PK15细胞凋亡过程中角蛋白中间纤维的变化

用放线菌素D诱导上皮型猪肾细胞PK15（Porcrne Kidney-15)发生凋亡,细胞在凋亡诱导过程中经历了从铺展、皱缩变圆至脱落的形态变化。凝胶电泳证明被诱导细胞的DNA发生降解,形成明显的DNAladder。免疫荧光显示凋亡过程中细胞角蛋白网状结构发生改变;应用选择性抽提结合整装电镜技术,观察到凋亡细胞中仍有中间纤维网络存在,这一现象前人未曾报道,免疫印迹反应进一步证明,凋亡细胞中部分Ⅱ型角蛋白发生降解。而Ⅰ型角蛋白则无降解现象。     

C6神经酰胺能诱导人血管内皮细胞(HUVECs)迅速出现衰老样变化(简报)

神经酰胺是一种神经鞘磷脂类代谢的关键分子,也是一种第二信使分子。它能抑制磷脂酶D的活性,从而抑制细胞周期的进行。神经酰胺参与细胞的分化、凋亡和衰老等多种生理代谢反应。许多细胞因子如:TNF、IL-1、Fas ligands等都能引起神经酰胺水平的升高;神经酰胺作为第二信使执     

某些动物病毒在宿主细胞内的繁殖特点

共研究了9种动物病毒在宿主细胞内的繁殖特点。 一、无囊膜的病毒粒子在宿主细胞内常呈晶格排列。经常可观察到A型口蹄疫病毒在胞质内呈晶格排列,但0型口蹄疫病毒却观察不到晶格排列。 二、观察到猪传染性水泡瘸病毒的特异装配形式。 三、病毒繁殖时,诸如线粒体、粗面内质网与溶酶体等重要细胞器超徽结构的变化,似与病毒的分类地位无关。 四、大多数RNA病毒繁殖时,宿主细胞核的超微结构变化明显,而DNA病毒繁殖时,宿主细胞核早期超微结构的变化不显著。 五、动物病毒感染时能引起宿主细胞内出现一些新的结构,除毒浆结构(Viropla”)外,还有层板膜结构,微管与徽纤维。     

植物细胞类角蛋白的纯化、序列分析与类中间纤维cDNA的克隆

从胡萝卜悬浮培养细胞中纯化了64,55 ku两种类角蛋白,并对其部分氨基酸序列进行了测定,同源性比较结果表明64 ku蛋白与β-葡糖苷酶同源,55 ku蛋白未发现同源序列.以动物中间纤维蛋白的保守序列为引物,从胡萝卜悬浮培养细胞中克隆到一个cDNA片段,Southern,Northern杂交结果表明该片段为单拷贝,并在胡萝卜悬浮培养细胞及叶片中均表达,同源性比较揭示其与一些含有α-螺旋的基因序列有一定的同源性.以上结果为从分子水平上证明植物中间纤维的存在提供了一条线索.     

植物细胞中含有类角蛋白多肽及角蛋白cDNA的同源序列

根据中间纤维对去圬剂和高盐溶液的抗性,用类似动物细胞中间纤维抽提的方法,对玉米和烟草的叶肉细胞进行选择性抽提处理,提取中间纤维的蛋白成份。蛋白经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳后,用动物细胞角蛋白的单克隆抗体进行免疫印迹反应,主要显示了分子量为52kD和64kD两种多肽成份。同时,提取玉米和烟草的DNA与α-~(32)P标记的兔K_3cDNA片段RB_3进行点杂交,均呈现较强的阳性反应,说明它们的基因组DNA中存在角蛋白基因的同源序列。     

辛德毕斯病毒装配及其6K蛋白与中间纤维的关系

用温和的选择性抽提方法与整装细胞电镜技术,DGD包埋-去包埋剂电镜技术相结合,对辛德毕斯病毒的装配与宿主细胞中间纤维的关系进行了探讨。电镜观察清晰地显示了病毒“装配中心”被中间纤维所网络,病毒的装配过程显然是以中间纤维为支架;正在装配的核壳体与已装配的核壳体紧密结合在中间纤维丝上。根据电镜照片分析,核壳体可能是沿中间纤维由装配中心向外扩散。应用人工合成6K蛋白所得抗体进行胶体金标记,证明辛德毕斯病毒非结构性6K蛋白也与中间纤维紧密结合。     

非细胞体系细胞核重建研究的进展

非细胞体系细胞核重建技术是近年发展起来的一项细胞生物学研究技术。主要包括精子染色质在蛙卵提取物中诱导核重建、外源纯化DNA在蛙卵提取物中诱导核重建、有丝分裂中期细胞匀装物核重建等几种体系。目前,应用前二者进行的研究工作较多,第三种体系的工作进展较慢。在各种体系中重建的细胞核,在结构上都基本难以与一般细胞核相区别,在功能上也都表现出一定的生物活性,如DNA复制、物质的主动运输、对细胞周期调节因素作出反应并能进入M期等。应用这一模式,已经进行了核重建过程及其机理、细胞核各组分间的相互作用、细胞周期的调控与重建核生物学活性等多方面的研究。非细胞体系核重建研究工作还正在向纵深发展中。     

不同条件对植物中间纤维体外装配的影响(简报)

细胞骨架的研究是当今细胞生物学中最为活跃的领域之一,而中间纤维是三种主要骨架纤维中研究较少的一种。从60年代发现至今,人们对动物细胞中间纤维的研究已经比较深入,近来又发现它在基因表达等重要生命活动中起一定的作用。中间纤维有一个显著的特征,就是能够在体外进行自我装配,不需要核苷酸和结合蛋白参加,也不依赖于蛋白质的浓度。植物细胞中是否存在中间纤维一直是未解决的问题。从80年代起,有一些研究发现在高等植物细胞中存在能与动物细胞中间纤维抗体进行     

牛传染性鼻气管炎病毒的繁殖的冰冻蚀刻研究

用冰冻断裂和蚀刻技术对牛传染性鼻气管炎病毒及其在细胞中的繁殖进行了观察。验证了Furlong等提出的疱疹病毒核壳体模型;同时发现在细胞膜上大片形成吞饮泡,细胞质泡状结构的膜上颗粒随机分布于PF和EF面． 本文对这些现象与病毒繁殖及细胞骨架的关系进行了讨论。