颗粒裂解肽G13结构域在大肠杆菌中的高效融合表达

为高效表达颗粒裂解肽G13结构域并避免G13对宿主菌的毒性, 将人工合成的编码G13的基因片段, PCR扩增后克隆于原核表达载体pThioHisA中, 构建了重组表达载体pThioHisA-G13, 将其转化于大肠杆菌BL21(DE3)中, 经IPTG诱导表达融合蛋白Trx-G13, 表达产物以包涵体的形式存在, 其表达量约占细菌总蛋白的58%。包涵体蛋白经 8 mol/L尿素溶解后, 再经CNBr切割, 阳离子交换层析, 得到纯化的重组G13结构域。琼脂糖扩散法检测表明重组G13结构域多肽具有抗菌活性。     

干旱胁迫下四倍体刺槐幼苗水分利用效率及稳定碳同位素组成的研究

在模拟自然干旱的条件下,测定2个四倍体刺槐品种(K2、K3)和普通二倍体刺槐(K1)一年生组培苗的长期和瞬时水分利用效率(WUE)及其稳定碳同位素组成(δ13C),以探讨四倍体刺槐的抗旱机理.结果表明,K2、K3的长期水分利用效率(WUEL)在不同水分胁迫条件下都显著高于K1,它们在同等供水条件下比K1具有更大的生物量产出;3个材料叶片的瞬时水分利用效率(WUEI)均随干旱胁迫的加剧表现先升后降的趋势,且胁迫处理均高于适宜水分处理.随水分胁迫的加剧,各品种刺槐苗木叶片的δ13C显著升高;K2、K3的δ13C在各水分条件下均高于K1;各材料叶片的δ13C与其WUEL有良好的正相关性,可以作为筛选高WUE刺槐品种的指标.     

半干旱区土地利用方式变化对生态系统碳储量的影响

土地利用方式变化对生态系统碳储量具有重要影响,评价不同土地利用方式下陆地生态系统的碳获取能力有助于制定生态系统管理策略,对适应和减缓全球气候变化具有重要的意义.本文以科尔沁地区沙质草地、樟子松-山杏疏林草地、杨树防护林带为对象,量化了不同土地利用方式变化对生态系统碳储量及其分配的影响.结果表明,沙质草地转变为樟子松-山杏疏林草地和杨树防护林带后地上部分碳储量分别为以平均0.17和4.45 t·hm~(-2)·a~(-1)的速率增加;沙质草地、樟子松一山杏疏林草地和杨树防护林带的根系碳储量依次为1.382、1.706和18.541 t·hm~(-2),土壤碳储量依次为26.11、25.20和41.36 t·hm~(-2);沙质草地转变为杨树防护林带后根系碳储量和土壤碳储量增加,平均速率分别为1.07和0.95 t·hm~(-2)·a~(-1);3种土地利用方式的有机碳含量/储量在不同层次土壤之间变异程度不同,相对而言疏林草地变异程度最小.总体来看,3种土地利用方式总碳储量依次为杨树防护林带(131.9 t·hm~(-2))、樟子松-山杏疏林草地(30.0 t·hm~(-2))、沙质草地(28.3 t·hm~(-2)).     

甲基营养菌的研究进展

甲基营养菌是一类能够利用一碳化合物作为唯一碳源和能源的微生物,它们在自然界分布广泛.研究表明,甲基营养菌能够直接利用一碳化合物,将其转化成自身代谢的一碳单位,并为生物体提供能源和碳骨架,这组成了一碳代谢的主要部分,它是一种新的代谢体系,可以作为一种新的代谢模式来研究生物代谢和生物进化.本文结合本实验室Methylobacterium sp.MB200的研究情况,主要从分类学、代谢途径、基因组学和应用等方面,论述了甲基营养菌的研究进展.     

A New Acylated Anthocyanin from the Red Flowers of Camellia hongkongensis and Characterization of Anthocyanins in the Section Camellia Species

Twelve anthocyanins （1-12） were isolated from the red flowers of Camellia hongkongensis Seem. by chromatography using open columns. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic analyses, that is, proton-nuclear magnetic resonance, carbon 13-nuclear magnetic resonance, heteronuclear multiple quantum correlation, heteronuclear multiple bond correlation, high resolution electrospray ionization mass and ultraviolet visible spectroscopies. Out of these anthocyanins, a novel acylated anthocyanin, cyanidin 3-O-（6-O-（Z）-p-coumaroyl）-β-galactopyranoside （6）, two known acylated anthocyanins, cyanidin 3-O-（6-O-（E）-p-coumaroyl）-β-galactopyranoside （7） and cyanidin 3-O-（6-O-（E）-caffeoyl）-~- galactopyranoside （8）, and three known delphinidin glycosides （10-12） were for the first time isolated from the genus Camellia. Furthermore, pigment components in C. japonica L., C. chekiangoleosa Hu and C. semiserrata Chi were studied. The results indicated that the distribution of anthocyanins was differed among these species. Delphinidin glycoside was only detected in the flowers of C. hongkongensis, which is a special and important species in the section Camellia. Based on the characterization of anthocyanins in the section Camellia species, there is a close relationship among these species, and C. hongkongensis might be an important parent for creating new cultivars with bluish flower color.     

Jasmonic Acid is Induced in a Biphasic Manner in Response of Pea Seedlings to Wounding

The role of jasmonic acid （JA） in plant wounding response has been demonstrated. However, the source of JA in wound signaling remains unclear. In the present study, pea seedlings were used as material to investigate the systemic induction of JA and the activation of lipoxygenase （LOX）-dependent octadecanoid pathway upon wounding. The results showed that endogenous JA could induce two peaks in the wounded leaves and the stalks, while only one peak in the systemic leaves. LOX activity and its protein amount were also induced and the stimulation mainly occurred in the late phase, while one peak of induction was present after pretreatment with JA. Applied nordihydroguaiaretic acid （NDGA）, an inhibitor of LOX activity, only inhibited the induction of JA in the late phase, and the resistance of pea was impaired. Furthermore, 13（S）- hydroperoxy-9（Z）, 11 （E）-octadecadienoic acid （13（S）-H（P）ODE） was confirmed to be the main product of LOX throughout the experimental time. in addition, immunocytochemical analysis also revealed the occurrence of JA biosynthesis and transport upon wounding. These results demonstrated that wound-induced JA in wounded leaves resulted from its biosynthesis and conversion from its conjugates, while in systemic leaves resulted from its transport and biosynthesis; and proved that the LOX pathway was vital to the wound-induced defense response involved in JA biosynthesis.     

猴头菌颗粒治疗慢性萎缩性胃炎作用机制研究

目的：观察猴头菌提取物颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎的治疗效果。方法：SD大鼠分为5组,即正常对照组、模型对照组、维酶素治疗组、猴头菌颗粒小剂量组、猴头菌颗粒大剂量组;除正常对照组外,其余大鼠用热盐水灌胃方法制作慢性萎缩性胃炎模型：模型制成后连续给药28天;处死动物后通过制备病理切片和利用试剂盒测定胃粘膜氨基己糖、前列腺素E2（PGE2）含量,由此观察猴头菌提取物颗粒对慢性萎缩性胃炎的治疗作用。结果：猴头菌颗粒治疗组大鼠胃粘膜G、D细胞数量和氨基己糖、PGE2含量高于模型对照组,尤以猴头菌颗粒大剂量组,最为显著（P〈0．01）。结论：猴头菌颗粒对大鼠慢性萎缩性胃炎有明显的治疗作用。     

MicroRNA作用机制研究的新进展

microRNA（miRNA）是一种非蛋白质的新型基因表达调控因子,对真核生物基因表达起非常重要的调控作用.关于miRNA的功能及作用机制方面的研究是当前生命科学研究的前沿热点,研究人员陆续提出了一些假说模型,诸如翻译起始抑制、翻译起始后抑制、mRNA降解、P小体（Processing Body）,SG（Stress Granules）颗粒扣押靶mRNA等来阐述miRNA如何抑制其靶基因的表达.此外,最近还有文献报道了一些全新的miRNA作用方式,如去抑制和miRNA激活作用等.本文将简要介绍一些miRNA作用机制研究的新进展及相关作用模型.     

Tris对高LET碳重离子辐照下质粒DNA链断裂的保护作用

利用100 keV/μm碳离子束(初始能量为290 MeV/u)照射溶解于纯水、10 mmol/L Tris、1 mmol/L EDTA及TE 缓冲液中的pUC19质粒DNA.通过琼脂糖凝胶电泳技术分析了不同溶液中各种形态DNA分子所占份额,并计算得到不同剂量下平均每个质粒分子中单链断裂(SSB)及双链断裂(DSB)的数目.发现Tris通过抑制SSB和DSB的产生对碳重离子辐照下的质粒DNA有明显的保护作用,而EDTA能够加剧SSB的产生而抑制DSB的形成.     

纳米金生物条形码技术检测痕量二噁英类化合物

建立一种基于纳米金生物条形码技术的二噁英快速筛检方法.利用二噁英诱 导激活的芳香烃受体复合物,特异识别以纳米金为报告基团的二噁英反应探针,该 探针被释放后进行条形码放大,通过纳米金银染技术增强识别信号,并记录其吸光度值,从 而可以简单灵敏地快速筛检二噁英类化合物.在一定的反应时间和浓度范围内（10^-14～10^-10mol/L）,溶液的吸光度值与2,3,7,8 四氯二苯并二噁英（2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD）浓度之间呈正相关 ,方法检测限为0.01 pmol/L,变异系数为5%～8%.用纳米金生物条形码（Nano Barcod e,nanoparticle based bio barcode）方法和现有的生物分析方法（CALUX,chemical activated luciferase gene expression）分别测定TCDD标准品,并绘制剂量效应曲线.结 果表明,本方法灵敏度高,线性范围宽,重复性好.本研究纳米金生物条形码方法的检测灵 敏度高于CALUX将近5倍(EC₅₀分别为 4×10^-12 mol/L 和 2×10^{- 11} mol /L),检测限较CALUX降低了10倍（检测限分别为1×10^-14 mol/L 和1×10 ^-13 mol/L）,变异系数分别为5%～8%和15%～30%.