影响

摘要 目的：探究超声引导下精索阻滞麻醉对阴囊急诊手术患者应激反应和并发症的影响。方法：选择2020年10月至2022年12月来我院行阴囊急诊手术的急诊患者60例,按照随机数表法,分为观察组（n=30）和对照组（n=30）。两组均行精索阻滞麻醉,其中对照组采用盲探穿刺法,观察组采用超声引导的方式。比较两组患者阻滞成功率、麻醉方式更改人数、麻醉药物追加人数及并发症发生人数,比较不同时间点两组的疼痛（VAS）评分,比较术前及术后两组的应激反应[皮质醇（Cor）]、抗氧化指标[超氧化物歧化酶（SOD）]、炎性因子[白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）]水平。结果：观察组患者阻滞成功率为90.00%,高于对照组的66.67%（P＜0.05）,观察组麻醉方式更改率为6.67%低于对照组的9例30.33%（P＜0.05）,两组麻醉药物追加人数比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;手术开始5 min及术后4、8、12 h时,观察组患者的VAS评分均低于对照组的（P＜0.05）;两组患者术后24 h时的Cor、IL-6、IL-8水平均高于术前,但是观察组为低于对照组（P＜0.05）,两组术后24 h的SOD均低于术前,而观察组为高于对照组（P＜0.05）;观察组的血肿、刺破血管发生率分别为6.67%、10.00%,均低于对照组的30.00%、36.67%（P＜0.05）。结论：精索阻滞麻醉对阴囊急诊手术患者具有较好的阻滞效果,能够为患者带来更好的镇痛效果,降低术后应激及炎症反应。     

柯萨奇病毒A组10型感染RD细胞的转录组学分析

探讨柯萨奇病毒A组10型（coxsackievirus A10, CV-A10）感染人横纹肌肉瘤（rhabdomyosarcoma,RD）细胞的基因表达谱变化,为深入理解CV-A10致病机制提供重要基础数据。本研究将CV-A10以感染复数（MOI）为0.1的剂量感染RD细胞12 h后提取总RNA,通过RNA-Seq技术获取RD细胞中的全部转录本信息,基于生物信息学的方法对差异表达基因进行GO（gene ontology, GO）和KEGG（Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）分析。结果显示,共筛选到2 610个差异表达基因,其中表达上调的基因有1 582个,表达下调的基因有1 028个。随机选取8个差异表达基因,经RT-qPCR验证后发现,其变化趋势与转录组数据一致。GO和KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要聚焦于细胞内信号转导、mRNA加工、抗病毒免疫反应等过程。结果表明,CV-A10感染可能会引起RD细胞发生自噬。