植物细胞凋亡的检测方法

细胞凋亡是一种在动、植物中普遍存在的现象,在动、植物的发育过程中起着非常重要的作用。从形态学、生化及分子生物学、免疫学、生理学等方面介绍了几种检测细胞凋亡的方法,以及各种方法在检测不同植物凋亡时的应用,并对植物细胞凋亡检测技术的前景进行了展望。     

外源施加GA和6-BA对棉纤维发育过程中细胞凋亡的影响

主要通过对棉纤维发育过程中的细胞总DNA的生化特征和SOD、MDA和可溶性蛋白三种生理指标的研究,确定了棉纤维发育过程中细胞凋亡的大致时间。通过施加不同浓度的GA和6-BA,我们发现10mg/L的GA能使细胞凋亡出现的时间提前3d左右,而5mmol/L的6-BA能使细胞凋亡出现的时间推迟3d左右,高于以上浓度的植物生长调节剂可能会由于刺激过度,而使细胞的总DNA在凝胶电泳时呈现模糊状条带。以上实验,对未来利用分子生物学手段改善棉纤维品质具有重要的意义。     

λDNA导入引起小麦染色体变异的研究

小麦种子从萌动至２叶期,用λＤＮＡ进行浸滴处理,Ｄ１代出现花粉母细胞染色体变异的植株占观察株的７３．３％,染色体变异的细胞占观察细胞数的２８．３％。主要有染色体落后、单价体、染色体桥、多价体、染色体多极分离,染色体螺旋化不同步,异常二分体和卤分体及微核等类型,随世代增进,染色体行为趋于稳定,但不同个体间存在的较大差异。这种复杂的染色体变异可能是外源ＤＮＡ在受体整合过程中的细胞学反应。     

棉花合子期化学诱变获得的早熟品系及其RAPD分析

报道了在棉花自花授粉后，利用花粉管通道将０．５ｍｍｏｌ／ＬＮａＮ３直接导入鲁棉６号的胚囊中，在变异后代中，采取系统选择的方法，选育出了一个早熟品系，它的熟期比鲁棉６号提前２５天，并且性状稳定，经过对鲁棉６号和早熟株系进行ＲＡＰＤ分析，结果表明，ＮａＮ３可以引起民后代ＤＮＡ序列的广泛变异，并且棉花基因组可能存在着诱变剂作用的热点。     

转Bt基因抗虫棉根际微生物区系和细菌生理群多样性的变化

在大田栽培条件下 ,以转 Bt基因抗虫棉 GK-12和常规棉花泗棉 3号作为材料 ,在棉花不同发育时期 ,于 2 0 0 1和 2 0 0 2连续两年测定棉花根际土壤细菌、放线菌和真菌数量的变化 ,并在 2 0 0 2年棉花的花铃期和吐絮期对根际细菌生理群的数量和多样性进行了分析 ,结果表明 :虽然不同年份和生育期棉花根际微生物数量存在差异 ,但是 ,年度间和相同的发育时期棉花根际微生物的数量变化趋势一致。在棉花的苗期和吐絮期 ,转 Bt基因抗虫棉根际微生物的数量与对照差异不显著 ;在棉花的花铃期 ,转 Bt基因抗虫棉根际细菌的数量比对照增加 ,放线菌的数量差异不显著 ,而真菌的数量变化没有规律。在棉花发育的花铃期和吐絮期 ,Bt棉根际细菌生理群的总数量比常规棉增加 ,但是根际细菌生理群的 Simpson指数、Shannon-Wiener指数和细菌生理群分布的均匀度下降     

转基因棉花的Bt基因流

通过两年实验检测转基因陆地棉品种间和海岛棉与陆地棉种间的Bt基因流.将转基因陆地棉国抗12号种植在12m×12m的样方内,周围分别种植非转基因陆地棉品种中棉所12号和海岛棉品种新海13号,在离转基因棉花不同距离选取样点,采集非转基因棉花种子,利用标记选择基因、Dot朎LISA和PCR扩增检测Bt基因流.结果表明在0～6m内陆地棉品种间显示较高频率的基因流,随着距离的增加Bt基因流降低,最大可达36m;提高样方内转基因棉花纯度,仅增加0～3m内基因流,对较远距离基因流无影响.海陆种间Bt基因流在0～6m内比陆地棉品种间低,但Bt基因流随距离增加下降幅度小,最远达72m.因此,在小规模转基因棉花环境释放实验,可选用同种不同品种棉花作为缓冲隔离带,并讨论了棉花转基因逃离至我国棉属种类的可能性.     

小麦双引物RAPD分析方法的研究

ＲＡＰＤ标记是近几年迅速发展的一种新型分子标记,标准的ＲＡＰＤ的反应是以１０个寡聚核苷酸作引物,通过ＰＣＲ反应扩增出基因组的部分片段,我们在研究外源ＤＮＡ导入小麦后外源遗传物质的追踪时,对这个方法进行了改进,采取了双引物进行扩增,结果双引物反应能够比单引物反应扩增出更多的多态性片段。分子杂交结果表明,双引物扩增出的新片段与单引物扩增片段无同源性,并对双引物扩增出的多态性片段产生的可能原因进行讨论。     

广西武宣濠江流域普通野生稻居群遗传多样性及保护研究

选用平均分布于水稻基因组的24对SSR引物,对沿河分布最长的广西武宣濠江流域的12个普通野生稻居群343份材料的遗传结构进行研究.结果表明:(1)该地普通野生稻遗传多样性丰富.24个位点共检测到206个等位变异,平均等位变异数A＝8.7083,有效等位变异数Ae＝3.7117;(2)该地普通野生稻居群具有较高的遗传分化和一定频率的基因流.群体遗传分化系数Gst＝0.2659,基因流Nm＝0.6901,表明26.59%的遗传变异存在于居群间;(3)SSR标记使普通野生稻居群中一些稀有等位变异得以显现.206个等位变异中,65个等位变异仅出现在1个或2个居群中,且频率较低,其中12个等位变异只出现在居群B中;(4)通过聚类分析和主坐标分析(PCO),下游居群A和B遗传关系较近,中游居群C比较独特,单独成为一类,中游居群D、E、F和G遗传关系较近,中游居群H、I和J及上游居群K和L遗传关系较近.根据上述分析结果,建议对濠江下游和中游具有代表性的居群(即居群B、D和H)的普通野生稻进行重点保护.