遗传多样性的分子检测

生物多样性的保护和可持续利用是维持全球经济稳定和发展的重要因素，也是保持我们赖以生存环境的重要内容。为了实现这一目的，必须尽快建立一套对生物多样性认识和检测的有效方法，逐步认清全球生物多样性的基本状况。本文论述了生物多样性特别是物种间和物种内多样性的几种主要检测方法，着重介绍分子标记的最新进展及比较基因组学的兴起在生物多样性研究中的广泛应用。  

温敏核不育水稻5460S细菌人工染色体文库的构建和鉴定

为了构建温敏核不育 (TGMS)基因区域的精细物理图谱并最终分离TGMS基因 ,以温敏核不育水稻 5 46 0S为材料 ,摸索优化了构建植物细菌人工染色体 (BAC)文库的方法 ,构建了一个高质量的BAC文库 .该文库由 1 95 84个克隆构成 ,插入片段平均长度为 1 1 0kb ,相当于水稻单倍体基因组大小的 5倍 ;以分子量分别为 1 40和2 5 0kb的 2个大BAC克隆进行稳定性传代实验 ,经 1 0 0代传代后其插入的DNA片段仍然稳定存在 ;以线粒体和叶绿体基因为探针筛选BAC文库 ,未检验出叶绿体和线粒体DNA的污染 ;以和tms1基因连锁的 3个分子标记作为探针对BAC文库进行了筛选 ,每个探针至少可获得一个阳性克隆 ,利用热不对称性交错PCR(Tail PCR)法成功分离了阳性克隆的左右末端序列 .  

小麦胞质突变型雄性不育系85EA与其保持系线粒体DNA的比较研究

８５ＥＡ是通过电子束辐照获得的胞质突变型小麦不育要用ＲＦＬＰ和ＲＡＰＤ技术对８５ＥＡ及春保持系的线粒体ＤＮＡ进行了比较研究。ＲＦＬＰ分析表明８５ＥＡ线粒体基因组中ｃｏｘⅡ基因的位置结构与保持系发生了变化；ＲＡＰＤ分析中引物ＯＰＤ－１５扩增产物在不育系和保持系间有明显差异，不育系的扩增产物比保持系多１条分子量为０．６ｋｂ的特展览 要带，用Ｔ－ｅａｓｙ ｖｅｃｔｏｒ克隆该不育系特异条带并命名为ＯＰＤ－  

从植物细胞核分离大分子量核DNA

研究了从植物中分离百万碱基对级大分子量核DNA的方法。该方法利用差速离心分离植物细胞核，经低熔点琼脂糖块或低熔点琼脂糖微珠包埋，蛋白酶K原位裂解后制备大分子量核DNA。结果表明，选择不同生长时期的材料和不同的包埋细胞核方式对大分子量核DNA的制备有很大的影响，由黄化苗或幼嫩的绿叶为材料分离细胞核，进行胶块包埋是制备大分子量核DNA的最佳条件。利用该法获得的DNA分子量在200kb－5．7Mb之间，主要集中在2．2～5．7Mb之间；每一胶块DNAE量为18～20μg。与包埋原生质体制备大分子量核DNA的方法相比，该方法获得的DNA纯度较高，去除了大部分细胞器DNA的污染；易于被限制性内切酶部分和完全消化，其消化结果具可重复性。该方法操作简单、适用植物种类广泛，用该方法从水稻（OryzasativaL．）、苹果（MaluspumilaMill．）、大豆（Glycinemax（L．）Merr．）、玉米（ZeamaysL．）等多种植物材料中成功地制备了大分子量核DNA。该方法制备的核DNA适用于植物的脉冲交变电泳基因组分析和构建人工细菌染色体文库和人工酵母染色体文库。  

水稻的AFLP研究初报——反应条件的优化及对温敏核不育等位突变系的分析

通过对５４６０Ｓ和５４６０Ｆ这一对水稻等位突变系的ＡＦＬＰ分析，比较了ＡＦＬＰ与ＲＡＰＤ及ＲＦＬＰ检测ＤＮＡ多态性的相对效率。结果表明，这３种分子标记的ＤＮＡ多态性检出效率依次为ＡＦＬＰ＞ＲＡＰＤ＞ＲＦＬＰ；找出了水稻ＡＦＬＰ分析的最适反应条件；在这对等位突变系之间找到了一些多态性ＡＦＬＰ产物，已完成了对４个多态性ＡＦＬＰ产物的克隆，其中３个为单拷贝顺序；用这３个单拷贝克隆的混合物为探针，对作者自己构建的５４６０Ｓ水稻的ＢＡＣ库进行了筛选，获得了１２个阳性克隆，为今后ＢＡＣ库的筛选打下了基础。此外，对上述３种分子标记各自的优缺点及它们在ＤＮＡ多态性检测中的适用之处进行了分析探讨。  

中国杏属一新种

描述了中国杏属一新种, 华仁杏（Armeniaca cathayana D. L. Fu, B. R. Li et J. H. Li, sp. nov.）。该新种与杏（Armeniaca vulgaris Lam.）和山杏（A.sibirica(L.) Lam.）相似，但又有其独特特征，主要区别如下：叶两面疏被短柔毛，边缘具单锯齿和重锯齿，基部全缘；叶柄无腺体；单花或2～3朵花簇生；子房密被白色长柔毛；果核三角状卵球形，腹缝线具5～7条锐纵棱，背缝线具1条浅纵沟；种子大，两侧压扁，种仁质脆，无苦味。该新种由傅大立于2008年7月11日在河北省涿鹿县发现并采集，模式标本存于中国林业科学研究院（CAF），标本号：No.2008071101。