vFLIP激活Jurkat细胞表达HIV抑制因子的研究

目的:检测KSHV编码的vFLIP蛋白对Jurkat细胞HIV抑制因子表达的影响。方法:本研究首先构建真核表达载体pIRES2-EGFP-vFLIP,再将其电穿孔至Jurkat细胞,然后使用实时荧光定量PCR技术检测Jurkat细胞中A3G、A3F、CCL5等HIV抑制因子的表达水平,从而探讨vFLIP抗HIV/AIDS的作用及机制。结果:成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-vFLIP,电转染效率达到40%左右。与对照载体转染组相比,vFLIP转染组内Jurkat细胞中CCL5、A3G、A3F及Mx2基因的表达分别上调了6.71、2.20、1.52及14.47倍。结论:vFLIP蛋白可以激活Jurkat细胞内某些HIV抑制因子的表达,提示其具有一定的抗HIV/AIDS作用。     

基于植被生产力的西南地区生态系统脆弱性特征

中国西南地区是全球生物多样性保护的重要地区之一.在全球气候变化背景下,该地区生态系统呈现出脆弱性增加的趋势.本研究基于生态系统总初级生产力(GPP),根据IPCC有关脆弱性的概念,计算西南地区生态系统的脆弱性,并分析了该区脆弱等级的空间分布格局,以及生态系统脆弱性与降水、温度、海拔、坡度和植被类型等因子间的相关性.结果表明: 西南地区生态系统脆弱性呈现由东南向西北逐渐增强的趋势,区域内多数地区为轻度、中度脆弱区(二者共占69%).脆弱等级随着区域内年平均降水量、多年平均温度的增加而减少,随着区域内海拔、坡度的增加而增加.西南喀斯特山区和西北山地农牧交错区呈现较高的脆弱性,更容易受气候变化或其他外界扰动的影响.针叶林、灌丛和草地的脆弱性相对较高,未来可能更容易受到气候变化的影响.     

姜黄素衍生物减缓大鼠糖尿病周围神经病变进展的作用及其机制研究

摘要 目的：探讨姜黄素衍生物减缓大鼠糖尿病周围神经病变（DPN）进展的作用及其机制。方法：30只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组，每组10只；构建链脲佐菌素（STZ）诱导的DPN大鼠模型；研究组1按10 mg/kg体重喂养10 μM的姜黄素衍生物；研究组2按10 mg/kg体重喂养100 μM的姜黄素衍生物；对照组喂养同等量的生理盐水。利用Von Frey电子测痛仪检测各组大鼠痛觉机械戒断阈值（MWT）。采用实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹试验检测AMPK、mTOR mRNA和蛋白表达水平。最后测定活化剂AICAR处理的RSC96细胞中mTOR的表达水平。结果：喂养姜黄素衍生物大鼠的痛觉机械戒断阈值（MWT）随时间推移逐渐降低，与对照组相比，研究组1大鼠的MWT显著降低，而研究组2大鼠的MWT也显著低于研究组1，差异均有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比，研究组1的AMPK mRNA和蛋白表达水平显著升高，mTOR mRNA和蛋白表达水平表达显著降低（P＜0.05）；而研究组2的AMPK mRNA和蛋白表达水平显著高于研究组1，mTOR mRNA和蛋白表达水平显著低于研究组1，差异均有统计学意义（P＜0.05）。使用活化剂AICAR处理RSC96细胞后，活化剂AICAR组的mTOR mRNA和mTOR蛋白表达水平明显低于非活化剂组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：姜黄素衍生物可能通过AMPK调节mTOR信号通路改善DPN，其可能具有潜在的治疗DPN的能力。     

端粒酶活性的定量分析方法

端粒酶是目前已知最为广谱的肿瘤分子标记物,并可能成为今后肿瘤诊断和预后判断的新指标以及肿瘤治疗的新靶点。对端粒酶活性的测定,在ＴＲＡＰ法的基础上发展建立了各种定量和半定量方法。     

马槟榔甜味蛋白的研究——Ⅰ.提取、纯化和某些特性

从中药马槟榔(Capparis masaikai Levl.)成熟种子中分离了一种能引起持久甜味的蛋白质,取名为马槟榔甜蛋白(Mabinlin),分子量11,700,等电点pH11.8,在280nm波长有最大吸收峰,其引起甜味感觉的最低浓度为0.1％,种仁含甜蛋白量约4％。     

尿样在SELDI技术中的优化研究

目的:建立表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF/MS)技术检测尿液样本的方法。方法:采用SELDI技术及弱阳离子交换表面蛋白芯片(CM10)对糖尿病病例组和正常对照组的尿液样本进行分析,从尿液标本的采集、样品保存、上样浓度的控制、实验仪器的内外校准、实验结果重复性验证与分析等方面进行实验条件的优化。结果:反复冻融3次以上的样品经SELDI检测的出峰数量和峰强度情况较差;以1:1或1:2的浓度作倍比稀释后的样本经芯片检测得到的蛋白峰强度和蛋白数量最优;对两组样本重复检测3次,蛋白丰度的平均变异系数(CV值)分别为0.121和0.095;两组样本共检测到202个蛋白峰,其中差异表达蛋白29个,在肝纤维化组中表达上调13个,表达下调16个。结论:初步建立了SELDI技术检测尿液样本的方法,提高了SELDI技术检测尿液样本的质量。     

生长抑素在齐口裂腹鱼消化道和脑中的定位

采用链霉亲合素一生物素过氧化物酶复合物免疫组化法研究生长抑素（Somatostatin,Som）在齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）脑和消化道中的定位。在消化道中,口咽腔和食道为阴性反应;肠道有Som强阳性细胞,其中前肠密度最高,后肠最低。这些Som阳性细胞多分布于粘膜上皮,形态多样。肠道巨噬细胞呈Som强阳性反应。Som广泛分布于各脑区的神经元或神经纤维中,呈弱或强阳性反应,其中下丘脑下叶乳头体内Som阳性细胞密度最高,背嗅核、侧嗅核、原始纹体、视前核、内嗅沟旁、缰核下区、前丘脑核、前圆核、下丘脑中叶、下丘脑下叶、中脑室侧次之;小脑分子层和延脑VI、V核较少。端极和脑上腺有阳性神经纤维。这说明Som在肠道中的分布与该鱼食性、消化道结构和功能密切相关;Som在下丘脑中的分布特点为鱼类GH调控提供了形态学证据;Som在脑中广泛分布,提示可能作为一种神经递质或调质,发挥更为广泛的生理功能。     

羽叶鬼灯檠中的单萜二糖苷

从羽叶鬼灯檠 (RodgersiapinnataFranch .)的根茎中分离得到 6个单萜二糖苷 ,它们的结构通过波谱方法分别鉴定为 :(E ) 3,7 dimethyl 1 O [α L rhamnopyranosyl (1→ 6 ) β D glu copyranosyl] oct 2 en 7 ol (1) ,(E ) 3,7 dimethyl 1 O [α L arabinofuranosyl (1→ 6 ) β D glucopy ranosyl] oct 2 en 7 ol (2 ) ,geranyl 1 O α L arabinofuranosyl (1→ 6 ) β D glucopyranoside (3) ,gera nyl 1 O α L rhamnopyranosyl (1→ 6 ) β D glucopyranoside (4 ) ,geranyl 1 O β D xylopyranosyl (1→6 ) β D glucopyranoside (5 ) ,geranyl 1 O α L arabinopyranosyl (1→ 6 ) β D glucopyranoside (6 )。其中化合物 1为新化合物 ,单萜二糖苷类化合物系首次在该属中发现。     

人巨细胞病毒IgG酶联免疫检测试剂盒的研制

为研制人巨细胞病毒 (HCMV)IgG酶联检测试剂盒 ,将HCMV接种人二倍体细胞 ,收获的病毒经纯化后用作包被抗原 ,辣根过氧化物酶 (HRP)标记羊抗人IgG为检测抗体 ,采用间接ELISA制备酶联免疫检测试剂盒并进行检定。该试剂盒操作简便、特异性强 ,稳定性、线性及精密性符合体外诊断试剂的要求。