不同二步酶灌注法分离大鼠肝星状细胞的比较研究

目的:在现有二步酶灌注法分离大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的基础上,探索更加高效的分离HSC方法。方法:分别采用链酶蛋白酶+胶原酶循环灌注、链酶蛋白酶非循环灌注+胶原酶循环灌注以及胶原酶单独循环灌注法分离大鼠HSC,比较三种方法的细胞获得率、活性和纯度差异。应用0.4%台盼蓝染色判断活性,结蛋白(desmin)、波形蛋白(vimentin)细胞免疫荧光方法鉴定纯度。结果:链酶蛋白酶非循环灌注+胶原酶循环灌注法细胞获得率高于另两种方法,细胞活力高于链酶蛋白酶循环灌注+胶原酶循环灌注法,三组得到的细胞纯度均高于90%且无显著差异。结论:在三种二步酶灌注方法中,链酶蛋白酶非循环灌注+胶原酶循环灌注法能显著提高HSC获得率,且对细胞活力影响小,不降低细胞纯度,是一种高效的分离方法,有利于HSC相关肝脏疾病的生物学研究。     

国内简讯

天冠集团与清华大学等部门联合攻关的发酵法生产1，3-丙二醇技术，在刚刚通过教育部组织的成果鉴定后，又成功进行了500t／a工业性试验，为微生物法发酵生产1，3-丙二醇的工业化提供了经济可行的工艺路线。据悉，天冠集团正在筹建千吨级的1，3-丙二醇生产线。     

CD3AK细胞的免疫生物学特征及作用分析

目前的临床应用已表明CD3AK细胞用于部分肿瘤术后清除残余肿瘤细胞、经由局部动脉、胸腹腔给药治疗等措施,对加强疾病的控制、延缓复发、延长生存期均有肯定的作用。本文主要针对CD3AK细胞的制备、过继免疫治疗及免疫学特征与作用进行分析。     

脊髓薄片器官型培养技术的研究进展

脊髓薄片器官型培养技术是一项借助体外器官培养技术,通过活体切片机、微孔膜技术的应用,将脊髓一部分分离出来进行培养、研究的技术,该技术具有操作简单,观察直观,且可长时间进行体外实验,便于施加实验因素等特点,为体外研究脊髓的生理、病理变化提供了更多的技术支持和新的途径,但是该项技术在国内目前应用、报道很少,而其应用价值极高,故本文就脊髓薄片器官型培养技术的发展、特点、方法、注意事项、应用等方面对该项技术做一综述.     

介绍一种新的表皮细胞传代方法

我们设计了一种新的传代方法,在传代之前,先用 DispaseⅡ酶,将培养的表皮细胞片整个消化下来,再用0.25—0.3%胰酶冷消化将表皮细胞驱散,进行1:2传代获得成功,传代59次成功率为71.2%。若在培养后7—16天传代,成功率可达80%。本文讨论了此种传代方法比单纯用胰蛋白酶或用胰蛋白酶和EDTA 混合传代方法优越。     

无血清培养中小鼠神经母细胞瘤细胞老化的研究

本文报道应用倒置相差显微术和显微荧光光度术观察无血清培养条件对ＮＢＡ２细胞突起数目和细胞内脂褐素荧光值的影响，以建立神经细胞老化实验研究模型。结果发现：存在着随无血清培养天数的增加，细胞内脂褐素荧光值累积性增加（Ｐ＜０．０１）和培养５天后细胞突起数目渐次性减少（Ｐ＜０．０１）的趋势。结果表明：这一趋势与哺乳类动物和人类老化研究中的神经细胞内脂褐素含量随增龄而增加及神经细胞突起在衰老过程逐渐少消失的     

几种生长调节剂对离体培养黄瓜子叶直接开花的作用(简报)

7～9d龄黄瓜无菌苗的完整子叶，经在添加不同生长调节剂的MS培养基上培养8～20d左右，其营养芽和花芽直接从子叶基部的表面长出，直接形成花的最高频率达25％，1．5mgL－1左右浓度的KT有利，而生长素一般不利于子叶上花的形成，单独添加亚精胺对花形成无促进作用。     

中药人才培养与药事管理

药事管理在我国历史上源源流长 ,但真正成为一门科学研究和发展只是近十几年的事。中药无论从理论上还是实践应用上要想走向现代化、适应社会发展的需要 ,就必须在管理上下功夫。而管理水平的提高 ,重在人才的培养 ,所以对人才药事管理意识的培养就是促进中药现代化的重要环节。　　从目前中药教育状况来看 ,中药人才的专业教育已有一定规模 ,成人教育也发展较快 ,但所有这些培养过程都严重忽视药事管理知识和意识的培养。药事管理是对药学事业的综合管理 ,它应该包括药学理论、药品生产的管理、药品经营的管理、药品科研的管理、药品使用的…     

苹果柠檬酸合酶3基因家族成员鉴定及表达分析

柠檬酸合酶(citrate synthase 3, CS3)是细胞代谢途径中的关键酶之一,其活性调节着生物体的物质和能量代谢过程。本研究旨在从苹果全基因组中鉴定CS3基因家族成员,并进行生物信息学和表达模式分析,为研究苹果CS3基因的潜在功能提供理论基础。利用BLASTp基于GDR数据库鉴定苹果CS3家族成员,通过Pfam、SMART、MEGA5.0、clustalx.exe、ExPASy Proteomics Server、MEGAX、SOPMA、MEME和WoLF PSORT等软件分析CS3蛋白序列基本信息、亚细胞定位情况、结构域组成、系统进化关系以及染色体定位情况。利用酸含量的测定和实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术检测苹果6个CS3的组织表达和诱导表达特性。苹果CS3基因家族包含6个成员,这些CS3蛋白包括473−608个不等的氨基酸残基,等电点分布在7.21−8.82。亚细胞定位结果显示CS3蛋白分别定位在线粒体和叶绿体。系统进化分析可将其分为3类,各亚家族基因数量分别为2个。染色体定位结果显示,CS3基因分布在苹果不同的染色体上。蛋白二级结构以a-螺旋为主,其次是无规则卷曲,b-转角所占比例最小。筛选的6个家族成员在不同苹果组织中均有表达,整体表达趋势从高到低依次为MdCS3.4相对表达含量最高,MdCS3.6次之,其他家族成员相对表达量依次为MdCS3.3>MdCS3.2>MdCS3.1>MdCS3.5。qRT-PCR结果显示,MdCS3.1和MdCS3.3基因在酸含量较低的‘成纪1号’果肉中相对表达量最高,酸含量较高的‘艾斯达’果肉中MdCS3.2和MdCS3.3基因相对表达量最高。因此,本研究对不同苹果品种中CS3基因相对表达量进行了检测,并分析了其在苹果果实酸合成过程中的作用。结果表明,CS3基因在不同苹果品种中的相对表达量存在差异,为后续研究苹果品质形成机制提供了参考。