绵羊体外受精卵的体外发育及冷冻保存研究

将体外成熟、体外受精的绵羊卵子,在体外培养至桑椹胚—襄胚期并进行冷冻保存,观察了培养卵的体外发育和冷冻保存效果。从采自屠宰场的绵羊卵巢中抽取卵母细胞,用含有10％FCS(或NSS)、HCG、E_2和Hepes的M199培养24—26小时,再以经Ionophore A23187诱导获能的新鲜精子进行授精。授精后6—8小时移入发育用培养基内进行培养,发育用培养基为含有10％FCS(或NSS)、丙酮酸钠、Hepes的M 199。授精72小时后,FCS组和NSS组的卵裂率分别为36.9％和45.2％,后者显著高于前者。继续培养7—10天后,桑椹胚～囊胚的发育率分别为11.6％和23.4％,两者间差异极显著。将桑椹胚和囊胚冷冻保存于PBS+20％FCS+10％乙二醇冷冻液内,解冻后的胚胎形态正常率分别为82.0％和71.9％。     

支气管镜下冷冻联合镜下给药治疗溃疡型支气管结核的临床效果

目的 探讨支气管镜下冷冻联合局部镜下注药对溃疡型支气管结核的临床效果，为该病的治疗提供参考。方法 选取2019年1月至2021年1月大连市公共卫生临床中心结核科收治的溃疡坏死型支气管结核患者80例，根据治疗方案分为对照组（n=40，给予常规规范抗结核治疗）和研究组（n=40，在对照组基础上给予支气管镜下冷冻联合局部注药治疗）。观察两组患者治疗4周后疗效、痰菌转阴时间及治疗前和治疗4周后第1秒用力呼气量（FEV1）、白细胞介素-10(IL-10)、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）水平及治疗期间不良反应情况。结果 研究组患者总有效率高于对照组，痰菌转阴时间短于对照组（均P<0.05），但两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义（15.0%vs 12.5%,P>0.05）。两组患者治疗后FEV1水平较治疗前上升，IL-10、CRP、ESR水平较治疗前下降，研究组患者上述指标水平治疗前后差值大于对照组（均P<0.05）。结论 支气管镜下冷冻联合局部镜下注药对溃疡型支气管结核的疗效较好，可抑制机体炎症介质的释放，缩短痰菌转阴时间，安全性较高。     

西伯利亚狍成纤维细胞建系及其生物学特性分析北大核心CSCD

本研究以内蒙古大青山获得野生雄性和雌性西伯利亚狍(Capreolus pygargus)为实验材料,利用组织块贴壁培养法进行气管、肺和耳3种组织成纤维细胞原代建系,研究不同组织来源的细胞贴壁率、冷冻前及复苏后存活率、生长曲线,进一步绘制狍成纤维细胞核型图并分析其G带特征。实验结果显示,气管、肺和耳3种组织成纤维细胞增殖经历潜伏期、对数生长期、平台期三个阶段,细胞形态为梭形、三角形或不规则形,是典型成纤维细胞形态;成纤维细胞呈漩涡状生长,其中气管、耳成纤维细胞生长增殖能力最强、肺成纤维细胞增殖能力较弱,气管和耳组织来源成纤维细胞呈典型“S”型细胞生长特征。染色体核型及G带分析结果显示,雄性狍成纤维细胞染色体条数为2n=70,其中,有34对常染色体,形态类型为12条近端着丝粒染色体(st),22条亚中着丝粒染色体(sm),1对性染色体,X染色体为中着丝粒染色体(m),Y染色体为近端着丝粒染色体(st),5条超数染色体(B);雌性狍成纤维细胞染色体条数为2n=70,其中,有34对常染色体,其形态类型为29条亚中着丝粒染色体(sm),5条近端着丝粒染色体(st),1对为性染色体,X染色体为亚中着丝粒染色体(sm),8条超数染色体(B)。本研究成功建立了雄性和雌性西伯利亚狍气管、肺和耳3种组织来源的成纤维细胞系,在体外培养时生长状态良好且维持了细胞的遗传信息稳定性,绘制了西伯利亚狍雄性和雌性染色体核型及G带图谱,为将来更深入开展相关研究提供材料与基本技术支撑。     

冷冻保存骨髓细胞方法的改进

冷冻保存骨髓细胞和自体骨髓移植是帮助需放疗和化疗的白血病病人和恶性肿瘤病人造血功能恢复的重要措施,已在临床工作中受到重视,但目前常用的方法冻存容积大,用代血浆分离的方法使细胞有一定损失,而且两者的二甲基亚砜(DMSO)用量均较大,不利于给病人输注,我们采用了一种简单的方法,减少了总的冻存体积,简化了操作步骤,冻存后的骨髓细胞仍保持较高活率,已在临床应用,效果良好。     

欧洲赤松树脂道上皮细胞树脂分泌方式研究

利用高压冷冻和冷冻替代技术对欧洲赤松茎皮层成熟树脂道上皮细胞的超微结构进行研究，揭示出一种全新的树脂分泌方式。其分泌过程为一些含有水解酶的高尔基小泡，转移至质膜周围并释放水解酶，从而将质膜溶解形成分泌通道，树脂由此迅速转移至质膜外，然后，通过高尔基小泡相互融合形成新膜片段的方式来修补破损的质膜。     

非人灵长类动物精子冻存技术的研究进展

随着生物医学技术的发展,应用非人灵长类动物模型进行基础科学研究日益广泛。与此同时,由于栖息地破坏、狩猎和基因隔离,许多非人灵长类动物濒临灭绝。因此,改进非人灵长类动物精子冻存技术对物种遗传资源的保藏具有重要的意义。本文概述了非人灵长类动物的精液特征,介绍了精液液化和冷冻精子质量评估的方法,分析了冷冻保护剂、冷冻稀释液及冷冻方法等因素对精子冻存效果的影响,总结了目前非人灵长类精子冷冻常用的冷冻保存液和冷冻方法,并对相关精子参数进行了比较,同时探讨了非人灵长类动物精子冻存研究面临的困境,并提出了可行的方案。总之,本文综述了近年来非人灵长类动物精子冻存的重要研究成果,对开发新的冷冻保护剂及改进冷冻技术具有一定的参考价值。