铜绿假单胞菌PIC—N萘降解基因的研究

铜绿假单胞菌ＰＩＣ－Ｎ对萘、邻苯二甲酸、水杨酸等有较强的氧化能力。发现该菌株以萘为底物可诱导产生芳香烃分解酶系。菌株中存在一个５７．４ｋｂ的质粒,经限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ处理可产生７个片段,用限制性内切酶ＥｃｏＲ Ⅰ处理可产生８个片段。将以限制性内切酶ＨｉｎｄⅢ部分酶切的片段克隆至大肠杆菌持ｐＭＦＹ４３上,获得２９个克隆株。通过对含有菌株ＰＩＣ－Ｎ质粒ＨｉｎｄⅢ片段的７个重组闰进行限制酶分析,绘出     

青海湖裸鲤肠道乳酸菌多样性与抑菌活性

【目的】通过生理生化特性,结合16S r RNA基因序列分析研究青海湖裸鲤肠道乳酸菌分离株的多样性,并对这些代表株的抑菌活性进行初步探讨,以期筛选具有高效抑菌活性的鱼源益生菌。【方法】对分离的47株乳酸菌代表株进行p H、温度生长范围、耐盐性等生理生化特征检测,结合16S r RNA基因序列对已分离到的乳酸菌进行基因分型和菌种鉴定,采用牛津杯双层平板法检测乳酸菌代表株的抑菌活性。【结果】鉴定结果显示:23株为Lactobacillus fuchuensis(48.94%),12株为Lactobacillus curvatus(25.53%),3株为Leuconostoc fallax(6.38%),2株为Lactobacillus sakei(4.26%),2株为Weissella ceti(4.26%);2株为Lactococcus cremoris(4.26%),1株为Leuconostoc lactis(2.13%),1株为Weissella minor(2.13%),1株为Enterococcus devriesei(2.13%)。qz1217、qz1196、qz1220所在的A、B、C三组乳酸菌在5-50°C的温度范围内生长良好,qz1196、qz1220所在的B、C组在pH 3.0-10.0的范围内生长良好,几乎所有乳酸菌都具有耐6.5%盐浓度特性。13株乳酸菌菌株对6种病原菌都具有抑制作用。通过排除酸、过氧化氢实验,发现上清液仍然具有抑菌活性。对qz1251发酵液进行蛋白酶处理,抑菌活性消失,确定其抑菌物质属于蛋白类物质,是一种细菌素。【结论】青海湖裸鲤肠道附着乳酸菌的多样性为益生性乳酸菌的筛选提供优质资源及数据参考。     

双功能域β-折叠桶碱性植酸酶蛋白序列分析与酶学特性

【目的】表达、纯化来源于Bacillus sp.HJB17的双功能域β-折叠桶碱性植酸酶(phy HT),并对该酶进行蛋白序列以及酶学特征分析,为该酶的广泛应用奠定基础。【方法】应用生物信息学技术,对phy HT蛋白序列进行了生物信息学分析。表达、变复性、分离纯化得到具有酶活性的可溶性phy HT蛋白溶液,通过硫酸亚铁-钼蓝法对phy HT的酶学特性进行了研究。【结果】序列分析结果显示,phy HT由633个氨基酸组成,含有2个植酸酶结构域,属于典型的BPP植酸酶,相对分子量(MW)为69321.68 Da,理论等电点为5.37,为亲水性蛋白。二级结构中,phy HT中α-螺旋(helix)、β-片层(sheet)占主要的比例,高级结构以β片层形成的桶状结构为主。酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为35°C,在45°C以下比较稳定。最适的p H为8.0,在p H为6.0–12.0条件之间比较稳定。低浓度的Ca~(2+)以及Mg~(2+)对酶活性有促进作用,Fe~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Cu~(2+)、Ni~(2+)等金属离子对酶活性有抑制作用。【结论】本研究成功对phy HT进行了蛋白序列分析以及酶学性质研究,phy HT属于碱性植酸酶,酶活性高、稳定性好,在理论研究和工业生产方面均有很大应用价值。     

骨科患者伤口分泌物病原菌分布及耐药性分析

目的:了解我院骨科患者伤口分泌物病原菌分布及其耐药性情况,为临床上对骨科患者合理使用抗生素提供相关理论根据。方法:将2013年2月至2014年8月我院282例术后骨科患者的伤口分泌物标本接种培养,按要求分离纯菌,采用VITEK 2Compact全自动微生物分析仪进行鉴定及药敏试验。结果:282份标本中分离出致病菌186株(65.96%),其中革兰氏阴性球菌94株(50.54%),革兰氏阳性球菌83株(44.62%),真菌9株占4.83%。分离率排在前三位的致病菌分别为阴沟肠杆菌(19.35%),金黄色葡萄球菌(17.20%),表皮葡萄球菌(15.59%)。阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢唑林和氨苄西林的耐药率最高,其中阴沟肠杆菌对头孢唑林耐药率高达100%。但未发现主要革兰氏阴性球菌对亚胺培南耐药。革兰氏阳性球菌对青霉素的耐药率较高,但未发现革兰氏阳性球菌对万古霉素耐药。结论:术后骨科患者伤口优势菌种是阴沟肠杆菌,而且耐药性高;临床医生应根据病菌鉴定和药敏分析结果,对不同种类的病原菌使用不同的抗生素进行针对性治疗。     

ICU患者呼吸道感染病原菌的分布及耐药性监测

目的了解华中科技大学同济医学院附属同济医院ICU患者呼吸道感染病原菌的分布及细菌耐药性特征,指导临床合理、科学地使用抗菌药物,为有效控制危重患者肺部感染提供依据。方法回顾分析该院2004年1月至2008年12月ICU患者呼吸道感染的病原菌分布情况,并分析其耐药性变化。结果该院ICU患者呼吸道感染病原菌主要为鲍曼不动杆菌(aba)、铜绿假单胞菌(pae)和金葡菌(sau),其中泛耐药菌株有增多趋势。耐苯唑西林金葡菌(MRSA)的检出率在77.5%~100%。药敏数据显示,pae对常用抗菌药物耐药率均较高,在25.5%~95.3%;aba仅对头孢哌酮/舒巴坦耐药率低,为12.2%,但中敏率较高,为41.7%,对其他常用抗菌药物耐药率均较高。MRSA对所有的β-内酰胺类抗菌药物均耐药,苯唑西林敏感的金葡菌(MSSA)对青霉素和红霉素耐药率较高,分别为97.1%和47.2%,对其他常用抗菌药物较敏感。结论该院ICU患者呼吸道感染以aba、pae和sau为主,且耐药现象严重,对临床常用抗菌药物有多重耐药现象,临床医生应根据药敏结果合理使用抗菌药物。     

关于有效教学的讨论——谈高三复习课的有效性

1 问题提出 我们在评价一节高三复习课时,往往认为教师讲授的信息量大,内容充实,条理清晰,知识的构建完整而严密,内容的扩展既有深度又有广度就是一堂高质量的课,而且也能显示教师深厚的功底.     

植物抗病防卫反应中的特异性钙信号

在植物细胞中,钙离子是普遍存在的第二信使,参与多种信号途径.大量研究表明,钙信使系统参与植物与病原菌互作的信号转导过程.近些年来,特异性钙信号在抗病中的作用越来越受到关注.文章综述了近年来在植物表达防卫反应过程中特异性钙信号的形式及其形成的生理机制的研究进展.     

PHP14通过与Vimentin相互作用影响TGF-β诱导的肝细胞AML-12上皮-间质转化

目的:探讨PHP14在上皮-间质转化中的作用及其可能作用机制。方法:建立了研究上皮-间质转化的细胞模型小鼠肝细胞AML-12。在AML-12中过表达PHP14,通过光学显微镜进行形态学观察,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测AML-12上皮-间质转化中相关标志物的表达情况。通过免疫共沉淀检测PHP14与Vimentin的相互作用情况。结果:小鼠肝细胞AML-12可作为研究上皮-间质转化的较好细胞模型。在AML-12中过表达PHP14可促进AML-12细胞的上皮-间质转化,并增强其运动能力。过表达PHP14可上调Vimentin的蛋白质水平,而对其他上皮-间质转化相关标志物表达没有影响。进一步的研究发现,PHP14可与Vimentin相互作用。结论:PHP14通过与Vimentin相互作用,稳定Vimentin的蛋白质水平,从而参与并调节上皮-间质转化。     

丙泊酚用于颅脑损伤手术患者的麻醉效果及对血清SOD、颅内压的影响

目的:分析丙泊酚用于颅脑损伤手术患者的麻醉效果及对血清超氧化物歧化酶(SOD)、颅内压的影响。方法:选择2017年3月-2019年3月我院收治的颅脑损伤手术患者100例纳入本次研究,根据麻醉方式分为观察组(n=51)和对照组(n=49)。对照组使用七氟烷进行麻醉诱导,观察组采用丙泊酚进行麻醉诱导。比较两组患者呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间、术中心率,麻醉前(T0)、手术中(T1)、手术结束时(T2)时SOD、颅内压、心率(HR)、平均动脉压(MAP)、视觉模拟(VAS)评分、简易智能量表(MMSE)水平的变化情况及不良反应的发生情况。结果:观察组呼吸恢复时间、睁眼时间、拔管时间及术中心率均显著短于对照组,差异显著(P0.05);T0时,两组SOD、颅内压水平比较无显著差异;T1、T2时,两组SOD、颅内压水平均较T0时下降,且观察组SOD水平显著高于对照组,颅内压低于对照组(P0.05);T0时,两组HR、MAP水平比较无显著差异;T1、T2时,两组HR、MAP水平均较T0时升高,且观察组低于对照组(P0.05);术前,两组VAS、MMSE评分比较无明显差异;术后,两组VAS、MMSE评分水平均较T0时下降,且观察组MMSE评分水平均显著高于对照组,VAS评分水平显著低于对照组(P0.05);两组不良反应总发生率分别为5.88%、16.33%,组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:丙泊酚用于急性颅脑手术患者具有较好的麻醉效果,能明显降低患者血清SOD、颅内压水平,减轻颅脑损伤。