丙型肝炎病毒核心蛋白在大肠杆菌和毕赤酵母中表达的比较*

为获得丙型肝炎病毒的核心蛋白(Core),将克隆有Core基因的表达载体pBVIL1-Core转化大肠杆菌HB101,温度诱导表达Core蛋白。同时利用PCR方法以含有丙型肝炎病毒全基因的质粒PBRTM/HCV为模板扩增Core基因,克隆进表达载体pPICZαA,构建表达载体pPICZαA-Core,转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115,在甲醇诱导下表达Core蛋白。Western-blot显示Core蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白量占菌体总蛋白的20%;在酵母培养上清     

"植物元素缺乏症"实验教学方法的改进

大学课程里开设“植物元素缺乏症”实验对理解掌握植物生理学矿质营养这一章内容非常重要。我们在按张志良和瞿伟菁（2003）主编的《植物生理学实验指导》（以下简称“指导”）进行的实验教学中感到,学生在长时间的实验过程中往往会失去耐心和兴趣,实验结果出来后也只是被动地核对检索表,而且还缺少必要的实验考核措施,致使学生对植物元素缺乏症记忆不深刻。对此,我们进行了一些改进,提出了一种集知识与趣味于一体的教学方法。     

结核分枝杆菌Rv2626c诱导的细胞免疫应答特性

全球有近1/4的人感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)并长期处于潜伏感染状态。Rv2626c是结核分枝杆菌受DosR调控的重要潜伏感染相关蛋白。本研究对Rv2626c蛋白进行了原核表达和纯化,并以RAW264.7细胞和小鼠为感染模型,对其免疫生物学特性进行了分析。SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果表明,Rv2626c-His融合蛋白主要以可溶形式表达,能与兔抗H37Rv多抗血清发生特异性免疫反应。此外,本研究发现Rv2626c蛋白能结合到巨噬细胞RAW 264.7表面并上调细胞NO的生成;显著诱导促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-6和MCP-1的产生;并能诱导小鼠产生更强的Th1免疫应答。上述研究有利于揭示结核分枝杆菌的致病机制,为新型结核病疫苗的研制奠定了理论基础。     

红豆杉悬浮细胞放大培养的细胞生长与紫杉醇合成动力学

研究了在Murashige&skoog s(MS)和 6 2号两种不同的培养基中 ,红豆杉细胞悬浮细胞从摇瓶到 1 0L机械通气搅拌式反应器放大培养过程中细胞生长与紫杉醇合成动力学 .结果表明 :尽管在不同的培养条件下 ,细胞生长曲线均呈现“S”型 .紫杉醇在延迟期与指数生长期中基本上没有积累 ,而且随着培养规模的增大 ,紫杉醇的含量逐渐降低 .进一步对各级放大培养的细胞生长 ,比生长率与胞内外紫杉醇合成量进行分析 ,发现MS利于细胞生长但不利于紫杉醇合成 ,而 6 2号则相反 .根据此文的结果 ,提出了红豆杉细胞培养条件的优化和大规模细胞培养生产紫杉醇应采取的策略     

反流性食管炎

反流性食管炎 (GERD)是 Allison于 1 946年首先提出[1] ,曾被认为和食管裂孔疝有关。但多数食管裂孔疝并不伴有胃食管反流 ,而 GERD患者常不能证实有食管裂孔疝并存。因此 ,目前尚难确定二者的关系[2 ] 。 GERD是因食管下部括约肌(LES)机能不全致抗反流机制障碍。由于胃酸、胃蛋白酶及十二指肠液反流至食管内致食管粘膜的缺损及炎症。多累及食管下部 [3 ] 。本文对 GERD的生理解剖、病理生理、病因、诊断、治疗及存在的问题作一简要综述。1　生理解剖1 .1　解剖　食管胃结合部存在喷门括约肌。该括约肌由 L ES、 Willis胃斜肌 ,横…     

膳食干预对冠心病患者血压、血脂及体质指数的影响

目的：探讨膳食干预对冠心病患者血压、血脂及体质指数的影响效果。方法：征集冠心病患者120例,病例被随机分为对照组（58例）和膳食干预组（62例）,对比膳食干预前后两组冠心病患者的血压、血脂和体质指数。结果：两组患者干预后收缩压、甘油三酯和总胆固醇水平均下降,且干预组要明显优于对照组,两组间差异具有统计学意义（P<0.05）,但体质指数和舒张压等指标的组间差异不具有统计学意义（P>0.05）。结论：6个月的膳食干预能够较为有效地控制冠心病患者的血压和血脂,可作为改善患者健康状况的有益参考。     

1961—2017年攀西烤烟生育期农业气候资源变化特征

研究当地主要农作物生育期的农业气候资源变化特征,对于区域农业可持续发展具有重要意义。本研究基于四川攀西地区1961—2017年15个烤烟种植县气象站点数据,采用平均温度、平均温度日较差、缺水率和总辐射4个气候因子,分析攀西烤烟种植区全生育期及不同生育阶段光、温、水等农业气候资源时空分布状况。结果表明: 1961—2017年,攀西烤烟全生育期平均温度呈现由南至北逐渐降低的分布特点,大部分区域呈升高趋势,且显著升温的区域占播种总面积的54.5%;攀西东部大部及中部部分区域平均温度日较差呈上升趋势,且显著增大的区域占总面积的76.4%;攀西农区烤烟缺水率从南到北逐渐降低,总体呈上升趋势;攀西农区总辐射量呈现从西南到东北逐步减小趋势,其中,西南部气候倾向率为正值。研究期间,攀西烤烟平均温度在旺长-开始成熟期最高,总体均呈升高趋势;平均温度日较差在移栽-蹲苗期最大;移栽-蹲苗期的缺水率最大;开始成熟-成熟期的总辐射量最大,蹲苗-旺长期略有增长。     

基于网络教学资源建设的微生物学课程内容设计与教学效果评价

利用网络教学开放平台,通过建设和丰富网络教学资源,建立了基于任务和目标导向的微生物学理论和实验课程教学模式,以及形成性学习评价及考核机制。通过理论和实验教学内容的有效融合,不仅节省了教学学时,而且可更好地培养学生独立思考和自主学习能力以及科研创新思维能力。微生物学课程改革问卷调查结果表明,学生对课堂满意度、实验课程满意度均达到90%以上;学生的学习效果、学习兴趣、分析问题与解决问题能力等方面均有明显提高。     

基于谷胱甘肽-磁性微粒的GST融合蛋白纯化体系的建立

本研究将还原型谷胱甘肽(GSH)共价结合在异硫氰酸根末端磁性微粒表面,制备了具有超顺磁性的谷胱甘肽-磁性微粒亲和介质,以表面修饰有谷胱甘肽的磁性微粒为载体,建立了谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白的纯化体系。对100μL细胞裂解液纯化体系所需磁性微粒用量、谷胱甘肽-磁性微粒与细胞裂解液的孵育时间、清洗条件等进行了优化。以聚丙烯酰胺凝胶电泳对融合蛋白的纯度进行了检测,Bradford方法对融合蛋白进行了定量测定,对纯化得到的目的蛋白进行了Western blotting分析。结果表明,每毫克异硫氰酸根末端磁性微粒对GSH的固定化容量为150μg,10 mg谷胱甘肽-磁性微粒可满足100μL细胞裂解体系中目的蛋白的纯化,最佳孵育时间为40 min,对GST融合蛋白的平均纯化量为516μg。本方法快速、简便,基于磁性微粒的分离还可实现自动化,对GST融合蛋白的纯化具有很好的应用前景。