一株产谷氨酸脱羧酶乳酸菌的鉴定及其酶学性质

从28株乳酸菌中筛选到了10株谷氨酸脱羧酶产生菌,其中以菌株Y-2的活性最高,当菌体(湿重)与1%谷氨酸一钠溶液按1∶10混合,于37℃反应12 h,转化液中γ-氨基丁酸浓度为14.52±0.93 mmol/L。通过形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定菌株Y-2为唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus salivariussubsp.thermophilus)。同时基于16S rDNA构建了系统进化树,并进行了系统发育分析。S.salivariussubsp.thermophilusY-2谷氨酸脱羧酶的粗酶最适反应温度和pH分别为45℃和5.0,在4~40℃和pH 4.75~5.25范围内较稳定,酶催化反应在0~6 h具有良好的线性。     

海洋链霉菌GB-2发酵产物的抗细菌活性及性质研究

从连云港海域潮间带采集的样品中筛选得到一株产高活性抗细菌物质的链霉菌GB-2。该菌的发酵产物对蜡样芽孢杆菌AS1.1846、金黄色葡萄球菌ATCC25923及6株耐药性金黄色葡萄球菌等11 株革兰氏阳性菌,大肠杆菌AS1.487、荧光假单胞菌AS1.1802等4 株革兰氏阴性菌有显著拮抗作用。纸层析对抗细菌物质分析结果表明,菌株GB-2所产抗细菌物质是中性的水溶性物质,其产生与海水的存在有显著相关性。发酵液稳定性研究表明,该物质在121℃,pH1 和pH12条件下抑菌活性均不变;紫外线照射也不影响其抑细菌活性。显示菌株GB-2产物在生防、食品及医药方面潜在的应用价值。     

Bacillus subtilis fmbJ脂肽类抗菌物质的分离和鉴定

对BacillussubtilisfmbJ脂肽类抗菌物质的分离和鉴定进行了系统研究。通过HPLC层析确定BacillussubtilisfmbJ抗菌物质由多种组分构成,其中含有保留时间与surfactin相似的成分。通过TLC层析和原位酸解确定BacillussubtilisfmbJ抗菌物质含有两个具有闭合肽键类的物质,其中之一为迁移率Rf与标样surfactin非常相近的组分。通过ESI-MS分析检测到BacillussubtilisfmbJ抗菌物质含有分子量与fengicin相同的m/z1449.9、m/z1463.8、m/z1477.8、m/z1491.9和m/z1505.9五种同系物,和分子量与surfactin相同的m/z1008.8、m/z1022.8和m/z1036.8三种同系物。     

1株抗菌植物内生菌EJH-2菌株的分离和鉴定

目的从中药植物金银花的组织中分离到1株具有抗菌活性的植物内生菌EJH-2菌株,并对其进行了分子生物学鉴定。方法通过总DNA提取,PCR扩增,得到1300bp的16S rRNA序列。PCR产物序列通过BLAST软件在NCBI网站中进行同源性比较。通过Bioedit7．0和Treedrawing软件绘制系统发育树。结果EJH-2的16SrRNA序列和数据库中的类多粘芽胞杆菌KCTC 1663菌株的序列的同源性为99．76％。在系统发育树中,EJH-2菌株和多粘类芽胞杆菌在同一分支。结论EJH-2菌株应归属于多粘类芽胞杆菌（Paenibacillus polymyxa）。     

DN2菌降解烟碱的动力学及其应用研究

研究了菌株DN2降解烟碱的特性和对烟草废弃物中烟碱的降解情况。结果表明,该菌降解烟碱的最适条件为接种量为5 %,温度30 ℃,初始pH值为6.5。在该条件下,对初始烟碱浓度为500 mg/L的降解过程进行考察。结果表明,未经烟碱诱导的降解曲线呈倒S曲线,半衰期为17.43 h;经烟碱诱导的降解曲线符合Eckenfelder动力学模型,半衰期为4.10 h。添加0.1 %(质量分数)葡萄糖,可提高菌株DN2的烟碱耐受浓度,达5000 mg/L。菌株DN2能够降解烟草废弃物水提液中的烟碱（烟碱含量约为2220 mg/L）,60 h时烟碱的降解率为95.22 %,表明该菌在治理烟碱污染环境方面具有应用价值。     

无溶剂体系中脂肪酶改造猪油制备功能性脂的研究

我国有丰富廉价的动植物油资源,但这一资源并未得到有效的利用,为了充分利用这些资源,开展了无溶剂系统脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂的研究工作。脂肪酶筛选实验表明,在所选用的五种脂肪酶中,来自T .languginosa的固定化脂肪酶LiopzymeTLIM的催化效果最好。以LipozymeTLIM为催化剂,进一步研究了酶量、底物比率、反应时间、反应温度和水分添加量对猪油中辛酸插入率的影响。反应产物通过高效液相色谱法(HPLC)进行分析。研究结果表明,当脂肪酶量为20% (底物重量百分比)时,猪油中辛酸插入率最高。反应时间研究表明,当反应时间达到24h时,辛酸的插入率最高,达到38.77mol%。当猪油与辛酸的比率为1∶2 (摩尔比)时,辛酸的插入率最高,达到30 95mol%。在4 5～6 0℃范围之内,反应温度对辛酸插入率没有明显的影响,温度高于6 0℃时,辛酸插入率降低。水分添加量为2 5 %时,辛酸插入率最高,高达35 76mol%。     

鲜切芦蒿贮藏过程中叶绿素、纤维素及相关酶的变化

芦蒿去除不可食部分、冰水清洗、切分后于 0℃下贮藏。贮藏期间定期测定芦蒿的叶绿素、纤维素含量及其相关酶的活性。结果表明 :鲜切芦蒿贮藏过程中 ,叶绿素含量贮藏后期略有下降 ( <15 % ) ;叶绿素酶活性呈稳定增加趋势。鲜切芦蒿贮藏期间纤维素含量逐步增加 ,贮藏至第 15天比入贮时增加了 37.7% ;纤维素酶则持续下降 ,贮藏结束时活性仅为入贮时的 1/ 14。     

营养条件对枯草杆菌生产血纤维蛋白溶解酶的影响

选用经过分离纯化的枯草杆菌FM—SZ,研究了发酵营养条件,如葡萄糖、胰蛋白联。大豆粉、玉米粉、表面活性剂和底物等对枯草杆菌产血纤维蛋白溶解酶和产酶特性的影响。研究结果表明,添加胰蛋白胜能明显提高产酶,达到 594UK.UJml;tween 40的添加可以进一步提高产酶,酶活可达 645UK.U/ml。研究还发现液体培养条件下枯草杆菌血纤维蛋白溶解酸酶合成类型为延续合成型。     

内生多粘芽孢杆菌EJS-3纤溶酶基因在毕赤氏酵母中的表达

以自构建的重组质粒pET-DsbA/PPFE-I为模板,扩增内生多粘芽孢杆菌纤溶酶基因PPFE-I,构建Pichia pastoris表达载体pPICZαA/PPFE-I,通过电击转化,pPICZαA/PPFE-I 被整合到Pichia pastoris SMD1168基因组中,抗性筛选得到的阳性转化子,用终浓度为1%甲醇诱导72 h,酶活达到286 IU/ml,是野生菌的2.6倍,表达产物用SDS-PAGE进行分析,在相对分子质量63 kDa处出现明显的蛋白条带,降解人血纤维蛋白试验中rPPFE-I最先降解人血纤维蛋白原的α链,其次是β链,而对γ链降解最缓慢。实现了多粘类芽孢杆菌纤溶酶基因在毕赤酵母中的表达,为植物内生菌来源溶栓药物的开发提供了新的途径。     

翅鳞伞培养条件响应面法优化研究

在Plackett Burman实验设计结果基础上 ,采用响应曲面法 (ResponseSurfaceMethodolo gy,RSM)对影响翅鳞伞 (Pholiotasquarrosa)AS 5.2 45发酵胞外多糖与菌丝生长的关键影响因子最佳水平范围进行了研究和探讨。通过对胞外多糖曲面方程以及菌丝干重二次多项回归方程求解得知 ,在自变量培养温度 ,培养时间和装液量分别为 28.07℃、8.79d和 68.51mL时 ,翅鳞伞胞外多糖的最大预测值为1062.69μg·mL 1发酵醪 ;27