掺假饲料酵母中尿素含量的测定

掺假饲料酵母中尿素含量的测定张庆华，罗辉芬，王艳华（辽宁省微生物研究所，朝阳１２２０００）随着养队业的迅猛发展，蛋白质饲料越来越缺乏，饲料酵母以其蛋白质含量高，氨基酸齐全等优势逐渐占领市场，也深受广大养殖户的欢迎。但是由于国家尚未制定饲料酵母的国家标...     

新型MGB探针在沙眼衣原体实时PCR检测中的应用

为建立基于TaqMan-MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法,探讨其临床应用价值,用 PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG440 2 464～2 980 nt段,并克隆入pMD18-T载体用作参比模板,设计一对引物和一个TaqMan-MGB探针,优化反应条件,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,并运用该系统同时应用连接酶链式反应(LCR)法对临床标本进行检测.结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统,最低检测限度为1 DNA拷贝每反应;在10⁰～10⁹ DNA拷贝每反应范围内,C_t值(每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数）和DNA拷贝数呈线性关系（r＞0.990）;对临床标本检测结果同LCR分析结果吻合率为100%.以上结果表明,所建立的基于TaqMan-MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.     

长效益生素菌株的筛选及生产工艺的初步研究

益生素是一种能够替代抗生素的绿色饲料添加剂。报道了通过对益生素菌种的初筛和复筛、菌株药敏实验、菌体吸附方法及产品的中试研究 ,确定了生产工艺 :采用筛选的地衣芽孢杆菌YS 0 2 ,在特定的培养基和培养条件下 18～ 2 2h ,通过 10 %CaCO3 吸附、过滤、干燥获得微生态制剂 ,其活菌数≥ 15 0亿 / g。实验证明 ,YS 0 2活菌制剂可替代抗生素防治动物习惯性腹泻。     

新型Taq Man-MGB探针在结核分枝杆菌实时PCR检测中的应用

为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立方法的有效性 .结果显示 ,所建立方法的最低检测限度为 1个基因拷贝 反应 ,在每反应 1 0 0 ～ 1 0 8拷贝范围内 ,Ct 值同DNA量的对数呈线性关系 .同一模板不同时间或同一时间不同管内扩增 ,所得Ct 值恒定 .用该方法检测 37例结核分枝杆菌培养阳性的痰液标本 ,敏感度为 1 0 0 % ;用该方法检测 1 6例TB系列阴性参考品 ,特异性为1 0 0 % .结果表明 ,所建立的方法是用于结核分枝杆菌定性定量检测较理想的方法     

提高液体曲纤维素酶活力的初步研究

在筛选纤维素降解菌的过程中,我们发现在液体曲上纤维素分解菌的酶活力普遍较低,为了提高液体曲纤维素酶活力,我们进行了部分条件试验,试图阐明某些化学因素对纤维素酶活性的影响,为纤维素酶生产提供实验依据。互材料与方法】．1材料里．1．1试验菌株烟曲霉FOI（ASPergilIusf。migat。sFresenfus）。卫．1．2培养基及培养方法斜面培养基：PDA培养基液体培养基（yo）：鼓皮2,玉米芯2,硫酸按0．4,磷酸二氢钾0．2,硫酸镁0．05,蛋白陈0．1,PH自然。培养方法：100ml／500ml三角瓶,1．okg／cm‘灭菌3Omin,冷却,接种量约Icm‘…     

病毒与细胞中参与mRNA加帽过程的酶

病毒与细胞中参与ｍＲＮＡ加帽过程的酶张庆华陈继明（南京农业大学动物疫病诊断与免疫重点实验室,南京２１００９５）关键词ｍＲＮＡ加帽酶病毒与真核细胞的ｍＲＮＡ的５′端ｍ７ＧｐｐｐＮ帽子结构有增加ｍＲＮＡ稳定性等重要功能,并为核糖体识别所必需。这一帽子结构...     

应用大规模测序技术和生物信息学研究造血干/祖细胞的基因表达及新基因的识别和克隆

从新生儿脐血和成人骨髓中分选出造血干／祖细胞（ＨＳＣ／ＨＰＣ）,构建成ｃＤＮＡ文库,对其进行大规模表达序列标签（ＥＳＴ）测序,通过生物信息学等手段分析基因表达谱,并进行新基因的全长ｃＤＮＡ克隆。在所测的１０５１２条可分析ＥＳＴ序列中,有９８６６条来自脐血ＣＤ３４＋细胞,其中４６９７条（４７６％）为已知基因,２６０３条（２６４％）为已知ＥＳＴ,１４１５条（１４３％）代表未知ＥＳＴ。在已知基因中,８２％基因与造血相关,２２７％涉及细胞代谢、结构和迁移,１３０％与细胞分裂和防御相关,２６２％与ＲＮＡ、蛋白质的合成相关,１０６％和细胞信号传递有关。对一些已知和未知的ＥＳＴ,综合测序、生物信息学等方法,进行全长克隆,已获得２３个新基因的全长ｃＤＮＡ。     

变质豆浆中腐败微生物的分离与初步鉴定

从5种变质豆浆中分离得到3株腐败菌株S1、S2和S3。3株菌均能在1×105Pa、30min杀菌条件下和添加300mg/kgNisin杀菌条件下存活。对分离菌株进行了菌落形态、生理生化特征和16SrDNA序列分析,鉴定结果表明3株菌均为革兰氏阴性细菌,分别为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和短芽孢杆菌(Brevibacillus borstelensis),GenBank登录号为EF439666~EF439668。