LIM结构域蛋白KyoT在成年小鼠睾丸的表达

报道了KyoT在成年小鼠体内的表达,以便进一步研究KyoT在体内的功能。为研究KyoT mRNA及蛋白质水平的表达,采用Northern印迹、RT－PCR、免疫组织化学SABC和原位杂交方法。睾丸中两种KyoT的mRNA水平均很高,睾丸间质细胞的免疫化学反应阳性,阳性物质分布于细胞质内,细胞核呈阴性反应。同样,KyoT的mRNA在睾丸间质细胞杂交信号呈阳性反应,阳性物亦分布于细胞质内,细胞核呈阴性反应。生精细胞及对照组均为阴性。上述结果提示睾丸中有KyoT的表达,且特异性分布于睾丸间质细胞。     

Cajal细胞与胃肠起搏

存在于胃肠平滑肌内的Cajal间质细胞（ＩＣＣ）与胃肠道运动的发生和控制密切相关。ＩＣＣ可自发激活并产生节律性去极化慢波（ＳＷ）,经由ＩＣＣ形成的网络传向平滑肌细胞,并向远端扩布。平滑肌细胞缺乏产生ＳＷ活动的必要离子基础,但对于由ＩＣＣ传来的ＳＷ产生反应,使ＳＷ增强或诱发动作电位和收缩活动。因此,ＩＣＣ不仅是胃肠ＳＷ活动的起搏者,也是ＳＷ的传播者,同时对神经递质等生物活性物质影响平滑肌收缩起着居间调制作用。     

Nature Cell Biology:Rho GTP酶新功能——抑制乳腺肿瘤生成以及皮-间质细胞转化

<正>通过生物信息学分析,研究者们发现基底样和三阴性乳腺癌中Rho GTP酶Rnd1是一个潜在的肿瘤转移抑制因子。敲除Rnd1蛋白破坏了上皮细胞的粘连和极性,导致上皮-间质细胞转化的发生,同时胞内的c-Myc表达发生紊乱、肿瘤抑制因子p53受到抑制,也导致了细胞产生肿瘤化转变。机制研究显示Rnd1通过激活Plexin B1蛋白的GAP结构域抑制Ras信号的传导,从而抑制Rap1的功能。而在乳腺上皮细胞中抑制Rap1会     

c-myb对人绒毛膜促性腺激素诱导的大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响

采用离体细胞体外孵育法,观察反义c-myb寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletides,ODN)对人绒毛膜促性隙激素(humanchorionic-gonadotropin hormone,hCG)诱导的人鼠间质细胞睾酮分泌的影响,并进一步探讨了外源性二丁酰cAMP(dbcAMP)、Ca^2 以及蛋白质抑制剂放线菌酮(cycloheximide,CYX)对间质细胞中c-Myb蛋白表达和睾酮分泌的作用。结果表明,反义c-myb ODN呈剂量依赖性地抑制hCG诱导的离体间质细胞的睾酮分泌,同时使间质细胞中c-Myb蛋白免疫组化染色下降：而无义tat ODN没有相应的作用。100μmol／L的dbc AMP可进一步促使hCG秀导的间质细胞分泌睾酮,并且使间质细胞中c-Myb蛋白免疫组化染色IOD值升高,与hCG组相比,具有统计学意义。钙离子通道阻断剂维拉帕米(10μmol／L)和蛋白质抑制剂放线菌酮(50μg／ml)可使hCG诱导的大鼠间质细胞的睾酮分泌下降,并使间质细胞的c-Myb蛋白免疫组化染色降低。该结果说明c-myb参与hCG诱导的大鼠间质细胞睾酮分泌作用。     

卵巢纤蛋白溶酶原激活因子及其抑制因子的研究

本文综述了近年来作者在研究卵巢纤蛋白溶酶原激活因子(PA)及其抑制因子(PAI)的某些成果。PA是一种高效能蛋白水解酶激活因子,它激活纤蛋白溶酶原成为纤蛋白溶酶,此酶在纤蛋白水解过程中起重要作用。已有证据表明,PA与排卵有关。我们进一步研究发现:(1)在大鼠卵巢体细胞中存在两种PA,即组织型PA(tPA)和尿激酶型PA(uPA);而在卵细胞中只发现tPA;(2)大鼠卵巢tPA明显受促性腺激素和其他激素调节,并在排卵前达到高峰,而uPA没有明显变化;(3)在卵巢体细胞中还发现一种PA的抑制因子(PAI),它与PA结合形成复合体,能部分或完全消除PA活性;(4)只有tPA与大鼠排卵有关;PA和PAI间的相互作用和随激素的波动而引起的动态变化可能对维持卵巢正常生理功能和排卵起重要作用。     

Cajal间质细胞及其可塑性的研究进展

Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是一类主要分布于胃肠道的间质细胞,与平滑肌细胞以及肠神经细胞有着紧密的关系。ICC分布于整个胃肠道,是胃肠道起搏细胞,具有产生和传播慢波的功能,参与神经递质调节,在一些胃肠动力性疾病中表现为异常状态。近期,关于ICC的生理功能、损伤和恢复机制的研究取得了显著的进展。ICC网络存在动态平衡,为了维持ICC网络功能,ICC周期代谢需要被紧密的控制调节平衡ICC死亡和更替。研究表明,ICC具有高度的可塑性,在一些缺失ICC的疾病中ICC并不一定死亡,转分化、去分化和细胞凋亡可能是ICC丢失的机制。。本文主要对Cajal间质细胞及其可塑性的研究进展进行了综述。     

新鲜分离小鼠胃Cajal间质细胞样细胞的鉴定及其电生理学特性

将免疫荧光及传统全细胞膜片钳技术应用于新鲜分离的小鼠胃Cajal间质细胞样细胞上,探讨了小鼠胃Cajal间质细胞样细胞形态和电生理学特性。经胶原酶消化得到的Cajal间质细胞样细胞胞体呈短梭形,且自胞体发出多个较短的毛刺状突起。免疫细胞化学结果表明,Cajal间质细胞样细胞胞体和突起酪氨酸激酶受体c-kit表达呈阳性。在传统全细胞记录模式、膜电位钳制在-60mV的条件下,可以记录到自发、节律性内向电流,即起搏电流。钙调蛋白抑制剂W-7 （50μmol／L）明显增强了起搏电流幅度并引发明显的内向钳制电流。当电极内液中EGTA的浓度由0．1mmol／L增加到10mmol/L时,也明显增强了起搏电流幅度并引发明显的内向钳制电流。实验结果提示,新鲜分离的小鼠胃Cajal间质细胞样细胞可以产生自发、自律性内向电流,而这种电流对胞内低钙或钙调蛋白抑制剂敏感。这种具有自发性电活动的Cajal间质细胞样细胞可能就是胃Cajal间质细胞。     

一氧化氮与雄性生殖系统

一氧化氮是近年来发现的一种重要的生物信号分子和效应分子 ,在生物体内 ,L 精氨酸在一氧化氮合酶的作用下生成一氧化氮后 ,以自分泌或旁分泌形式作用于自身或邻近的细胞 ,发挥信号传导和细胞毒性等多种生理功能。近年来的研究表明 ,一氧化氮对雄性生殖系统上至下丘脑 ,下到性腺、附性器官都具有十分重要的生理调节作用。     

全氟辛烷磺酸盐对胚胎期大鼠雄性生殖系统的影响

目的:研究全氟辛烷磺酸盐(PFOS)对胚胎期大鼠雄性生殖系统发育的影响.方法:PFOS分别以5、10、20 mg· kg-1·d-1灌胃染毒孕12-19天的SD母鼠,染毒结束后,测量雄性胎鼠体重、身长、睾丸重量、AGD;酶联免疫吸附法检测雄性胎鼠睾丸内睾酮水平;实时荧光定量PCR法测睾丸组织类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、胰岛素样因子3(INSL3)mRNA的相对表达量.结果:与对照组相比,高剂量染毒组雄性胎鼠体重、体长、AGD长度显著降低(P＜0.01),睾丸重量减轻(P＜0.05);高剂量染毒组雄性胎鼠睾丸中内睾酮水平下降(P＜0.05);高剂量染毒组雄性胎鼠睾丸组织中StAR mRNA的表达量降低(P＜0.05),而中剂量染毒组StAR mRNA和INSL3 mRNA表达量则明显升高(P＜0.01).结论:孕期染毒PFOS对雄性胚胎生殖系统的发育有毒性作用,其机制可能与PFOS影响睾酮合成和INSL3 mRNA的表达有关.     

模拟失重对大鼠血清胃泌素、胃动素和胃窦Cajal间质细胞的影响

目的：研究尾悬吊模拟失重环境对大鼠血清胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）和胃窦Cajal间质细胞（ICC）的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠64只随机分为8组（rt=8）,按模拟失重时相分别设为6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d和0h（地面对照组）组,采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型。应用放免法测定血清GAS、MTL浓度,免疫组化和RT—PCR技术检测各组大鼠胃窦组织中c—kit蛋白和mRNA表达情况。结果：尾悬吊6、12h阶段,血清GAS浓度明显升高,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;随尾悬吊时相延长,血清GAS含量呈逐渐下降趋势,与正常对照组水平相近。尾悬吊各组大鼠血清MTL浓度均升高,12h以后各组MTL浓度值与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化结果显示,c—kit蛋白阳性表达为棕褐色,主要分布在ICC胞体和突起,正常对照组大鼠胃窦肌层ICC（ICC—MY）呈连续性浓染,肌层内ICC（ICC—IM）亦明晰可见;6h-5d的尾悬吊过程中,大鼠胃窦ICC—MY连续性出现中断现象且逐渐明显,染色逐渐减弱,ICC—IM染色减弱的同时c—kit阳性ICC也明显减少;7d组胃窦组织中c—kit蛋白表达有所恢复。模拟失重各组及对照组大鼠胃窦组织中均有c—kitmRNA表达,尾悬吊6、12h组的c—kitmRNA表达明显下降,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,1～3d组逐渐恢复,5d组又出现明显下降（P〈0．05）,7d组c—kitmRNA表达值明显复升。结论：尾悬吊模拟失重对大鼠血清GAS、MTL和胃窦Cajal间质细胞c—kit蛋白及mRNA表达造成明显影响,可能导致胃动力障碍。