全文获取类型
收费全文 | 3093篇 |
免费 | 170篇 |
国内免费 | 1212篇 |
出版年
2024年 | 36篇 |
2023年 | 80篇 |
2022年 | 120篇 |
2021年 | 101篇 |
2020年 | 119篇 |
2019年 | 120篇 |
2018年 | 79篇 |
2017年 | 72篇 |
2016年 | 118篇 |
2015年 | 136篇 |
2014年 | 258篇 |
2013年 | 156篇 |
2012年 | 172篇 |
2011年 | 178篇 |
2010年 | 226篇 |
2009年 | 250篇 |
2008年 | 213篇 |
2007年 | 208篇 |
2006年 | 179篇 |
2005年 | 192篇 |
2004年 | 176篇 |
2003年 | 157篇 |
2002年 | 127篇 |
2001年 | 133篇 |
2000年 | 113篇 |
1999年 | 116篇 |
1998年 | 94篇 |
1997年 | 83篇 |
1996年 | 70篇 |
1995年 | 65篇 |
1994年 | 63篇 |
1993年 | 42篇 |
1992年 | 48篇 |
1991年 | 26篇 |
1990年 | 39篇 |
1989年 | 37篇 |
1988年 | 12篇 |
1987年 | 9篇 |
1986年 | 19篇 |
1985年 | 18篇 |
1984年 | 9篇 |
1983年 | 4篇 |
1982年 | 2篇 |
排序方式: 共有4475条查询结果,搜索用时 0 毫秒
41.
本文讨论了检测丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)的样本来源和处理,引物的设计,合成和选择等问题;重点介绍了蛋白酶K消化法,聚乙二醇沉淀法,异硫氰酸胍一步法,硅凝胶提取法和直接捕获法提取HCV RNA的5种方法,以及一步PCR法,常规RT-巢式PCR,直接RT-巢式PCR,化学修饰的RT-巢式PCR,联合PCR,双温PCR和定量竞争性PCR等7种PCR方法检测HCV RNA,用PCR检测HCV RNA方法的标准化以及检测HCVRNA具有非常重要的意义。本文还介绍了一种新型的定量方法-bDNA信号放大技术检测HcVRNA。 相似文献
42.
本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序左右两侧分别随机突变6个和7个碱基,使它们与结构基因5′端顺序自发地形成各种可能的翻译起始区(TIR)二级结构。重组质粒转化JM109(DE3),以T7 RNA聚合酶-T7启动子调控转录。对288个重组子的β-gal活性测定表明,不同重组的表达量可相差55倍,其中9个表达量不同的重组子的RNA dot blot证实它们在转录水平无明显表达差异。由此提示,该研究策略和方法能有效地改变目的基因的TIR二级结构和捕获具有高翻译起始效率的表达克隆。 相似文献
43.
小麦条锈菌毒性小种及其无毒性突变型侵染初期,是不亲和反应的小麦叶片内可翻译mRNA水平迅速增加,而呈亲和反应叶片的增加幅度小且滞后。同时前者的Poly(A+)-RNA水平高于未接种对照,后者低于对照。32P标记实验证实不亲和反应叶片Poly(A+)-RNA的合成增加早于亲和反应叶片。Poly(A+)-RNA体外翻译产物经SDS-PAGE分离后,放射自显影图谱显示一些多肽条带的35S-Met相对掺入量有定量差异。 相似文献
44.
MethodsforHandy,RapidIsolationofHighQualityRNAbyGuanadiumThioeyauateDuJianYuanYanhuaMaShenglinDongZhiwei(BeijingInstituteforCancerResearchBeijing100034)硫氰胍是一种有效的蛋白变性剂。早在1979年,Chirgwin等就利用氯化铯/硫氰胍超离心技术成功地从RNA酶富集的胰脏组织中提取出未降解的RNA分子[2],从而使它成为抑制RNA酶的首选药物并得到广泛使用,但受到超速离心设备的限制。1983年,Cathala报道了氯化锂/硫氰胍RNA提取法[1]。该方法操作简便,获得的RNA质量很高,但所需时间较长。为了能在短时间内更快… 相似文献
45.
四株嗜盐菌Haloarcula vallismortis(EM201)、Haloferax denitrificans(EM303)、A_5和B_2已通过一对特定引物用PCR技术从总DNA中扩增出各自的16SrDNA片段,分子大小在1.47kd左右.DNA杂交也表明这些PCR产物具有嗜盐菌的同源性. 相似文献
46.
47.
RNA合成抑制剂对光敏感核不育水稻花粉育性的影响(简报) 总被引:2,自引:0,他引:2
用2-硫尿嘧啶(2-TU)和尿嘧啶(U)喷施一次和二次枝梗原基分化期及花粉母细胞形成期的水稻农垦58S叶面,前者使可育日长条件下的农垦58S花粉败育率显著增加。此种作用可因U的处理而解除。但对照品种农垦58则无类似的变化: 相似文献
48.
豌豆种子发育过程中DNA和RNA的变化 总被引:2,自引:2,他引:0
实验结果表明:豌豆种子发育过程中单粒鲜重、DNA和RNA含量都随开花后日数增加而增加。其中豌豆开花第21天,RNA含量达最高峰,拖尾现象消失而趋于单一带区,DNA的迁移率也降到最低,从而确定出豌豆开花后第21天是基因转录活动降低的转折点,为种子蛋白质基因工程研究提供参考。 相似文献
49.
50.
乙烯诱导下草莓果实采后RNA代谢与蛋白质合成活性的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
草莓草果实在乳白时期采收(开花后约40d),分别用10μl/L,50μl/L和100μl/L的外源乙烯进行处理。处理后的果实大分子RNA和poly(A)+RNA水平以及poly(A)+RNA与总RNA的比例均有增高。果实体内RNA酶活性和体外蛋白质的合成水平也升高。乙烯很可能是促进草莓果实成熟衰老的因素之一。 相似文献