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四个烙铁头蛇毒凝集素样蛋白基因的克隆与序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从烙铁头蛇(Trimeresurus mucrosquamatus)的毒腺中提取mRNA,利用RT-PCR进行体外扩增,获得凝集素样蛋白基因,克隆至PMD18-T载体中,筛选出4种凝集素样蛋白基因(命名为TML-1、MTL-2、TML-3和TML-4)。由基因序列推导出的氨基酸序列表明:TML-1,2,3,4序列中均有CRD结构。序列同源性比较和Cys位点分析推测:TML-1和TML-2可能分别是类似于flavocetin-A的蛇毒凝集素样蛋白的α亚基和β亚基;TML-3可能类似于GPIb-bp的蛇毒凝集素样蛋白的α亚基,TML-4则可能是类似于Ⅸ/Ⅹ-bp的蛇毒凝集素样蛋白的β亚基。 相似文献
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用CM—Sephadex C—25分离竹叶青粗毒,再经DEAE—Sephadex A—50和CM—Sephadex C—25纯化得到凝血酶样酶组分Ⅰ。用DEAE—Sephadex A—50分离竹叶青粗毒,再经DEAE—Sepharose CL—6B纯化得到凝血酶样酶组分Ⅱ。用聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,组分Ⅰ在两种电泳中均为一条带; 组分Ⅱ在两朴电泳中均为二条带,经切割后鉴定证明组分Ⅱ的二条带都是凝血酶样酶。组分Ⅰ的分子量为54,500,由261个氨基酸残基组成,其中Asp和Glu含量较高,含14%中性己糖,13.1%己糖胺和14.7%唾液酸,等电点为3.5,在280nm处的消光系数为E_(1cm)~(0.1%)=0.855。组分Ⅱ的分子量分别为54,000和47,000。经凝胶电泳分离后用过碘酸—Schiff's试剂染色,证明组分Ⅰ和组分Ⅱ都是糖蛋白。 相似文献
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本文报道烙铁头(Trimeresurusmucrosquamatus)蛇毒纤维蛋白原溶酶(TMVFg),眼镜王蛇(Ophiophagushannah)蛇毒纤维蛋白原溶酶(ohS1),竹叶青(Trimeresurusstejnegeri)蛇毒专一纤溶酶原激活剂(sv-pA)对5种小分子多肽底物的底物专一性,及这些蛇毒丝氨酸蛋白酶对各种凝血因子(第X因子、凝血酶原、纤溶酶原、蛋白C)的作用,并和其它蛇毒丝氨酸蛋白酶如矛头蝮(Bothropsatrox)蛇毒凝血酶样酶(Batroxobin)、铜头蝮(Agkistrodoncontortrixcontortrix)蛇毒蛋白C激活剂ACC-C、蝰蛇(Viperarusselli)毒第Ⅴ因子激活剂RVV-V进行比较研究。通过酶标偶联免疫反应研究了抗sv-PA抗体与各种丝氨酸蛋白酶的免疫交叉反应,并对蛇毒丝氨酸蛋白酶及相应功能的哺乳动物蛋白酶进行了序列比较分析。从底物专一性多样性及已知序列结构分化上对这一类蛇毒丝氨酸蛋白酶的结构与功能进行了探讨和研究。 相似文献