AFLP分析中多态性扩增产物的回收、克隆及鉴定

本研究在摸索和优化了水稻AFLP分析体系的基础上,发展了多态性AFLP产物的高效克隆方法。特异AFLP扩增产物直接从变性聚丙烯酰胺凝胶上分离纯化,再经过一至二轮PCR扩增,即可高效地克隆于pGEM-Teasy vector系统中。本实验利用该方法成功地克隆了水稻温敏核不育等位突变系546 0S和5460F间的4个多态性AFLP产物,Southern bloting分析证明其中3个产物在水稻基因组中为单拷贝序列,另一个为低拷贝序列。AFLP技术强有力的多态性检出能力再结合多态性扩增产物的高效克隆方法,为寻找与目标基因紧密连锁的分子标记提供了有力工具。 Abstracts:An efficient method for cloning DNA fragment from denaturing polyacrylamide gels was developed to allow the isolation of specific bands obtained from amplified fragment length polymorphism(AFLP)products.After isolation and purification from the thin denaturing polyacrylamide gels,specific AFLP products were successfully cloned after one or two rounds of PCR reamplification.Using this method 4 polymorphic AFLP products between a pair of rice allelic lines differing for thermo-sensitive genic male sterile(TGMS)ene were cloned and it was confirmed that 3 of the AFLP products represented single copy sequences and the other 1 represented low copy sequence in rice genome.     

清栓酶治疗冠心病17例

清栓酶治疗冠心病１７例林火成翁南星（福建省厦门市湖里医院厦门３６１００６）本组应用清栓酶治疗冠心病１７例,取得了较好的疗效,报告如下。１临床资料１．１对象本组１７例冠心病,按世界卫生组织制定的诊断标准,其中男性１２例女性５例;干部１１例,工人３例,个...     

由气单胞菌的一个新种引起的一次爆发性鱼病的病原学研究

本文报告1988年夏季对北京地区一次爆发性鱼病病原学研究的结果。从病鱼脏器和池塘疫水中分离到革兰氏阴性杆菌,其中氧化酶阳性菌株占75.6%,大多数为溶血性菌株,而不发病鱼池的健康鱼中氧化酶阳性菌株为0.1～1%,详细的生化检定证明这些细菌为气单胞菌,且为同一血清型,但不同于现已报告的亲水气单胞菌,豚鼠气单胞菌,温和气单胞菌,凡隆气单胞菌和舒伯特气单胞菌,而为气单胞菌的一个新种。流行病学资料与实验感染健康鱼发病成功,证明该菌是这次鱼病的病原菌。     

pH和NAA,KT,6-BA对籼稻芽鞘呼吸的影响(简报)

水稻芽鞘经KT,6-BA,NAA分别处理12小时后,其呼吸受到促进,KT,6-BA促进作用大于NAA。pH6.9处理对呼吸促进的程度比pH5.9大,pH7.9反而降低呼吸。pH值对激素处理效应的影响为pH5.9大于pH6.9。pH5.9时NAA处理不改变ICDH/G-6-PDH比值,pH6.9时则使比值下降。     

DGGE/TGGE技术及其在微生物分子生态学中的应用

变性梯度凝胶电泳(DGGE)和温度梯度凝胶电泳(TGGE)是近些年微生物分子生态学研究中的热点技术之一。由于DGGE／TGGE技术具有可靠性强、重现性高、方便快捷等优点,被广泛地应用于微生物群落多样性和动态性分析。文章对DGGE／TGGE技术原理与关键环节、局限性和应用前景进行了综述。     

美丽红豆杉种子化学成分的研究(Ⅰ)

从美丽红豆杉种子中分离得到1个甾醇和9个紫杉烷类化合物,鉴定为β-谷甾醇(1),5α-cinnamoyloxy-9α％,10β,13α-triacetoxy-taxa-4(20),11-diene(2),taxinine(3),taxinine J(4),taxinine B(5),taxinineE(6),10-deacetyltaxinine(7),taxuspinew(8),decinnarnoyltaxinineE(9)和紫杉醇(10)。除化合物2、3、4以外,其它均为首次从该植物种子中获得。     

Cdk1在浆液性卵巢癌中的表达及其与化疗耐药及预后的相关性

目的:卵巢癌是女性生殖致死率最高的恶性肿瘤。Cdk1作为细胞周期依赖性激酶中的核心分子,对肿瘤细胞的发生发展具有重要作用。本文旨在探讨Cdk1蛋白在上皮性浆液性卵巢癌中的表达情况,并分析其表达水平与患者临床病理特征、化疗反应及预后之间的关系。方法:采用免疫组化法检测68例浆液性卵巢癌中Cdk1蛋白的表达情况,并结合临床资料分析Cdk1蛋白的表达水平在浆液性卵巢癌患者中的意义。结果:Cdk1在浆液性卵巢癌患者中具有不同程度的阳性表达,其表达水平和患者的年龄、病理分化程度、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关性(P0.05),但是其高表达与化疗耐药明显相关(P=0.040)。化疗耐药的卵巢癌患者中Cdk1的蛋白表达明显高于化疗敏感组,并且生存分析发现,高表达Cdk1的患者预后较差。结论:本研究证明Cdk1在浆液性卵巢癌中有较高表达,并且Cdk1的表达与卵巢癌化疗后复发有关,高的Cdk1表达预示着较差的预后。Cdk1可能是晚期浆液性卵巢癌治疗的新靶点。     

西瓜核心种质的AFLP指纹图谱和SCAR标记

西瓜(Citnllus lanatus (Thunb.) Mansf.)种质资源的鉴定与评价是对其有效利用的基础。以往的研究表明,西瓜是一种遗传资源特别狭窄的作物,在用同工酶、RAPD及SSR技术对西瓜种质资源进行鉴定时,发现很难将品种完全区分开来。本研究利用高效可靠的AFLP技术,对30个西瓜核心种质材料进行了遗传分析,最终建立了这30个材料的DNA指纹图谱。在该图谱中,每个材料均有其独特的“指纹”,材料之间可以相互区分开来。为了进一步利用AFLP分子标记,将重要抗病种质材料“P1296341”的AFLP特异带转化成了生产上可以直接利用的SCAR标记。     

从原子核物理到磁共振成像 ———2003年诺贝尔生理或医学奖简介

今年10月6日,由50名卡罗琳斯卡医学院(Karolinska Institutet)教授组成的诺贝尔奖评选工作组(The Nobel.Assembly)决定,2003年度的诺贝尔生理、医学奖授予美国伊利诺大学的化学、生物物理学和计算生物及生物工程学教授Paul C.Lauterbur和英国诺丁汉大学物理学教授:PeterMansfield爵士,以表彰他们对建立磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)技术所做出的杰出贡献。MRI的发明是医学科学研究和临床诊断的一个重要突破。该技术不但可以显示活体组织     

山葵的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　山葵 (Ｅｕｔｒｅｍａｗａｓａｂｉ)品种达摩(种子购自云南 )。2　材料类别　秋播苗的顶芽或侧芽。3　培养条件　启动培养基 :( 1 )ＭＳ + 6 ＢＡ 0 .2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) +琼脂 7ｇ·Ｌ- 1 +蔗糖 2 0 ｇ·Ｌ- 1 。增殖培养基 :( 2 )ＭＳ + 6 ＢＡ 4+ＮＡＡ 0 .1 +蔗糖 30ｇ·Ｌ- 1 ;( 3)ＭＳ + 6 ＢＡ 0 .2 +ＫＴ 0 .2 +ＮＡＡ 0 .0 5 +琼脂 7ｇ·Ｌ- 1 +蔗糖 30ｇ·Ｌ- 1 。 ( 4 )ＭＳ + 6 ＢＡ 4+ＮＡＡ 0 .1 +琼脂 7ｇ·Ｌ- 1 +蔗糖 30ｇ·Ｌ- 1 。生根培养基 :( 5 )ＭＳ +ＮＡＡ 0 .1 +琼脂 7ｇ·Ｌ- 1 +蔗糖 30ｇ·…