MAPK/ERK 和 MAPK/P38 信号通路的活化参与沙眼衣原体诱导前炎因子的产生

沙眼衣原体感染可导致沙眼、性传播性疾病、不孕症等疾病,主要病理表现是炎症反应引起的组织损伤和瘢痕.因此,沙眼衣原体诱导产生的炎症因子是导致疾病的关键,沙眼衣原体可直接感染内皮细胞产生各种前炎因子,但其机制目前还不清楚.通过ELISA和免疫印迹等方法,检测到沙眼衣原体感染HeLa229细胞可产生IL-8,IL-1α,IL-1β,IL-6等前炎因子,并且沙眼衣原体感染可以主要激活宿主细胞MAPK/ERK和MAPK/P38信号通路.抑制MAPK/ERK和MAPK/P38信号通路显示,两条通路在沙眼衣原体感染过程中参与调节不同的炎症因子产生.MAPK/P38信号通路的活化参与调控IL-1α,IL-6的产生,而IL-8则同时受MAPK/ERK和MAPK/P38两条通路的调控.     

肺炎嗜衣原体主要外膜蛋白的克隆表达与抗原性研究

肺炎嗜衣原体主要外膜蛋白是其特征抗原之一。实验中通过PCR方法从肺炎嗜衣原体基因组中扩增主要外膜蛋白基因,插入pET32a(+)表达载体,转化BL21(DE3)感受态细胞,得到表达56kD融合蛋白的工程菌株。该菌株的表达量可达53%,提纯后的主要外膜蛋白纯度可达90%以上,在Western Blotting试验和胶体金免疫层析试验中显示了良好的抗原性。     

淋球菌与沙眼衣原体在性传播疾病感染情况的研究

目的研究淋球菌(NG)与沙眼衣原体(CT)在性传播疾病感染情况及特点。方法对90例性病患者泌尿生殖道分泌物做NG培养及血清用ELISA试验检测CT抗体。结果90例性病患者NG、CT 的感染率分别为70%、16.7%,NG合并CT的感染率达13.3%。男女性别间NG感染率差异有显著性( P<0.05)。NG、CT单一或合并感染率之间差异有非常显著性(P<0.01)。结论性病患者中NG感染率高,且有性别分布差异。淋病患者合并CT感染率较高。     

多重PCR同时检测人乳头瘤病毒、巨细胞病毒和沙眼衣原体

为了应用聚合酶链反应同时检测人巨细胞病毒（CMV）、人乳头瘤病毒（HPV）、沙眼衣原体（CT）,参照文献报道的基因序列,设计合成了三对能扩增370bp、450bp、510bp基因片段的引物,并对PCR扩增条件进行了优化。0.1fgHPV－DNA、CMV－DNA、CT－DNA即可被检出,得到了与设计片段相同的产物,且不扩增大肠杆菌、白色念球菌、解尿支原体等病原的核酸。对395例标本进行检查,各病原体的检出率分别是：HPV19.2%、CMV14.9%、CT5.1%。其中混合感染42例。PCR同时检测CMV、HPV、CT经济、快速、敏感、特异,可用于临床诊断和实验研究。     

利用RNA特异性荧光显示沙眼衣原体包涵体

沙眼衣原体是一种严格局限于细胞内繁殖的病原体 ,其组成成分为 RNA,在细胞内繁殖形成大小不等的膜包被的圆形小体 (包涵体 )。利用改进的AO( acridine orange)荧光染色法可快速检测位于上皮细胞内桔黄 -桔红色荧光的圆形衣原体包涵体。为检测衣原体感染提供了一种简便、快速的染色技术。衣原体是介于病毒和细菌之间、一种严格位于细胞内繁殖的病原体 ,它的组成成分为 RNA。目前多用衣原体单克隆抗体免疫荧光直接染色法检测 [1,2 ] 。本文利用改进的 AO荧光细胞化学染色法 ,快速显示了细胞内繁殖的衣原体包涵体。荧光颜色鲜明 ,图像清晰…     

IFN-γ在沙眼衣原体感染的细胞培养中的影响

为了探讨IFN-γ在沙眼衣原体（chlamydia trachomatis,ct)感染细胞培养中的影响,本实验采用不同浓度γ-干扰素作用于ct感染的HeLa细胞,用透射电镜观察HeLa细胞内原体（elementary bodies,EBs)和网状体（reticulate bodies,RBs)。同时用反相高效液相色谱法（reversed-phase high performance liquid chromatography,HPLC)测定细胞内色氨酸的浓度。结果显示不同浓度γ-干扰素作用下细胞内ct的EBs和RBs形态及数量不同,中高浓度的IFN-γ作用下胞内EBs和RBs明显减少或轻度减少,et生长受到抑制,细胞内色氨酸含量与γ-干扰素量呈负相关,说明IFN-γ通过诱导产生2,3-吲哚-双加氧酶（indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)降解色氨酸而抑制ct生长,提示γ-干扰素是抑制细胞内感染ct生长的一个重要因素。     

支原体、衣原体、立克次体和螺旋体研究概况

支原体 支原体广泛寄生于人体、哺乳动物,鸟类及植物中,仅有少数有致病性.自1995年以来,34种支原体基因组测序已经完成或即将完成测序,已完成的包括人类致病性支原体(肺炎支原体、穿透支原体、解脲支原体等),动物致病性支原体(猪肺炎支原体、山羊传染性胸膜肺炎支原体、鸡毒支原体、牛丝状支原体、鸡滑膜支原体、鱼肺炎支原体和鼠类肺支原体),植物致病性支原体(洋葱黄化病支原体)等.肺炎支原体是人呼吸道感染的最主要病原体之一,对儿童尤其严重,因为它与人类密切相关,所以最为人们关注.     

研究: 肺炎衣原体抑制LXRα-ABCA1途径促进巨噬细胞脂质蓄积

为探讨肝X受体α (LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1 (ABCA1)途径在肺炎衣原体 (C. pneumoniae)促巨噬细胞脂质蓄积中的作用和机制,以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为模型,采用高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,RT-PCR检测ABCA1和LXRα mRNA的表达,蛋白质印迹检测ABCA1和LXRα的蛋白质表达;使用LXRα的特异性激动剂T0901317对细胞进行预处理,再观察上述指标的变化．结果显示,C. pneumoniae可促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量增加,抑制胆固醇外流,降低细胞ABCA1和LXRα的表达;使用ABCA1激动剂8-溴-环磷酸腺苷预处理细胞或LXR激动剂T0901317预处理细胞后,可明显减弱C. pneumoniae对THP-1细胞ABCA1的表达抑制,促进细胞胆固醇流出,降低细胞内胆固醇的含量．结果提示,C. pneumoniae促进巨噬细胞脂质蓄积及胆固醇流出障碍,其机制可能与LXRα-ABCA1途径有关．     

衣原体噬菌体衣壳蛋白3的结构、免疫原性及临床价值研究

分析衣原体微病毒Vp3蛋白在分子重组、分子进化及病毒野生株筛查的作用并挖掘生物信息,揭示其临床研究价值。以ProteinBlast的Multriple alignment程序比对各株衣原体微病毒衣壳蛋白Vp3序列;以Distance tree(ProteinBlast)程序完成种系发生树。以比对获得的高保守区的氨基酸序列为目标,应用Karplus-schulz法进行柔性区域分析;通过Gamier-robson法和Chou-fasman法分析该序列的二级结构;使用Emini法完成表位的表面可及性分析,并用Kyte-Doolittle法和Hopp-woods法完成蛋白亲水性研究;应用Jameson-Wolf法完成表位的抗原指数分析。6株衣原体微病毒Vp3蛋白序列高度保守,差异主要在Chp1与其他5株微病毒的Vp3蛋白之间。各株微病毒的Vp3蛋白均有以α螺旋为主的结构,蛋白序列高保守区存在多个细胞表位。Vp3蛋白结构性质保守,也是衣原体噬菌体衣壳的重要组分。其蛋白分子结构复杂,高保守区有较强的免疫原性,在分子重组、沙眼衣原体微病毒野生株筛查研究中有实际研究价值。     

沙眼衣原体感染对大鼠着床期间子宫内膜E-cadherin的影响

目的 研究沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,CT）感染后大鼠着床期间子宫内膜上皮钙粘蛋白（E-cad-herin,E-cad）的变化。方法 大鼠雌雄合笼建立早孕模型,取正常和CT感染后妊娠4-7d的子宫组织,免疫组化SP法检测E-cad的表达。结果 正常和感染后妊娠组E-cad的表达均存在先上升后下降的趋势,表达峰值均在妊娠第6d,CT感染组低于正常组,且存在显著性差异（P〈0.05）;其表达部位在子宫内膜上皮细胞的胞膜或/和胞浆,蜕膜细胞无或少量表达。结论 沙眼衣原体感染后可能通过影响子宫内膜黏附分子E-cad的表达,破坏子宫内膜微环境,进而干扰早期妊娠。