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【目的】slnTI和slnTII是盐霉素生物合成基因簇中可能的两个转运蛋白基因,根据生物信息学的分析推测它们属于ABC转运蛋白家族。其中,slnTI编码ABC转运蛋白的ATP结合亚基,slnTII编码ABC转运蛋白的跨膜亚基,推测它们可能与盐霉素的外排有关。通过slnTI和slnTII的基因中断与超量表达研究它们对盐霉素生物合成产量和抗性的影响。【方法】利用REDIRECT?技术,在盐霉素产生菌白色链霉菌XM211中分别构建了slnTI和slnTII的基因置换突变株LJ01和LJ02,并通过基因回补对突变株进行了验证。利用整合型表达载体pPM927在白色链霉菌XM211中对slnTI和slnTII进行串联超量表达。将slnTI和slnTII导入变铅青链霉菌1326中进行异源表达,通过液体培养实验检测衍生菌株对盐霉素的抗性。【结果】相比出发菌株XM211,突变株LJ01中盐霉素的产量下降了27.2%,LJ02下降了45.4%,LJ01和LJ02中结构基因slnA3和调控基因slnR的转录水平都有明显降低。超量表达菌株LJ03中盐霉素的产量提高了14.6%,转录结果显示LJ03中不仅slnTI和slnTII自身转录水平有大幅提高,而且slnA3和slnR转录水平也显著升高。抗性检测结果表明,异源表达菌株变铅青链霉菌LJ04对盐霉素的抗性水平略有提高。【结论】slnTI和slnTII是与盐霉素生物合成和外排有关的ABC转运蛋白基因,但并不是白色链霉菌XM211对盐霉素的主要抗性基因。 相似文献
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丹皮多糖-2b对肾上腺素模型小鼠降血糖作用研究 总被引:4,自引:1,他引:3
目的 观察丹皮多糖-2b(PSM-2b)对肾上腺素模型小鼠血糖的影响。方法 采用300μg·kg-1肾上腺素腹腔注射复制小鼠高血糖模型。将小鼠随机分为三大组,各大组分别连续灌胃1周、2周或3周。每大组又分为六小组:对照组、模型组、阳性(降糖灵)组、PSM-2b大剂量(90mg·kg-1)组、中剂量(60mg·kg-1)组、小剂量(30mg·kg-1)组。按葡萄糖氧化酶法测血糖,按苯酚-硫酸法测肝糖元含量。结果 PSM-2b能够显著降低肾上腺素模型小鼠的高血糖,且其降血糖作用呈一定的量效关系。PSM-2b还能够促进血糖转化为糖元,显著提高模型小鼠肝糖元的含量。结论 PSM-2b可以通过抑制肾上腺素升血糖作用而降低血糖。 相似文献
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本实验室构建的疟疾DNA疫苗经动物试验表明具有很好的免疫原性,为申请临床试验,进行了制备工艺的研究。本研究将含pcD-awte质粒的大肠杆菌DH5α在发酵罐中发酵培养,碱裂解法粗提质粒,再依次通过Sepharose 6FF分子筛层析、Plasmidselect 亲硫吸附层析和Source 30Q离子交换层析精制获得质粒纯品,并对纯品进行质量分析。结果每升培养液可获得质粒纯品43.9mg,质量符合Ferreira等推荐的药用标准。 相似文献
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PBL与图表相结合的教学法在《基础生物化学》课程教学中的初步实践 总被引:1,自引:0,他引:1
针对生物化学课程的特点,以改革当前传统的课堂讲授式教学模式作为突破口,采用基于问题学习(PBL)与图表结合的教学模式在《基础生物化学》中进行教学尝试。初步教学实践表明,通过PBL与图表教学法的互补结合,基本能克服《基础生物化学》教学活动中存在的两类矛盾,使传统的以"教"为主的教学模式,转变为以"学"与"教"相互平衡和促进的教学模式,使学生在掌握所学课程核心内容的同时又能获得学习方法、提高学习兴趣和学习主动性。 相似文献
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