实验兔胞内单精子注射技术

目的 建立实验兔胞内单精子注射技术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI).方法 实验1比较了hCG注射后不同取卵时间对ICSI胚体外发育的影响.实验 2 比较了不同的激活方式对ICSI胚体外发育的影响.实验 3 比较了不同状态的兔精子ICSI胚胎体外发育结果.结果 (1)hCG注射后14 h取卵,其卵裂率、桑椹胚率和囊胚率(82.2%、72.9%和62.2%)都比16 h(75.9%、70.0%和53.3%)的高,但是差异无显著性(P>0.05);18 h取的卵注射后不能卵裂.(2)机械刺激组和离子霉素 6-DMAP组,ICSI后其卵裂率分别为82.2%和81.1%(P>0.05),桑椹胚率分别为72.9%和66.2%(P>0.05),囊胚率分别为51.3%和62.3%(P<0.05),机械刺激组和离子霉素组之间卵裂率和桑椹胚率差异无显著性,但是囊胚率差异有显著性.(3)新鲜精子组和冻融活精子组卵裂率(81.1%和68.8%)和囊胚率(62.3%和40.4%)差异有显著性(P<0.05),而桑椹胚率(66.2%和61.9%)差异无显著性(P>0.05).结论 精子冷冻前后,通过ICSI所得的桑椹胚均能孵化,表明已初步建立了实验兔的ICSI技术.     

血清Dickkopf1蛋白水平对原发性肝癌的诊断价值

目的:探索血清Dickkopf1(DKK1)水平对原发性肝癌(PLC)的诊断价值。方法:将我院收治的50例PLC患者、60例良性肝病患者、50例健康体检者及50例其它恶性肿瘤患者分别组成PLC组、良性肝病组、健康对照组及其他肿瘤组,采用ELISA定量检测各组血清DKK1蛋白的浓度,分析和比较其与α-fetoprotein(AFP)单独或联合诊断PLC的效能。结果:PLC组血清DKK1水平(838.96±104.14 ng/L)明显高于良性肝病组(322.61±25.44 ng/L)及健康对照组(213.03±25.70 ng/L),差异有统计学意义(P0.05)。AFP、DKK1单独鉴别诊断PLC和良性肝病的灵敏度分别为66%、46%,特异度分别为81.7%、96.7%,一致率分别为71.8%、73.6%;两者联合诊断的灵敏度、特异度及一致率分别为84%、78.3%、80.9%。AFP、DKK1联合诊断PLC的灵敏度和一致率均明显高于AFP、DKK1单独诊断。结论:血清DKK1在原发性肝癌中高表达,与原发性肝癌的发生密切相关,对PLC的早期诊断有一定参考价值,与AFP联合诊断可有效提高PLC的诊断效能。     

农村患者医疗费用变化影响因素分析

目的 描述农村患者医疗费用变动的影响因素,探寻控制医疗费用不合理增长的有效措施。方法 以两个特大型城市的两个区为例,采用描述统计方法,分析农村患者医疗费用的主要影响因素。结果 参加合作医疗的农民在不同级别医院间的就诊流向对次均医疗费用影响较大。结论 应提高农村基层医疗机构的服务能力,加强对定点医疗机构的监管,以控制农村患者医疗费用的过快上涨。     

基于小波变换的卧龙国家级自然保护区植被时空变化分析

提出一种基于小波变换从长时间序列、大范围遥感数据中快速、自动化检测植被动态变化的方法。以MODIS 500m空间分辨率,16d合成的NDVI数据为数据源,对受到2008年5月12日汶川地震严重影响的卧龙国家级自然保护区内2003年至2012年的植被动态变化进行时空分析,为保护生态多样性及生态系统的稳定性提供依据。研究表明:1)地震后保护区内植被指数减少的面积大范围增加,且波动较震前更为明显,统计分析结果能够更为直观地反映地震及其次生灾害等极端现象对该地区植被的破坏程度;2)保护区内植被指数极值变化多发生在夏季或秋季,较低海拔地区极值变化多发生在夏季,而在高海拔地区则多发生在秋季;3)在大熊猫最适宜栖息的区域(2600—2800m)植被指数极值减少量大于0.4的范围大于增加量大于0.4的范围,反映出植被在震后的恢复状况并没达到理想的水平。同时发现在该海拔区域范围内植被指数减少的面积在春夏两季较大,表明在该时间段卧龙地区大熊猫最适宜生存区域的植被情况较为不稳定,需更为关注其动态,采取适当的保护措施。     

两种抗冷冻剂对不同品系小鼠精子冷冻的影响

目的建立一套比较理想的小鼠精子冷冻复苏的方法。方法采用R18S3和FERTIUPTM-CPA两种保护剂,对DBA/2、C57BL/6J、KM和B6.129S7-Ldlrtm1Her/J四个品系的小鼠精子进行冷冻,冷冻精子用三种方法复苏,以体外受精率来评价精子冷冻的效果。结果以R18S3作为冷冻保护剂,DBA/2(73.3%,88.4%,55.6%)和KM(64.9%,60.2%,39.6%)品系小鼠冷冻精子复苏后体外受精率差异显著(P<0.05),C57BL/6J(3.0%,10.3%,3.7%)和B6.129S7-Ldlrtm1Her/J(0%,5.0%,0%)结果差异不显著(P>0.05);以FERTIUPTM-CPA作为冷冻保护剂,DBA/2(33.6%,14.1%,91.6%)、C57BL/6J(8.4%,21.0%,4.9%)和B6.129S7-Ldlrtm1Her/J(8.2%,10.0%,28.9%)品系小鼠冷冻精子复苏后体外受精率差异显著(P<0.05),而KM(48.1%,48.0%,48.1%)小鼠冷冻精子复苏后体外受精率差异不显著(P>0.05)。结论对于DBA/2和KM品系小鼠来说,用R18S3或FERTIUPTM-CPA冷冻精子,选择一种恰当的复苏方法,均可以得到较理想的体外受精率,而C57BL/6J和B6.129S7-Ldlrtm1Her/J品系小鼠无论采用哪种冷冻保护剂,选择何种方法复苏精子,得到的体外受精率都较低。     

致癌剂DEN、促癌剂巴豆油对大鼠肝α_1抑制因子3基因表达的影响

本文对致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)和促癌剂巴豆油对大鼠肝α_1-抑制因子3(α_1- I_s)基因表达的影响进行了观察。结果表明:在腹腔注射DEN(200mg/kg·b.w.)后2h,α_1- I_3 RNA水平即显著下降;4h左右有所回升,约为正常水平的四分之一;然后又下降至极低水平,并一直保持该水平至24h。同时,c-myc RNA在2h则被诱导,约为正常水平的2-3倍;之后,即在4至24h内虽有波动,但基本处于正常水平。在腹腔注射巴豆油(18mg/kg.b.w.)后1h,α_1-I_3RNA水平即下降,约为正常水平的1/8,此后有所回升,约为正常水平的1/3-1/4;在同样条件下,ODC和C-fos RNA能被巴豆油诱导而增加。我们以前的工作表明,在大多数(75％,12/16)由DEN所诱发的大鼠肝癌中,α_1- I_3RNA水平显著下降,且基因结构发生了变化。综合这些结果,说明α_1- I_3基因或与该基因表达有关的蛋白调控因子可能是致癌剂DEN或促癌剂TPA的作用靶分子。该基因表达异常的意义及机理正在深入研究中。     

心脏超声在卵圆孔血流受限胎儿中的筛查分析

摘要 目的：分析与探讨心脏超声在卵圆孔血流受限胎儿中的筛查价值。方法：2019年1月-2020年9月在本院进行产前心脏超声筛查的孕妇58例,都给予常规超声与组织多普勒成像,记录影像学特征并判断诊断价值。结果：58例胎儿判断为卵圆孔处血流受限18例,占比31.0 %。受限组的卵圆孔大小、卵圆瓣长度、继发隔长度都少于未受限组(P<0.05)。受限组的D-FOC值低于未受限组(P<0.05),Vm-PV、Vm-FOC值高于未受限组(P<0.05)。受限组的左心室E、A、E''、A''值都低于未受限组(P<0.05)。结论：心脏超声作为检出胎儿心脏畸形的有效手段,可通过观察胎儿卵圆孔血流频谱与形态来鉴别诊断卵圆孔血流受限,是孕期诊断卵圆孔血流受限的最有效方法之一。     

IVF-20培养液用于大鼠体外受精的实验研究

目的探讨人用体外受精液用于实验大鼠体外受精的可行性,为实验大鼠的胚胎保种提供参考。方法选用人体外受精IVF-20培养液作为大鼠精子获能和受精培养液,对SD、Wistar、GK、F344等四种不同品系的实验大鼠进行体外受精;用mR1ECM培养液对体外受精所得胚胎进行体外培养实验。同时,将所得2-细胞胚胎移植给经假孕处理的受体鼠。结果四个品系大鼠体外受精后的卵裂率分别可达83.2%、72.6%、87.8%和71.6%。体外受精卵裂胚能够在体外进一步发育,SD大鼠囊胚发育率为16.7%,与体内受精胚胎在体外培养的囊胚发育率(24.5%)差异不显著。80枚2-细胞胚胎移植给2只受体鼠后均妊娠成功,产下正常仔鼠10只,产仔率12.5%。结论用于人体外受精的IVF-20培养液同样适合于实验大鼠精子的体外获能和受精,可以在多种品系获得较高的卵裂率,所得卵裂胚能够在体外发育到囊胚,并且所得卵裂胚在移植给受体鼠后能够产下正常仔鼠。     

供磷水平和根际效应协同影响含碱性磷酸酶基因细菌群落的网络复杂性和稳定性北大核心

【目的】通过研究长期不同供磷水平下根际、土体土壤中编码碱性磷酸酶基因(alkaline phosphatase gene,phoD)细菌群落特征、网络复杂性、群落的稳定性及其与磷酸酶活性之间的关系,揭示供磷水平和根际效应在调控土壤有机磷矿化中的微生物学机制。【方法】选取华北平原长期施磷的小麦-玉米轮作体系石灰性土壤为基质土壤,开展根箱试验。选取的试验处理包括3个供磷水平,分别是0、50.0、200.0 kg P/hm^(2)(分别表示为P0、P50、P200)。玉米种子播种30 d后,采集玉米的根际土和土体土。采用高通量测序技术分析根际和土体土壤中编码碱性磷酸酶基因(phoD)细菌群落,探究施肥及根际效应对含phoD基因细菌的群落特征、网络特征的影响及其与磷酸酶活性的关系。【结果】随着施磷量的增加,速效磷(available P,AP)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性在根际、土体土壤中均显著提高,且两者呈显著正相关。phoD基因丰度在P0、P200处理的根际土壤中显著高于土体土壤。含phoD基因细菌群落的α多样性在P50处理下的根际土壤显著高于土体土壤。冗余分析(redundancy analysis,RDA)表明,土壤中AP、有机磷(organic P,Po)和全磷(total P,Pt)是影响微生物群落的主要因素。与不施磷处理(P0)相比,施磷处理(P50、P200)下根际土壤中网络节点数和连接数降低,而土体土壤中网络节点数和连接数增加;同时,施磷处理含phoD基因细菌群落的鲁棒性(robustness)在根际土壤中显著提高,而在土体土壤中显著降低。Mantel检验表明,含phoD基因微生物群落中的优势物种在根际土壤与AP、酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、内聚力(cohesion)和网络的鲁棒性显著相关,在土体土壤中无显著性。【结论】供磷水平及根际效应协同影响phoD基因丰度、含phoD基因细菌群落的α多样性、群落结构、优势物种、网络的复杂性及群落的稳定性,进而影响磷酸酶活性,调控了土壤中有机磷的矿化。