苹果主栽品种高效遗传转化系统的建立及其影响因子的研究

研究影响农杆菌介导的苹果主栽品种遗传转化的若干因子效应,建立起新乔纳金苹果简单、高效的遗传转化系统。外源基因向新乔纳金苹果细胞转移的效率明显高于皇家嗄拉和富士苹果。菌株ＥＨＡ１０５介导基因转移的能力比菌株ＬＢＡ４４０４明显高。用乙酰丁香酮、磷酸饥饿、低ｐＨ值等ｖｉｒ基因诱导因子处理菌株ＥＨＡ１０５的细胞,未能提高转化效率。叶片在菌液中的浸泡时间不仅影响基因转移效率,而且影响头孢霉素对外植体上农杆菌生长的抑制效果。共培养时,叶片远轴面与培养基接触比近轴面与培养基接触的转化效率高。     

柞蚕卵母细胞发育和卵黄磷蛋白摄入

在蛹化第一天的卵巢管中一可见卵母细胞已经分化．但大小和滋养细胞接近。到第三天,卵母细胞体积明星增大,细胞核大而清新,滋养细胞排列趋于规则．滤胞细胞仍为合胞体．分布于卵巢管的周围,以后,滤胞细胞分化,卵母细胞开始摄取卵黄蛋白,并随着卵黄沉积而增大,滋养细胞逐新缩小消失。从卵母细胞纯化出卵黄磷蛋白并制备抗血清．对卵黄磷蛋白的摄入进行了研究,观察到卵黄磷蛋白是由滤胞细胞间隙经滤细胞膜主动运输进入卵母细胞的。     

草莓miR390靶基因TAS3的克隆及表达分析

以栽培草莓品种‘全明星’为试材,通过3′-和5′-RACE技术克隆出miR390靶基因TAS3的cDNA全长,命名为FaTAS3。序列分析发现:草莓TAS3基因的cDNA全长为742 bp,含有16个碱基的Poly A尾巴及2个高度保守的ta-siRNA产生位点和1个miR390靶位点;该基因DNA全长为824 bp,5′ 端130 bp处有一个98 bp的内含子序列。生物信息学软件预测显示,草莓TAS3基因的启动子除具有TATA/CAAT-box外,还含有G-box、C-box等特异作用元件。实时定量RT-PCR结果表明,草莓miR390与靶基因TAS3间的表达模式与拟南芥中的表达模式相同,推测草莓TAS3基因的生物合成也受miR390的指导。     

Expression of apoptosis-related genes Fas/FasL,Bax/Bcl-2 and Caspase-3 in rat corpus luteum during luteal regression

Using immunohistochemistry, in situ hybridization, Western blot and TUNEL methods, we have studied the expression of Fas/FasL, Bcl-2/Bax and caspase-3 in the corpora lutea (CL) at various stages of pseudopregnant rat induced by injection of PMSF/hCG. The results showed that no apoptotic signal could be observed until Day 14 after hCG injection. Fas weakly expressed in the CL at all the stages increased when luteolysis took place. FasL signal increased dramatically on Day 14 and reached the maximum level on Day 21. The expression of Bcl-2 and Bax was detected in a time-dependent manner. At the early stage of CL development, Bcl-2 expression was stronger, while Bax was low. The expression of Bcl-2 and Bax in the CL was completely reversed. Caspase-3 antigen could be detected throughout all the phases of CL development in a time-dependent fashion, low on Day 2 and reaching the maximum on Day 21. These results suggest that luteal regression at the late phases may be related to cell apoptosis.     

子宫内膜接受性与金属蛋白酶及其抑制因子表达之间的关系

为了研究RU486抗着床的机理和子宫内膜接受性与金属蛋白酶MMP-2及其抑制剂TIMP-1,3之间的关系, 用注射RU486的小鼠作为模型, 研究了注射不同剂量RU486对小鼠胚胎着床率的影响, 以及在着床窗口期子宫内膜中MMP-2和TIMP-1,3表达量的变化. 结果显示, 注射RU486能明显抑制胚胎的着床, 而且有剂量依赖性. 在着床窗口期, 子宫内膜中MMP-2表达量的升高和TIMP-1,3表达量的降低不利于胚胎着床. 提出RU486的抗着床作用可能是通过诱导MMP-2的表达和抑制TIMP-1,3的表达实现的.     

草莓MET1基因启动子克隆及瞬时表达分析

根据草莓MET1类DNA甲基转移酶基因(FaMET1)全长序列设计引物,通过PCR获得了该基因翻译起始位点上游669 bp的序列.生物信息学分析表明,该序列中存在启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box和多个胁迫诱导元件.进一步构建了FaMET1基因启动子驱动GUS的植物表达载体FMpro::GUS,通过农杆菌注射法转化草莓果实细胞,结果表明,该序列能够驱动GUS在草莓果实中瞬时表达,为进一步研究FaMET1的表达调控奠定了基础.     

无胶筛分毛细管电泳在分析苹果发育时期转变蛋白质变化规律中的应用

对无胶筛分毛细管电泳体系的筛分介质浓度、缓冲体系的离子强度、分离电压、进样量及温度等条件进行了优化, 最终确定最佳分离条件为7.5% Dextran, 7.5%丙三醇, 0.15 mol.L-1 TB, 0.1% SDS, 分离电压23.5 kV, 进样量1.5 ps i×90秒, 温度25°C。应用此方法对金冠×红玉苹果杂种后代韧皮部蛋白质进行测定, 得到了多个与阶段转变相关的蛋白质, 在韧皮部50节上, 有分子量为5.0 kDa的特异蛋白质出现, 分子量为24.5 kDa的蛋白质含量在阶段转变过程中明显升高。     

无胶筛分毛细管电泳在分析苹果发育时期转变蛋白质变化规律中的应用

对无胶筛分毛细管电泳体系的筛分介质浓度、缓冲体系的离子强度、分离电压、进样量及温度等条件进行了优化,最终确定最佳分离条件为7.5% Dextran,7.5%丙三醇,0.15mol·L^-1 TB,0.1%SDS,分离电压23.5kV,进样量1.5psi×90秒,温度25℃。应用此方法对金冠×红玉苹果杂种后代韧皮部蛋白质进行测定,得到了多个与阶段转变相关的蛋白质,在韧皮部50节上,有分子量为5.0kDa的特异蛋白质出现,分子量为24.5kDa的蛋白质含量在阶段转变过程中明显升高。     

抑制素和激活素亚基在恒河猴隐睾中的表达

抑制素和激活素亚基在恒河猴隐睾中的表达@张志宏$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @魏鹏$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @陈鑫磊$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @周新昌$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @胡召元$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室! 中国 北京100080 @刘以训$中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国…     

苹果四倍体品种天星的花粉形态及胚囊发育特征研究

利用扫描电子显微镜(SEM)和激光扫描共聚焦显微镜( LSCM)技术对二倍体富士苹果及其四倍体芽变品种天星的花粉性状及胚胎发育特征进行了观察与研究,结果表明:四倍体天星品种的畸形花粉率为10.27％,明显高于富士,花粉萌发率低,为62.42％.2个品种的花粉粒大部分侧面观为长椭圆形,具3沟型萌发孔沟,两极端形状宽而平整,极面观为三角形,但四倍体天星的花粉粒的极轴长和赤道轴长均大于二倍体富士,但P/E值小,差异显著,其花粉粒形状不及二倍体富士规则且饱满程度也低.四倍体天星的花粉表面为纵向条状纹饰,有少量分叉和穿孔,花粉外壁略显粗糙,不如二倍体富士的外壁光滑.天星和富士均为蓼型胚囊,二者均存在异常胚囊现象,天星的异常胚囊现象包括极核位置异常、极核数目异常、卵器结构异常、胚囊内有多个发育滞后的细胞等;而在富士中仅发现少数胚囊结构不完整的现象.