中国丁氏双鳍电鳐乙酰胆碱酯酶的制备亲和层析

Acelylcholinesterase was purified from the electric organs of Torpediniforms nacline timelci by affinity chromatography. "Pure" enzyme preparation as identified by PAGE analysis was obtained. The specific activity is 78 mmol ACh/h/mg protein. Sedimentation coefficient is 11.86 S. Molecular weight is 236000. Acidic amino acid and basic amino acid contents are 22% and 12% respectively. Circular dichroism pattern shows two negative valleys at 209 and 220 nm.Optimum substrate concentration is 1-3 mM ACh with Km around 0.18 rnM. Excess substrate causes inhibition of enzyme activity. Optimum pH lies between 7.5-8.0. Bovine serum albumin and phosphatidylcholine benefits the stability of enzyme activity. The pure enzyme can be stored at - 20癈. Repeated freezing and thawing causes sharp inac tivation.     

大肠杆菌梭曼水解酶的纯化和性质

大肠杆菌梭曼水解酶的纯化和性质邵煌,刘昌玲,肖美珍,孙曼霁（北京军事医学科学院毒物药物研究所,北京１００８５０）梭曼属Ｇ类神经性有机磷毒剂．自然界发现多种细菌中均存在梭曼水解酶（Ｓｏｍａｎａｓｅ）活性［１－３］．研究细菌梭曼水解酶,寻求生物解毒的方法...     

大鼠胆碱酯酶mRNA在卵母细胞中的表达

ＡＧＰＣ法是一种快速、简便、有效的ＲＮＡ提取方法。参照该法自新生大鼠脑组织中提取出总ＲＮＡ,进一步通过ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－纤维素亲和层析分离获得ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ。当ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ或总ＲＮＡ经显微注射法进入非洲爪蟾卵母细胞后,其翻译系统能够利用外源ｍＲＮＡ合成具有催化活性的胆碱酯酶。表达的胆碱酯酶大部分分泌到卵母细胞培养液中。在一定范围内,ｍＲＮＡ的注射量与胆碱酯酶的表达量成正比。所合成的胆碱酯酶活性可被毒扁豆碱和Ｓ－（２－二异丙基氨乙基）甲基硫赶膦酸乙酯（ＶＸ）抑制。     

人血清Q型对氧磷酶在大肠杆菌中的表达

目的:应用大肠杆菌原核表达系统高效表达人血清Q型对氧磷酶(PON1)。方法:从pBlueScript-PON1重组质粒中通过PCR扩增得到了人PON1基因,将其亚克隆至原核表达载体pBV220中,构建了重组表达质粒pBV220-PON1,转化大肠杆菌,获得表达菌株。结果:rhPON1重组蛋白以不溶形式存在于包涵体中。凝胶扫描分析表明,重组蛋白表达量约占菌体总蛋白的18%。包涵体经分离、变性、复性等步骤处理后,产物未显示酶活性。结论:原核表达的rhPON1以包涵体形式存在,实现了人PON1在大肠杆菌中的高效表达。     

生长激素/胰岛素样生长因子1与阿尔茨海默病

生长激素／胰岛素样生长因子-1（GH／IGF-1）轴的合成、分泌、调节及生物学活性与阿尔茨海默病（AD）有密切关系。生长激素（GH）的合成和分泌受生长激素释放激素（GHRH）正向调节。GH／IGF-1轴活性下降导致一系列生理功能变化。GH／IGF-1缺乏可引起衰老及神经退行性变（AD）而导致认知功能的下降,相应激素的补给可以抑制或逆转这种认知障碍。越来越多的证据表明：GH／IGF-1参与AD型痴呆病理过程,对AD有很好的治疗应用前景。本文就生长激素／胰岛素样生长因子1在AD发病中的机理和药理学研究做一综述。     

人羧酯酶的研究进展

羧酯酶是一类可与有机磷化合物结合且活性受抑制的B－酯酶,分布很广,能水解许多羧酯类、酰胺类、硫酯类物质,其天然底物尚未清楚,故其生理功能仍在研究中,可能与脂质代谢,药物或毒物的生物转化有关．对羧酯酶的一级结构及基因序列的研究表明,羧酯酶是由许多生化特性不同的同工酶组成．     

人血清中的对氧磷酶

对氧磷酶能够水解强毒性农药对氧磷而受到许多学者的重视,但国内尚未见报道.文章综述了人血清中对氧磷酶的分布、特异性、分离纯化、多态性、遗传学特性、与疾病的关系以及对有机磷化合物毒性的防护作用．这有利于进一步研究对氧磷酶的生物学性质、生理功能及其应用．     

非侵入性脑内给药

血脑屏障使许多具有中枢神经活性的药物无法到达脑部发挥作用,非侵入性脑内给药因对机体无创伤而受到研究者广泛关注。本文介绍了血脑屏障的物质转运系统以及经鼻粘膜、渗透性血脑屏障开放、纳米粒载体和转运载体法等非侵入性脑内给药方法的机制和特点。     

过氧化氢酶催化梭曼水解机理的FTIR研究

利用傅里叶交换红外光谱法（ＦＴＩＲ）分析了过氧化氢酶在溶液中的二级结构和过氧化氢酶与过氧化氢、叠氮化钠以及梭曼作用后酶结构的不同改变,并比较了梭曼与细胞色素Ｃ和糜蛋白酶作用的结果。说明过氧化氢酶作为一种氧伦还原酶使过氧化氢分解或与叠氮化钠结合时,不导致酶空间结构的明显改变;但作为一种水解酶与梭曼反应后则出现酶分子的正常β－折叠结构降低和分子间聚合,而其构象变化与梭曼抑制糜蛋白酶的反应相似,揭示了过氧化酶催化梭曼水解机理的重要信息。     

羧酸酯酶研究进展

哺乳动物羧酸酯酶carboxylesterase(EC3.1.1.1)组成一个多基因家族,其基因产物定位于多种组织的内质网中。羧酸酯酶能有效地催化酯类和酰胺类化合物水解,属丝氨酸水解酶家族。羧酸酯酶与多种药物、环境毒物及致癌物的解毒和代谢有关,并参与脂质运输和代谢。作者详细介绍了羧酸酯酶的生化性质、作用机理及其分子生物学方面的最新进展。