综述与专论：阿尔茨海默病体外诊断纳米技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种最常见的神经退行性疾病。AD的精准诊断技术,特别是早期诊断技术是临床亟需的。近年来,以生物标志物为基础的非侵入性体外诊断技术发展迅速,特别是利用纳米材料和纳米技术的高表面活性、独特的光电特性、生物相容性好、易于表面修饰、小型化、集成化等特点,发展了新型的AD体外检测和诊断的纳米技术,大大提升了AD检测的灵敏度和准确性,并且具有简便快速等特点,在AD疾病的早期诊断、预后判断以及疗效评估等方面发挥着重要的作用。本文综述了AD蛋白质类生物标志物检测纳米技术的研究进展,介绍了纳米材料在生物标志物富集方面发挥的重要作用,阐述了以纳米材料为基础的光电信号转导技术以及增强检测信号和提高检测灵敏度的方法。除此之外,还简要介绍了AD纳米检测技术在临床诊断、预后和疗效评估方面的应用前景,总结了AD体外诊断技术的优势及面临的挑战,为AD精准诊疗研究提供参考信息。     

宁夏灌区春小麦形态结构及干物质分配对不同时期干旱胁迫的响应

于2018年,以宁夏主推春小麦品种"永春4号"为试验材料,设置了6种不同灌水处理来研究春小麦形态结构及干物质分配对不同时期干旱胁迫的响应过程及机制。结果表明:全发育期不灌水处理使发育期缩短达11 d;分蘖期及拔节期干旱会导致春小麦穂下茎节缩短、叶面积和株高显著下降、叶片提前变黄衰退;分蘖期缺水对叶面积影响最大,拔节期缺水对株高影响最大;干旱影响春小麦干物质的积累和分配,分蘖期干旱使叶片占干物质总量的比重下降,叶鞘占干物质总量的比重上升;与CK组相比,全发育期干旱处理的穗长、穗数、穗粒数和千粒重分别显著下降5.9%、43.4%、9.6%和7.6%;分蘖期轻微干旱显著降低小麦穗数,但显著提高小麦穗粒数和千粒重;开花-灌浆期干旱对小麦千粒重影响最大,与CK组相比千粒重下降17.4%。     

METTL3对皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖和分化的影响研究

皮肤鳞状细胞癌来源于表皮干细胞的自我更新和分化的平衡失调。近来研究表明,甲基转移酶3(METTL3)介导的m6A修饰在多种癌症研究中成为前沿热点。然而, METTL3在皮肤鳞状细胞癌中的作用尚未报道。该研究目的在于了解METTL3在皮肤鳞状细胞癌发生中的作用。通过构建shRNA敲低皮肤鳞状细胞癌中METTL3,研究其对WTAP、METTL14以及m6A修饰水平的作用。此外,应用免疫组化、免疫印迹、qPCR以及裸鼠荷瘤实验,在体外和体内水平研究敲低METTL3对鳞状细胞癌增殖、分化和自我更新的影响。结果显示, METTL3在鳞状细胞癌细胞中表达上调。敲低METTL3能降低METTL14以及m6A修饰水平。敲低METTL3促进癌细胞的分化,并增加IKKα的表达;同时抑制癌细胞的增殖和自我更新,降低自我更新相关基因的表达。综上,该实验证明了METTL3在调节皮肤鳞状细胞癌细胞分化和自我更新中的关键作用。该研究也为皮肤鳞状细胞癌的治疗提供一个新的靶点。     

NSE在颅脑手术前后患者血清中的动态变化及其与预后的关系

目的 分析颅脑手术前后患者血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)的动态变化与治疗效果、预后的相关性.方法 对我科2012年5月~2013年1月入院行择期手术的颅脑手术患者90例,按临床诊断分类分组进行手术.分别于术前1天,术后第1、3、7天抽取空腹外周静脉血,使用双抗体夹心ELISA法测定NSE的血清浓度,并与正常对照组比较.结果 手术组中除面肌痉挛组外,术前血清中NSE含量均较对照组明显升高(P＜0.01).手术组术后第1、3天血清中NSE含量均较对照组明显升高(均P＜0.01).术后第7天,手术组中除面肌痉挛组外血清NSE含量较对照组明显升高(P＜0.01).各手术组血清NSE含量在术后均迅速上升,第1天达高峰,然后逐渐下降.根据预后评分,预后恶劣组血清NSE高于预后良好组(P＜0.01).行颅脑手术患者血清中NSE术前及术后第1、3、7天值与GOS评分呈负相关(r分别为-0.463、-0.682、-0.735、-0.748,均P＜0.01).结论 动态监测血清NSE对不同颅脑手术患者手术前后进行病情评估、疗效观察及预后判断具有重要价值.     

灵动之鸟——在人类梦想中翱翔

在漫长的人类历史进程中,鸟儿很久以前就与童年的人类相互依存,也在人类早期的精神世界中留下了悠远而婉转的高鸣低吟,为我们的祖先带来难以言状的美好感悟,不仅进而催生了原始先民们对自然生灵的惊诧和敬畏,更多的是以令人心动的神话故事和上古传说来表现潜藏于人类内心深处的丰富复杂、纠缠萦绕的种种庸感,以及那灵魂深处的美丽憧憬和梦想。     

蛋白酪氨酸激酶NOK／STYK1胞内区的表达与纯化

目的：酪氨酸蛋白激酶NOK／STYKl具有很强的促肿瘤形成和转移能力,被认为是很有前途的肿瘤治疗靶点。由于NOK含有一个跨膜区,且富含疏水性氨基酸,其表达和纯化非常困难,直接影响了对其功能及相关分子机理的深入研究。本研究目的是获得可溶的且纯度较高的NOK胞内区融合蛋白ANOK（AA：49—422）,为后续抗体的制备和功能研究奠定重要基础。方法：含有△NOK基因的原核表达载体,转入E-coliBL21中,IPTG诱导蛋白表达,通过亲和层析获得可溶的△NOK融合蛋白。融合蛋白经凝血酶酶切后,凝胶过滤层析分离标签蛋白获得z~NOK蛋白。同时,我们还通过Bac-to-Bac系统获得含有ANOK基因的杆状病毒,感染sO细胞,尝试在真核细胞中表达目的蛋白。结果：通过在sf9昆虫细胞和大肠杆菌表达系统中盐浓度等各种条件的摸索,首次获得了可溶的且纯度较高的NOK胞内区融合蛋白（ANOK—GST）和一定量去除标签的ANOK蛋白。本研究中与大肠杆菌相比,昆虫细胞并不适合△NOK的纯化。结论：我们建立了一套优化的NOK蛋白表达和纯化体系,从而为后续抗体制备和各种体内外生化实验等功能研究奠定基础,为研究NOK在肿瘤中的作用和药物筛选创造条件。同时丰富了整个RTKs家族作用机制的探索,进一步促进了以RTKs为靶点的治疗手段在临床上的应用。     

浅议经典阅读现状及推广经典阅读的意义

全球化时代,世界范围内的阅读风气在沦丧,但经典的魅力却从未因此而消退。经典是长期以来,一个甚至几个民族决定阅读的书籍,是世世代代人出于不同的原因,以先前的热情以及神秘的忠诚而决定阅读的书。当今社会更要推广经典阅读。     

蜜蜂残翼病毒TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立

蜜蜂残翅病毒(Deform wing virus,DWV)已成为世界上最著名、分布最广、研究最为深入的昆虫病原.虽然DWV以前存在于蜜蜂种群中,但一种新的媒介一外寄生螨Varroa破坏体的到来和全球传播,极大地促进了 DWV的流行病学.为了建立快速、准确且能定量分析的蜜蜂残翅病毒,DWV检测方法,本研究参照GenBank中已登录的DWV高度保守的3C-RdRp基因区域,设计了 1对特异性引物和带有羧基荧光素(Fast Auxiliary Memory,FAM)与淬灭基团(Eclipse)标记的TaqMan探针,并对反应条件进行优化,建立了检测DWV的TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PCR检测方法(TaqMan qRT-PCR),同时对该检测方法的特异性、敏感性、重复性进行了试验,并对临床样品进行检测.结果显示:该方法最佳上下游引物和探针浓度分别为12.5μmol/L和10μmol/L,最佳退火温度为59℃;敏感性试验中,对DWV质粒标准品检测下限为2.58×101拷贝/μL;本方法特异性较好,对蜜蜂常见病毒-蜜蜂慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)、蜜蜂急性麻痹病毒(Acute paralysis virus,ABPV)、黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)、囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)、以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)和中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)无交叉反应;且批内变异系数和批间变异系数均小于2％.利用该方法对49份临床疑似样本进行检测,其中DWV阳性样本为35份,检出率高于常规RT-PCR方法,且病毒载量大于1×107拷贝/只样本数共24份,表明辽宁和河北部分地区感染DWV蜂群中病毒载量较高,流行情况比较严重.因此,本研究建立的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,能够用于DWV病原监测、流行病学调查和病毒定量分析等相关研究.     

模拟酸雨对南亚热带典型森林土壤N2O排放的影响

基于长期模拟酸雨森林样地,利用箱式法同步测定了不同酸雨强度处理下森林土壤N₂O排放通量,研究了模拟酸雨对我国南亚热带针阔叶混交林和季风常绿阔叶林两种代表性森林土壤N₂O排放的影响。结果表明: 连续5年(2014—2018年)观测周期内,两种林型土壤N₂O排放通量在各模拟酸雨处理下均表现出明显的季节变化特征,湿季排放通量高于干季,并且年际变化较大。受2017—2018年度降水减少的影响,此期间两种林型土壤N₂O排放通量普遍较低。两种林型土壤N₂O排放通量与土壤温度和土壤湿度呈显著正相关。季风常绿阔叶林对照样方土壤N₂O排放通量为12.6 μg N₂O m^-2·h^-1,与对照相比,pH 3.5和pH 3.0条件下土壤N₂O排放通量分别上升42.9%和61.1%,模拟酸雨显著增加了季风常绿阔叶林土壤N₂O排放通量;模拟酸雨同样有促进针阔叶混交林土壤N₂O排放的趋势,但各处理间差异不显著。在酸雨依旧严峻的形势下,我国南亚热带典型森林土壤N₂O排放通量将增加,且不同林型的增幅不同。     

类泛素蛋白ISG15及其在先天免疫中的作用

病毒感染和干扰素刺激高等动物细胞,均可以强烈地诱导表达干扰素刺激基因15编码的蛋白ISG15,它是最早发现的类泛素修饰蛋白.虽然针对泛素及其修饰功能已进行了广泛而深入地研究,但对于ISG15共价修饰以及它的生物学功能了解甚少,有待进一步探讨.该领域的研究近几年有所突破,发现了有关ISG15修饰的酶系统,ISG15及其修饰系统在先天免疫以及干扰素信号调节中的重要作用.简要介绍ISG15的发现历史、生化性质、基因调控特点以及ISG15修饰系统中所涉及的酶,总结目前研究ISG15及其修饰与调节先天性免疫相关过程的一些最新进展.