多巴胺对PC12细胞的双重影响

本实验运用PC12细胞,研究不同浓度多巴胺(dopamine,DA)对细胞的影响。同时利用兼具促进多巴胺释放和抑制多巴胺摄取双重作用的安非它命(amphetamine,AMP)观察胞内外多巴胺对细胞的不同作用。结果显示:胞外高浓度DA能引起细胞抗氧化能力下降,胞内游离Ca~(2+)浓度上升,细胞存活率大幅度降低,部分细胞出现凋亡;低浓度DA对细胞存活率无明显影响,而使细胞抗氧化能力有一定提高。长时间安非它命单独作用也可引起细胞存活率下降,并伴随胞内GSH水平降低;安非它命与多巴胺共同作用在一定程度上可导致细胞内抗氧化物质水平低于多巴胺单独作用,表明细胞内一定浓度DA可以维持或提高细胞抗氧化物质水平。结果提示,脑内同样存在的多巴胺神经元对DA重摄取功能下降,胞外氧化应激增强,可能是引起脑内多巴胺神经元退行性病变的重要原因之一。     

低频脉冲电场对PC12细胞突起生长和NGF受体分布的影响

以PC12细胞为实验材料,研究低频脉冲电场(f=50Hz,τ=20ms,Epp=1V／m)对神经细胞突起生长及膜受体聚簇的影响。结果显示,该电场能促进NGF受体的聚簇。电场处理15min使PC12细胞表面的NGF受体发生明显的聚簇,30min组次之,5min组聚簇效果较弱。这表明细胞膜受体可能是电磁场与细胞相互作用的位点之一。运用细胞突起图形处理软件,追踪测定经电场处理后PC12细胞的突起数量和长度,发现该电场能显著促进细胞突起的生长,但对突起数量没有明显的影响。     

具有抗氧化活性的酸性菟丝子多糖H2的研究

从药用植物菟丝子 (CuscutachinensisLam .)的种子中经碱液提取所得的粗多糖CHC ,经进一步分离纯化得一酸性纯多糖H2 ,其分子量大于 1.0× 10 6,利用化学方法和光谱分析方法对其结构进行了研究。多糖H2由 1,6_linked_β_DGalp、1,4_linked_β_DGalp、1,4_linked_β_DGalA和 1,2or 4_linked_β_L_Rhap构成主链 ,并在部分1,6_linked_β_DGalp残基的O_3位和 1,2or 4_linked_β_L_Rhap残基的O_4或O_2形成分枝点 ,以末端半乳糖构成末端。侧链由末端半乳糖 ,1,6_linked_β_DGalp、1,4_linked_β_DGalp和 1,3,6_linked_β_DGalp残基构成 ,连接于主链的1,6_linked_β_DGalp残基的O_3位。阿拉伯糖残基 1,5_linkedAra、1,3,5_linkedAra、末端Ara以及末端鼠李糖残基存在于多糖分子H2的外周 ,连接于侧链和主链的 1,6_linked_β_DGalp残基的O_3位。此外 ,药理研究结果显示 ,H2能减少自由基引起的对大鼠成嗜铬细胞瘤PC12神经细胞系的损伤 ,明显提高细胞的存活率     

颈动脉超声定量参数联合MPV/PC比值、NLR对急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值

摘要 目的：探讨颈动脉超声定量参数联合平均血小板体积（MPV）/血小板计数（PC）比值、中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）对急性缺血性脑卒中（AIS）患者预后不良的预测价值。方法：选择2020年3月至2022年3月合肥市第二人民医院收治的97例AIS患者,所有患者均行颈动脉超声检查和血常规检查,获得颈动脉超声定量参数,计算MPV/PC比值、NLR。出院后90 d采用改良Rankin量表（mRS）评估患者预后,将患者分为预后不良组和预后良好组。受试者工作特征（ROC）曲线分析颈动脉超声定量参数、MPV/PC比值、NLR联合预测AIS患者预后不良的价值。结果：预后不良组动脉内膜中层厚度（IMT）、舒张末期血流速度（EDV）、MPV/PC比值、NLR大于预后良好组（P＜0.05）,收缩期峰值血流速度（PSV）小于预后良好组（P＜0.05）。IMT、PSV、EDV、MPV/PC比值、NLR预测AIS患者预后不良的曲线下面积分别为0.751、0.710、0.693、0.769、0.771,联合IMT、PSV、EDV、MPV/PC比值、NLR预测AIS患者预后不良的曲线下面积为0.883,高于单独指标预测。结论：颈动脉超声定量参数联合MPV/PC比值、NLR在AIS患者预后不良评估中具有较高的预测价值。     

江浙蝮蛇神经生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化*

将江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas,A.h.P)神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)基因克隆于分泌型原核表选载体pET-22b⁺,以c端融合了6个组氨酸的形式在大肠杆菌B12l(DE3)中进行了IPTG诱导表达。SDSPAGE分析确定有一比理论值略大的诱导表达条带,其表达量占全菌蛋白质的20％左右,且表达蛋白质主要是以包涵体的形式存在。用6mol／L的盐酸胍溶解包涵体后,利用固定化金属离子(Ni²⁺)配体亲和层析一步纯化目的蛋白质,纯度可达80％左右。对该重组肽进行变复性研究。利用PCl2细胞进行生物活力测定,证明表达产物具有NGF生物活力。     

皮质酮快速抑制PC12细胞乙酰胆碱诱发电流影响及机制探讨

目的和方法：本研究采用全细胞膜片箝技术,观察皮质酮（Ｂ）对ＰＣ１２细胞上乙酰胆碱诱发电流（ＩＡＣｈ）的快速作用并初步探讨其可能机制。结果：ＰＣ１２细胞上ＩＡＣｈ是通过烟碱受体（ｎＡＣｈＲ）引起的。箝制电压为－８０ｍＶ时,ＡＣｈ（３０μｍｏｌ／Ｌ）诱发一内向电流;细胞外灌流同时给予ＡＣｈ和Ｂ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）时,Ｂ对ＩＡＣｈ的抑制作用较弱;用Ｂ（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）对细胞进行预处理,可提高Ｂ对ＩＡＣｈ峰值的抑制率,作用呈可逆性、浓度依赖性和非电压依赖性;细胞外用ＲＮＡ合成抑制剂放线菌素Ｄ（４×１０－５～４×１０－３ｍｏｌ／Ｌ）或蛋白合成抑制剂放线菌酮（１０－４～１０－３ｍｏｌ／Ｌ）孵育细胞１～２ｈ阻断基因机制,但均不影响Ｂ对ＩＡＣｈ的快速抑制作用。结论：Ｂ对ＰＣ１２细胞上ＩＡＣｈ有快速抑制作用,此作用可能是由非基因组机制介导的。     

吉非替尼联合PC化疗方案对表皮生长因子受体突变阳性晚期肺腺癌患者免疫功能、凋亡因子和肿瘤标志物的影响

摘要 目的：探讨吉非替尼联合铂类加环磷酰胺（PC）化疗方案对表皮生长因子受体（EGFR）突变阳性晚期肺腺癌患者免疫功能、凋亡因子和肿瘤标志物的影响。方法：选取南通大学附属肿瘤医院2018年3月~2020年3月期间收治的92例EGFR阳性晚期肺腺癌患者,根据随机数字表法分为对照组（PC化疗）和实验组（吉非替尼联合PC化疗）,各为46例。观察两组疗效、肿瘤标志物、免疫功能、凋亡因子变化情况、肿瘤无进展生存时间（PFS）、总生存时间（OS）和不良反应发生率。结果：实验组的客观缓解率、疾病控制率均高于对照组（P<0.05）。两组治疗后血清癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白-19片段（CYFRA21-1）、鳞状细胞癌抗原（SCC-Ag）水平较治疗前均下降,且实验组较对照组低（P<0.05）。治疗后两组CD8⁺升高,但实验组较对照组低;而治疗后CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺均下降,但实验组较对照组高（P<0.05）。两组治疗后血清Livin水平较治疗前下降,且实验组低于对照组（P<0.05）,两组治疗后血清PDCD5、P53、Bax水平较治疗前均升高,且实验组均高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比无明显差异（P>0.05）。实验组的PFS、OS高于对照组（P<0.05）。结论：吉非替尼联合PC化疗方案治疗EGFR突变阳性晚期肺腺癌患者,可调节血清凋亡因子和肿瘤标志物水平,有效改善患者的免疫功能和预后。     

酒精促PC12细胞凋亡及对神经鞘磷脂合酶表达和活性的影响

目的 观察酒精诱导PCI2细胞凋亡及其凋亡过程中神经鞘磷脂合酶活性和mRNA表达量的变化.方法 MTr法测定酒精对PCI2细胞增殖的抑制作用.Hoeelmt33258染色荧光显微镜观察PCI2细胞凋亡形态学变化.DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡梯状DNA条带.RT-PCR法检测酒精对PCI2细胞SMSI和SMS2 mRNA表达的影响.薄层层析法测定SMS的活性.结果 PCI2细胞去血清培养24 h,酒精浓度在100、200、400和800 mmoL/L时,细胞存活率分别是单纯去血清的87.54%、70.73%、57.89%和51.70%,表现出较强的细胞增殖抑制作用（P〈0.05）;细胞核形态学变化显示酒精处理组凋亡细胞增多,表现染色质凝集,细胞核变小、核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,凋亡率随着酒精浓度的增大而升高,去血清组的酒精浓度为100、200和300 mmol/L时,细胞凋亡率呈剂量依赖关系;琼脂糖凝胶电泳可见酒精处理组有不同程度的DNA断裂,显示凋亡细胞典型的梯状DNA.RT-PCR检测酒精对PCI2细胞SMS转录水平结果显示,不同浓度酒精作用于PCI2细胞0.5 h,SMSI表达量无显著变化,当作用时间达1h和2 h,SMSl表达量显著增加,并呈剂量依赖性,而SMS2的mRNA表达则不受酒精作用的影响;薄层层析法检测细胞总SMS活性显示,不同浓度酒精作用2 h,细胞SMS活性随酒精浓度增加而升高.结论 酒精可导致PCI2细胞凋亡并与酒精浓度呈正相关.酒精致PCI2细胞凋亡过程中SMSl的mRNA表达量增高,酶活性增强,提示酒精致PCI2细胞凋亡作用与鞘磷脂循环有关.     

利用FRET技术在活细胞内研究红景天甙对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

为研究红景天甙(salidroside)对-淀粉样肽25-35(.amyloidpeptide25-35,A/25-3)5诱导PC12细胞凋亡的抑制作用,采用CellCountingKit-8(CCK-8)分析细胞的存活率,通过光镜检测细胞形态并配以Hoechst染色检测细胞核固缩,利用荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytransfer,FRET)技术在单个活细胞中检测caspase-3和caspase-8活性的动态变化。结果表明,红景天甙可剂量依赖性抑制A025-35引起的细胞凋亡,提高细胞的存活率;红景天甙对caspase-3的活性有明显的抑制作用,而且A125-35诱导细胞凋亡不依赖于caspase-8的激活。这些结果提示抑制caspase-3的活性是红景天甙抑制A225-35诱导PC12细胞凋亡的机制之一。     

PCLAB-UE生物医学信号采集处理

北京微信斯达科技发展有限责任公司是专业研制、开发、生产生物医学信号采集处理系统的公司,是在北京中关村注册的高新技术企业。2001年通过ISO9000-2000国际质量体系认证。以ISO国际质量标准覆盖和检测产品的开发、生产和服务全过程,产品通过中国计量科学院检测,数据真实、准确。PCLAB系列产品报经国家技术质量监督局制定了企业标准。PCLAB系列产品遍布全国教学、科研单位,享有较高的声誉。我公司在不断完善PCLAB-3802（教学型）、PCLAB-3804（科研型）产品的同时,又推出软、硬件全面更新升级、科技含量更高的PCLAB-UE（USB接口教学版）、PCLAB-US（USB接口科研版）系列产品。产品具有采样更快、性能更稳定、处理功能更强大、数据更准确、操作更灵活便捷等诸多特点。