电子显微镜观察病毒感染细胞包埋技术的改进

本文报道了旨在简化和提高电镜包埋技术的几项新的技术方法。 为了准确而容易地在病毒感染的单层细胞培养上选择包埋所需的细胞,我们设计并应用了名为“顶扣细胞原位包埋技术”。将细小的塑料管放到光学显檄镜的聚光镜的中央,对准预先固定、脱水和浸透了国产618树脂的感染病毒的单层细胞培养,使盖玻片的细胞面向下,对准塑料小管的上端井顶扣之。应用此项技术,我们在副流感病毒、腺病毒和疤疹病毒上取得了初步结果。该项技术的优点在于：①比较准确地选择早期病变细胞,有助于克服电子显微镜观察上的困难;③简而易行,避免了一些复杂的包埋程序,节省时间和村料。此外,本文还介绍了试管内单层细胞原位包埋方法和简易的人和动物气管和支气管定向包埋方法。正烷烃发酵生产柠檬酸及异柠檬酸的研究I．解脂假丝酵母(Candida lipolytica)PC 711的分离与鉴定上海新型发酵厂和复旦大学生物系石油发酵科研协作组 1．用土壤增殖培养方法筛得若干株酵母,均能以正烷烃为唯一碳源产生柠檬酸和异柠檬酸。若于培养基中加适量碳酸钙则产总酸值均在2．5％以上。 2．产酸较高的菌株Pc 7¨,经鉴定是解脂假丝酵母。摇瓶培养2天后菌体生长达到 高峰,5天后总酸达到7—8％,对投油转化率130％左右。 3．发酵液中异拧檬酸分别用纸层析和旋光法进行定性和定量测定,方法简易、有效,适于筛选、条件试验和菌种诱变等工作中应用。 4．菌体的产酸过程中,柠檬酸与异柠檬酸含量相近,平行上升,而改变培养基氮源等又能形成其它产物。     

神经生长因子治疗急性颅脑损伤的效果及对患者神经功能的影响

目的:研究神经生长因子在急性颅脑损伤中的治疗效果及对神经功能的影响。方法:选取2014年8月至2015年7月本院收治的82例急性颅脑损伤患者,随机分为观察组和对照组,每组41例。对照组采取常规对症治疗,观察组在对照组基础上采用神经生长因子治疗。观察并比较两组患者治疗前后血清S100β,白介素-6(IL-6),髓鞘碱性蛋白(MBP)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的变化情况以及临床疗效。结果:观察组总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与治疗前比较,两组患者治疗后血清S100β及IL-6水平均降低,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,观察组患者治疗后血清S100β及IL-6水平较低,差异具有统计学意义(P0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后血清MBP及NSE水平均降低,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组比较,观察组患者治疗后血清MBP及NSE水平较低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:神经生长因子治疗急性颅脑损伤的效果显著,能够改善患者免疫功能和神经功能,值得临床推广应用。     

PEG对甘薯愈伤组织淀粉酶活性的影响

用聚乙二醇 (PEG) 6 0 0 0对甘薯愈伤组织进行处理后观察到其所含淀粉酶的活性变化。这些变化随PEG的浓度不同 ,处理时间长度不同而有显著差异。低浓度的PEG(0 5 %、 1% )处理愈伤组织其淀粉酶活性变化的幅度较小 ;而高浓度 (8% )的PEG处理所引起的淀粉酶活性变化幅度较大 ;这一结果显示了PEG对甘薯愈伤组织淀粉酶的调节作用。     

果蝇饲养管理的几个问题

1 防止培养基长霉 当外界温度不适应果蝇生长时(温度低于18℃)．培养基接种后的7d内,特别容易长霉。要避免长霉,应注意：①培养果蝇用的器皿要严格消毒。培养瓶洗干净后,自然凉干,再与棉塞一道进行高温干燥灭菌(120℃,30min)。②培养基要营养全面。果蝇培养基的种类很多,本实验室用的是玉米培养基,配方及配料如下：水750mL煮开,加琼脂6．2g,待琼脂溶解后加白糖62．5g,搅拌溶解后再加调成糊状的玉米糊(玉米82．5g．用冷水调成糊状,     

武湖日本沼虾繁殖生物学研究

武湖日本沼虾产卵场位于全湖沿岸带．越冬虾主要繁殖期为春夏季(4月中旬～7月中旬,水温20．5～31℃)。当年虾繁殖期为秋季(7月中旬～9月中旬,水温31～23℃),7月中下旬为新老世代交替期．非繁殖季节雄虾多于雌虾,繁殖季节雌虾多于雄虾．越冬虾绝对繁殖力明显大于当年虾．绝对繁殖力与体长呈幂函数关系,与体重呈直线相关．相对繁殖力RW为常数,其95％置信区间为1067．76±16．94eggs·g^-1。     

斜纹夜蛾泛素基因的克隆及表达

泛素介导的蛋白质降解途径对脑内蛋白的选择性降解起着重要作用。设计一对简并引物,从斜纹夜娥(Spodoptera litura)细胞中克隆了泛素基因的编码区,CenBank登录号AF436066。序列分析表明,该编码区的长度为228bp,编码由76个氨基酸组成的、分子质量为8．56kD的蛋白,其等电点为6．56。同源性比较发现,斜纹夜峨泛素基因不仅与其它真核生物的泛素基因在氨基酸水平上具有96％以上的相似性,而且与斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltMNPV)泛素基因的同源性为84％。RT—PCR分析发现,泛素基因在所检测的斜纹夜蛾幼虫多种组织,尤其是脂肪体中均有表达。采用构建的原核表达载体pQEUB,在大肠杆菌M15中诱导并高效表达出了带有His—tag的重组融合蛋白,薄层扫描分析得知靶蛋白约占总蛋白的37％。利用Ni—NTA亲和层析胶纯化得到重组融合蛋白,经SDS—PAGE鉴定为单一区带,为进一步研究S．litura泛素在SpltMNPV感染中的作用打下了基础。     

利用蚕豆根观察植物有丝分裂

洋葱因取材方便、发根条件简单、染色体数目少（2n=16）,因此常作为有丝分裂实验的首选材料^[1]。但由于菜农在采收洋葱后会喷洒一种植物保鲜剂—青鲜素（MH）,这就阻碍了洋葱发根。根据笔者的发现,春季（3、4月）洋葱发根根多,其他时间发根根非常少^[2],因此对开展此实验,取材在时间上受到限制,但若采用蚕豆根尖,可避免此问题,     

共转染CDK1、CDK2siRNA对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响

目的研究共转染CDK1、CDK2siRNA同时抑制CDKI、CDK2蛋白表达对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响,探讨细胞周期主要调控分子在肿瘤细胞凋亡中的作用。方法以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象,用脂质体lipofectamine2000同时转染CDKl和CDK2siRNA。在转染后48、60h收集细胞,用Western印迹检测CDKl、CDK2蛋白的表达,AnnexinV／PI检测转染细胞的凋亡,流式细胞术DNA含量检测分析细胞周期。转染细胞进行瑞氏一姬姆萨染色（Wright—Giemsa）后在显微镜下观察其形态变化i结果共转染CDKl、CDK2siRNA后48和60h,Western印迹结果显示CDKl和CDK2蛋白的表达都同时降低。共转染CDKl、CDK2siRNA后,细胞周期S期和G1／M期比例与对照相比有明显增加;共转染细胞经瑞氏一姬姆萨染色后在显微镜下可见双核或多核细胞增多;AnnexinV／PI检测结果显示共转染CDK1、CDK2siRNA的细胞在48和60h细胞凋亡率与对照相比有显著的升高。结论siRNA干扰导致的CDKI、CDK2表达同时降低不仅导致细胞周期s期和G1／M期的阻滞,也诱导了肿瘤细胞的凋亡。     

眼镜蛇的人工驯养繁殖技术研究

目的研究眼镜蛇的驯养繁殖技术。为更有效地保护和利用我国宝贵的眼镜蛇类资源。方法在室外模拟野生眼镜蛇的生境．在室内以散养、箱养相结合．配备科研人员及各种先进设施;在驯养过程中观察眼镜蛇的生物学特性。总结驯养管理技术、经验及疾病防治。结果解决了眼镜蛇人工驯养繁殖的技术难题．如眼镜蛇自动采食、无冬眠、蛇病的防治、异地杂交提高眼镜蛇的质量及产量等。结论本研究结果达到了预期的目的,为大规模展开人工驯养繁殖眼镜蛇提供了可靠的理论依据。     

云南省个旧矿区水稻镉砷积累及与矿质元素的关系

水稻（Oryza sativa L.）29个品种种植于云南省个旧市大屯镇孙家寨村受Cd、As复合污染的稻田,研究不同品种水稻谷粒对重金属元素Cd、As和矿质元素（Fe、Zn、Mn、Ni和Cu）的积累及相关关系。结果表明,品种和品种类型对水稻谷粒Cd、As含量的效应均不显著（p>0.05）。谷粒Cd含量范围为2.1~7.0 mg/kg,平均值为4.6 mg/kg。谷粒As含量的范围为5.0~8.9 mg/kg,平均值为7.2 mg/kg。品种对谷粒Fe含量的效应极显著（p<0.001）,对Zn含量的效应显著（p<0.05）,而对Mn、Ni和Cu含量的 效应均不显著（p>0.05）。同一品种谷粒的各金属元素含量间的差异均极显著（p<0.001）。除谷粒Fe 含量和As 含量无显著相关性（p>0.05）外,其余各元素含量间均呈现显著正相关关系（p<0.05）,表明这些元素在水稻谷粒中的积累呈现协同关系。