感染蛴螬的一种新虫草

描述了感染鞘翅目幼虫的茂兰虫草新种(CordycepsmaolanensisZ.Y.LiuetLiangsp．nov．）,其主要物征为子座单生,可孕部分白色,近球形或卵圆形,其皮层栅状,100～125μm;柄中部地上和地下相交处有瘤节,子囊壳黄色,埋生,600～700×300～350μm;子囊柱状,300～450×3～4.5μm;每个子囊具有4个丝状多隔的子囊孢子,次生子囊孢子柱状,6～8×1．5μm,这些特征与近似种Cgracilis,C.gracilioides,C.insignis,C.entomorrhiza,C.amazonicda,C.amazonica,和C.amazonicavar．neoamazonica有明显的不同。     

蜻蜓拟青霉多型性的扫描电镜观察及RAPD分析

通过电镜扫描观察,清楚地显示了蜻蜓拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｏｄｏｎａｔａｅ Ｌｉｕ,Ｌｉａｎｇ ＆ Ｌｉｕ）的两种类型产孢结构,即拟青霉型椭圆形分生孢子的链状排列和枝顶孢霉型柱状分生孢子头状排列,同时将椭圆形分生孢子和柱状分生孢子进行单孢分离,对各单孢株作了培养特征观察,形态学观察和ＤＮＡ随机片段扩增分析。结果表明,在形态学上两种孢子单孢子株之间的培养特征和显微特征均无明显差异,同时具有     

亚油酸产生菌诱变育种

采用紫外线复合氯化锂诱变一株产亚油酸真菌拟青霉 3#B ,选出高产株B3a10。其摇瓶发酵生物量达 10 0 75g L ,脂含量达 6 0 0 0 0 % ,油酸 1.876g L ,亚油酸 1.85 4g L ,γ 亚麻酸 6 9 0 0 0mg L ,二十二碳六烯酸32 0 0 0mg L。油酸、亚油酸、γ 亚麻酸、二十二碳六烯酸分别比出发菌株 3#B(95 8mg L)提高了 82 0 ,896 ,30 ,2mg L。     

赤散囊菌MAPKs超家族的鉴定及分析

本研究以赤散囊菌Eurotium rubrum全基因组序列为对象,利用HMMER软件构建隐马尔可夫模型（hidden markov models,HMM）结合BLAST的方法鉴定了促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）超家族。通过构建系统发育树对鉴定蛋白进行分析,并利用MEME软件进行了保守性基序的预测及活性位点注释。分析结果表明,赤散囊菌基因组包含了4个MAPK蛋白,分别属于Hog1-type、MpkC-type、Slt2-type和Fus3/Kss1-type类型;3个MAPK kinase（MAPKK）蛋白,分别属于MKK1-type、Pbs2-type和Ste7-type类型;3个MAPK kinase kinase（MAPKKK）蛋白,分别属于BCK1-type、Ste11-type和Ssk22-type类型。保守性基序分析及注释结果表明,MAPKs超家族蛋白都包含了蛋白激酶活性位点“-D[L/I/V]K-”以及保守性的ATP-binding标签序列。MAPK与MAPKK蛋白分别包含了“-TxY-”和“-SD[I/V]WS-”磷酸化位点,且MAPK蛋白还包含一个保守性的common docking基序（CD motif）,而MAPKKK蛋白则包含了一个功能不明的保守性基序,其一致性序列为“-GTPYWMAPEV-”。研究结果为揭示MAPKs信号途径在赤散囊菌中参与调控的生物学过程奠定了基础。     

茯苓种质资源的RAPD分析

为探讨国内茯苓人工栽培的主要品种和贵州野生茯苓菌株亲缘关系,利用RAPD技术对供试菌株的基因组DNA进行了分析。从41个随机引物中筛选出17个有效引物,共检测到101个RAPD标记位点,其中39个位点(38.6%)具有多态性,通过PAUP软件进行数据处理,采用最大简约法(MP法)进行聚类分析,并建立系统树。结果表明:不同来源的茯苓菌株亲缘关系非常相近,仅在某些引物的扩增物上存在较小的差异。     

谢瓦氏曲霉间型变种esdC基因的功能分析

为了研究谢瓦氏曲霉间型变种esd C基因的功能,构建该基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化及筛选获得敲除突变体,并对突变体的形态进行了初步分析。生物学特性显示:△esd C突变子的子囊结构与野生型相似,子囊孢子均为球形或近球形,无性发育也与野生型无显著差异。但是,在MYA培养基上培养14d后,△esd C突变体菌落的渗出液相对野生型较少,且无皱褶,菌落表面干燥。这些结果表明esd C基因的缺失对孢子结构的影响不显著,为谢瓦氏曲霉间型变种有性调控机制的研究奠定了技术基础。     

谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)esdC基因全长cDNA克隆与序列分析

为探究esdC基因在谢瓦氏曲霉间型变种的结构特征,从已构建的抑制性差减文库(SSH)中筛选得到esdC基因的EST序列,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术扩增该基因片段的5’和3’端,拼接得到全长cDNA1472bp。通过序列分析,该cDNA序列含有一个开放阅读框(ORF),长度为819bp,从396~1214bp,含有30个腺嘌呤尾巴。预测编码273个氨基酸,该蛋白质的等电点pI为9.51,分子量为30.26558kD,为不稳定蛋白。序列同源性分析表明:该基因与费希新萨托菌(Neosartorya fischeri NRRL181)有性发育蛋白EsdC相似度最高,为78%,其保守区序列主要集中于蛋白质的N端。本实验为进一步研究esdC基因的分子功能及可能参与的调控途径奠定基础。     

谢瓦氏曲霉间型变种YchF基因cDNA全长克隆及序列分析

从谢瓦氏曲霉间型变种抑制性差减杂交(SSH)文库中,筛选到一个子囊孢子时期差异表达的序列标签A0128.860,以其序列为模板设计特异性引物,利用RT-PCR及RACE技术克隆获得了该基因的全长cD-NA,命名为eYchF.生物信息学分析显示,该基因包含一个1182 bp的完整开放阅读框(ORF),编码393个氨基酸,相对分子质量为43.4669 kD,预测的理论等电点为6.99,包括一个保守的G domain (guanine nu-cleotide-binding domain)和一个TGS (ThrRS, GTPase, SpoT) domain,为疏水蛋白.序列同源性分析表明:该基因与棒曲霉(Aspergillus clavatus NRRL 1)的GTP结合蛋白YchF相似度为84%,谢瓦氏曲霉间型变种YchF基因的克隆及生物信息学分析为YchF的进一步研究奠定了基础.     

双梭孢虫草无性型的鉴定

从贵州省贵阳市黔灵山采集分别寄生于不同刺蛾茧上,宏观特征呈简单和分枝的双棱孢虫草(Cordyceps bifusispora Eriksson)。经对子囊孢子诱发微循环产孢研究确证,双梭孢虫草的无性型为隔梭孢属(Septofusidium)一新种,双梭隔梭孢(Septofusidiumbifusisporum Liu,Liang & Liu Sp.nov.)。     

蜻蜒拟青霉多型性的扫描电镜观察及RAPD分析

通过电镜扫描观察,清楚地显示了靖蜒拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ　ｏｄｏｎａｔａｅ　Ｌｉｕ,Ｌｉａｎｇ＆Ｌｉｕ）的两种类型产孢结构,即拟青霉型椭圆形分生抱子的链状排列和校顶孢霉型柱状分生抱子头状排列。同时将椭圆形分生孢子和柱状分生孢子进行单孢分离,对各单孢株作了培养特征观察,形态学观察和ＤＮＡ随机片段扩增分析。结果表明,在形态学上两种孢子单孢子株之间的培养特征和显微特征均无明显差异,同时具有相同的ＤＮＡ随机扩增片段电泳谱。