DNA分子标记技术在乳酸菌多态性研究中的应用

本文概述了常用于乳酸菌分离鉴定及多态性研究中的基于rDNA序列的分子标记技术和几种DNA指纹图谱技术(RAPD,ARDRA,AFLP,REP/ERIC-PCR),并对这些技术的原理、方法及其近几年在乳酸菌研究中的进展进行了介绍.同时本文还比较了各种方法的优缺点,不同的研究方法,其分辨率和检测限不同,必须根据研究目的,选择合适的分析方法.     

冷泉细菌Paenibacillus algorifonticola产抑菌活性物质提取分离工艺的研究

本文对冷泉细菌——Paenibacillus algorifonticola的代谢产物的提取分离进行了研究。P.algorifonticola可产生抑制白色念珠菌的水溶性物质。大孔树脂D101和XAD7HP串联使用脱除P.algorifonticola发酵液中的色素,树脂与发酵液比例为1∶10(g/mL)为佳。脱色后发酵液中的活性物质可被强酸性阳离子交换树脂FPC22H吸附,0.5 mol/L的氨水可将活性物质洗脱下来,每10 g FPC22H可以吸附120 mL发酵液中的活性物质。本文研究结果为进一步分离纯化P.algorifonticola产抗白色念珠菌物质奠定了基础。     

2011至2012年石家庄地区沙门菌食物中毒分离株分子流行病学特征

研究沙门菌食物中毒分离株invA基因、血清型和基因型的分子流行病学特征。收集2011至2012年发生于石家庄地区6起食物中毒分离出的16株沙门菌,参照GB 4789.4-2010方法确定其血清型;用实时荧光PCR法检测分离株侵袭蛋白A(invA)基因;应用中国细菌性传染病分子分型实验室监测网络(PulseNet China)推荐的脉冲场凝胶电泳技术对分离株进行基因型研究。16株沙门菌食物中毒分离株共分为5种血清型,分别为都柏林沙门菌2株、鼠伤寒沙门菌2株、肠炎沙门菌8株、圣保罗沙门菌3株、依麦克沙门菌1株;所有分离株invA基因均为阳性;血清型不同的分离株基因型也不相同,其中2起食物中毒分离株的基因型相同,相似性系数为100%,符合同一起暴发的一般规律。石家庄地区沙门菌食物中毒分离株致病性较强,某些血清型存在暴发的风险,应加强措施进行防范。     

原料乳冷藏过程中微生物细胞的宏蛋白组学分析

原料乳在投入生产前通常需4°C冷藏,在这个过程中微生物的污染将造成冷藏原料乳的变质。【目的】本文旨在分子水平上探究原料乳冷藏过程中微生物表达的差异蛋白质的动态变化,为原料乳的冷藏提供理论支撑。【方法】利用Label-free技术研究原料乳4°C冷藏6 d期间微生物菌体蛋白质的物种来源、功能及参与通路,筛选差异蛋白质并对主要差异蛋白质参与的通路进行富集,探究其变化规律。【结果】冷藏过程中共鉴定出341个微生物菌体蛋白质,其中冷藏3 d后产生的蛋白质占所有检出蛋白质的60.12%。COG及KEGG分析表明,蛋白质所体现的功能及参与的通路随时间而变化。冷藏4 d,参与糖酵解/糖异生、ABC转运蛋白、氨基糖和核苷酸糖代谢等通路的蛋白数量显著增加。随冷藏时间延长,相邻时间点差异蛋白质数目逐渐增多,且富集在不同的通路中。【结论】冷藏过程中原料乳中的微生物所产生的蛋白质参与的通路及其所体现的功能复杂,4 d时的变化最为明显,或可作为原料乳质量控制的关键节点。     

藏北地区传统发酵乳中乳杆菌的多样性分析

摘要：【目的】针对藏北地区的乳杆菌来源及种属,对其多态性进行研究。【方法】采用ERIC-PCR技术和NTSYS-pc2.1软件对从藏北地区牧民家庭制作的发酵乳制品中分离出的77株乳杆菌进行多样性分析。【结果】ERIC-PCR扩增出的条带清晰,重复性好,多态性高。聚类分析表明,在0.73的水平上,77株乳杆菌共分为4大类群：干酪乳杆菌群A1、发酵乳杆菌群A2,瑞士乳杆菌群A3和植物乳杆菌群A4。其中,干酪乳杆菌群A1和发酵乳杆菌群A2分别占供试乳杆菌的35.06%和61.04%,为优势菌群。进一步对优势菌群     

广谱高效抑菌物质产生菌的筛选及鉴定

本实验从营养丰富的土壤中经初筛分离到60株具有抑菌活性的细菌, 在此基础上通过琼脂打孔扩散法进行复筛, 获得一株具有广谱抑菌活性的菌株, 经理化指标及16S rDNA序列测定和同源分析鉴定为侧孢短芽孢杆菌, 命名为S62-9.     

英国绿色基础设施规划及对中国城乡生态网络构建的启示

以英国为代表的西欧各国在绿色基础设施理念的指导下展开了一系列的规划实践并取得多方效益。本文立足于中国城乡生态网络建设的背景,分析了英国东伦敦绿色基础设施网络和南泰恩赛德绿色基础设施网络2个规划案例,研究了其规划背景与目标愿景、发展框架与实施计划以及审计评估与规划策略等内容,总结了英国绿色基础设施规划的理念与方法,并提出了政策法案层面的制度化与体系化、实施计划层面的科学化与协同化以及规划策略层面的多元化与具体化的启示,以期对中国城乡生态网络构建提供有益借鉴。     

毛细属线虫中国新记录种的记述(嘴刺目:鞭虫科)

毛细属Capillaria中国新记录种——越南毛细线虫C.vietnamensis Meszaros,1973,采自广东省惠州市小蹄蝠Hipposideros pomona、大黄蝠Scotophilus heathi,龙门县长翅蝠Miniopterus schreibersi,广州市扁颅蝠Tylonycteris pa...     

猪卵母细胞玻璃化冷冻后细胞骨架的变化

为研究玻璃化冷冻后猪卵母细胞纺锤体、染色体和微丝的变化,从屠宰猪卵巢表面直径2—5mm卵泡中采集未成熟(GV)期卵母细胞,由GV期卵母细胞经成熟培养获得体外成熟(MⅡ)期卵母细胞。GV期和MⅡ期卵母细胞各分为3组对照组、冷冻保护剂处理组和玻璃化冷冻组。MⅡ期卵母细胞经分组处理后直接用于激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察样本;而GV期卵母细胞处理后先经44h成熟培养,再用作LSCM观察样本。供试卵母细胞经固定、免疫荧光染色后,于LSCM下观察。结果表明,冷冻保护剂处理组GV期卵母细胞经成熟培养后,其纺锤体结构、染色体排列与微丝分布正常率分别为42.9%、89.6%和28.6%;玻璃化冷冻组此3项指标的正常率分别为10.1%、36.4%和16.9%,两组间差异显著(P<0.05);除冷冻保护剂处理组染色体正常率与对照组无较大差异外,两试验组的其他指标均明显低于对照组(分别为79.5%、93.1%和72.3%,P<0.05)。MⅡ期卵母细胞冷冻保护剂处理组的纺锤体结构、染色体排列与微丝分布正常率分别为34.4%、61.3%和47.9%,而冷冻组分别为12.9%、56.7%和37.2%,两组均显著低于对照组(分别为78.3%、90.1%和72.8%,P<0.05)。结果表明,猪GV期和MⅡ期卵母细胞经冷冻保护剂处理或玻璃化冷冻保存后,均造成了纺锤体、染色体和微丝不可逆的损伤,这可能是影响卵母细胞成熟、受精与发育的重要原因。