PCR方法检测我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型野毒株的研究

用聚合酶链反应试验（ＰＣＲ）检测我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型（ＰＶＩ）野毒株,仅需５μｌＰＶＩ细胞培养液,方法简便、快速、敏感、特异,用本法对我国１４个省市７９份ＰＶＩ分离株的检测结果,能与检定ｓａｂｉｎⅠ相关株的ＳＩ／ＰＣＲ法的检测结果相印证,与其中３１份核苷酸测序判断为野毒株的结果相一致。其检测阳性率为８４．４％,基本能检测我国流行过的５个ＰＶＩ基因型野毒株。另外,从检测结果看,除北京市未发现野毒株外,其它１３个省区都有野毒株流行,表明当前我国消灭脊灰的任务还很重。     

我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型自然重组株抗原性的单克隆抗体分析

我国脊髓灰质炎病毒Ⅰ型自然重组株抗原性的单克隆抗体分析方肇寅,章菁,柯昌文,李平,李军延,张振国,孟宪坤,陈美光Ｈ、Ｙｏｓｈｉｋｕｒａ关键词脊髓灰质炎,重组病毒,单克隆抗体,中和试验脊髓灰质炎是危害儿童健康的世界性主要疾病,自从应用疫苗以来,该病在许...     

溶脲脲原体及其两个生物群与非淋菌性尿道炎相关性的研究

目的 阐明溶脲脲原体及其2个生物群与非淋菌性尿道炎的关系。方法 使用通用引物-PCR-毛细管电泳法对淋菌性尿道炎组,非淋菌性尿道炎组和对照组中的溶脲脲原体的2个生物群进行检测。结果 溶脲脲原体生物群2在非淋菌性尿道炎中的检出率高于对照组（P〈0．05）,溶脲脲原体生物群1在淋菌性尿道炎中的检出率低于对照组（P〈0．05）,而在非淋菌性尿道炎和对照组中,溶脲脲原体生物群1的检出率差异无显著性（P〉0．05）。结论 溶脲脲原体生物群2是和非淋菌性尿道炎有一定关系的,溶脲脲原体生物群2可能才是引起非淋尊性尿道炎的病原体之一,而生物群1不引起非淋菌性尿道炎,淋球菌的增殖有可能抑制尿道中的溶脲脲原体生物群1的生长。     

PCR-CE检测溶脲脲原体生物群的实验研究

建立了一种通用引物-PCR-CE检测溶脲脲原体2个生物群的方法,对这个方法进行了敏感性、特异性及重复性的研究,并与通用引物-PCR-琼脂糖凝胶电泳法进行了比较。研究表明,通用引物-PCR-CE法敏感性高,特异性强,重复性好,在区分溶脲脲原体2个生物群能力上要优于通用引物-PCR-琼脂糖电泳法。     

四种检测沙眼衣原体方法的诊断符合率分析

目的评价直接免疫荧光染色(DFA)、聚合酶链式反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和金标免疫层析试验(GICA)4种方法检测沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)的实验诊断符合率。方法同时采用DFA、PCR、ELISA和GICA4种方法检测临床泌尿生殖道样本CT感染标志物。2种及2种以上方法结果阳性判为真阳性,仅有1种方法结果阳性或全部方法结果阴性则判为真阴性。分别计算4种法的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值、ROC曲线下面积以及各方法之间的Kappa值。结果 223份临床泌尿生殖道标本中阳性32例,阴性191例。DFA、PCR、ELISA、GICA 4种方法的敏感度依次为93.7%、96.8%、90.6%和28.1%,特异性为98.9%、98.9%、98.4%和100%,阳性预测值为93.7%、93.9%、90.6%和100%,阴性预测值为98.9%、99.4%、98.4%和89.2%;ROC曲线下面积为0.964、0.964、0.945和0.641。前3种方法之间Kappa值0.82~0.95,与GI-CA法之间Kappa值均小于0.5。结论 DFA法、ELISA法、PCR法作为临床CT感染的实验室检测是较理想的方法;GICA法因灵敏度低且ROC曲线下面积仅0.641,作为实验诊断方法不太理想。     

合成抗原在麻风检测中的评价

目的进一步评价ND-O-BSA-ELISA(ND-ELISA)在麻风血清检测中的敏感性和特异性,并探讨麻风血清检测吸光度(A)值与细菌指数(BI)之间的关系。方法用ND-ELISA检测血清中的抗ND-O-BSA的IgM和IgG类抗体,做图显示血清学活性与细菌指数的关系。结果 (1)ND-IgM-ELISA中,正常对照阴性率为97.5%,多菌型患者(MB)阳性率为100.0%,少菌型患者(PB)阳性率为90.0%,总患者阳性率为96.2%;妊娠个体、银屑病患者、结核病患者、结缔组织病患者及梅毒患者阳性率都为0.0%。(2)ND-IgG-ELISA中,正常人阴性率为83.8%,多菌型患者阳性率为94.0%,少菌型患者阳性率为63.3%,总患者阳性率为82.5%;妊娠个体、银屑病患者、结核病患者、结缔组织病患者及梅毒患者血清出现有阳性反应。(3)随着细菌指数的增高,血清学检测A值也增高。(4)ND-IgMELISA的阳性及阴性预测值均高于ND-IgG-ELISA。结论 ND-IgM-ELISA的敏感性和特异性均明显高于ND-IgG-ELISA,有筛查及取代查菌方法用于早期检测麻风菌感染以及评价麻风化疗,预测复发,检测麻风菌亚临床感染等的潜景,值得进一步扩大样本深入研究证实。     

临床分离的葡萄球菌克林霉素诱导耐药的检测与分析

目的了解葡萄球菌对克林霉素和红霉素的耐药性和红霉素对克林霉索诱导耐药的情况,以及纸片边缘距离对试验结果的影响。方法采用纸片扩散法检测克林霉素和红霉素的耐药性,用D-试验方法检测并判读红霉素对克林霉素诱导耐药,对D-试验阳性菌株再次按纸片边缘不同距离分组,分别再做D-试验,了解纸片边缘距离对D-试验结果的影响。结果462株葡萄球菌中金黄色葡萄球菌214株,克林霉素敏感,红霉素耐药有66株占金黄色葡萄球菌30．8％,其中D-试验阳性菌株有37株,占克林霉素敏感,红霉素耐药株56．1％。248株凝固酶阴性的葡萄球菌中克林霉素敏感,红霉素耐药有87株占凝固酶阴性的葡萄球菌35．1％,其中D-试验阳性菌株有56株对克林霉素敏感,红霉素耐药株占64．4％。纸片边缘距离为17—24mm时有明显的“D”形。纸片边缘距离大于26mm时D-试验有漏检情况出现。结论临床微生物实验室应开展D-试验检测葡萄球菌中红霉素对克林霉素诱导耐药,这样可以避免临床医生盲目使用克林霉素而导致治疗失败。     

外阴阴道念珠菌病的病原检测及体外药敏试验

目的了解STD门诊患者外阴阴道念珠菌病的菌种分布及对常用抗真菌药物的敏感状况,为临床治疗提供参考。方法取STD门诊疑似念珠菌感染患者的阴道分泌物标本,用沙氏琼脂培养基分离纯化菌株,然后用ATB ID 32C酵母菌鉴定系统和ATB Fungus3药敏系统进行菌种鉴定与药物敏感试验。结果950份标本中检出306株念珠菌,占32.21%,其中白色念珠菌226株,阳性率为73.86%;光滑念珠菌37株,阳性率为12.09%;热带念珠菌24株,阳性率为7.84%;近平滑念珠菌13株,占4.25%。药敏结果显示：念珠菌对5-氟胞嘧啶（5-FC）;两性霉素B（AMB）,伏立康唑（VRC）耐药率〈6%;近平滑念珠菌对5种抗真菌药物均敏感;白色念珠菌对氟康唑（FCZ）、伊曲康唑（ICZ）耐药率依次：9.29%、11.06%,光滑念珠菌药耐药率依次为37.84%,67.57%,热带念珠菌药耐药率依次为8.33%、12.5%。结论STD门诊患者阴道念珠菌检出率明显高于普通妇科门诊患者,检出菌种仍以白色念珠菌为主,但光滑念珠菌和热带念珠菌生殖道感染有明显上升趋势;念珠菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶敏感性较高,对唑类药物有耐药菌株。因此,念珠菌鉴定和药敏监测是非常必要的,临床医生应根据药敏结果合理使用抗真菌药物。     

应用Real-time PCR检测溶脲脲原体生物群的实验研究

目的建立一种检测溶脲脲原体两个生物群的快速简便方法。方法采用Real-time PCR技术对50例男性科门诊的尿道炎患者中的溶脲脲原体的两个生物群进行了检测。结果50例男性患者经Real-time PCR技术检测,溶脲脲原体阳性23例（36.9%）,在这23例溶脲脲原体阳性男性患者中,溶脲脲原体生物群1所占的比例为14%,溶脲脲原体生物群2所占的比例是32%,溶脲脲原体生物群1,2均阳性所占的比例为2%。结论Real-time PCR方法是检测溶脲脲原体两个生物群的一个快速,简便的方法。