诺维信公司推出新型酶技术提高玉米乙醇生产效率

2013年6月10日,诺维信公司宣布,开始推出可以提高玉米乙醇生产效率5％的新型酶技术。该技术能以更少的玉米产出更多乙醇,并且将玉米油的提取率提高13％,节约8％的能耗。由SpirizymeAchieve、Olexa和Avantec一起使用的新型酶技术能够让生产者以更少的原料产出更多的乙醇,从而提高利润。     

反复冻融与超声波法对枯草杆菌破壁的比较研究

对比研究反复冻融与超声波两种方法破碎枯草杆菌的效果。研究发现:在试验条件下,反复冻融法破碎率最高达51.2%,且耗时较长;超声波破碎率达90%以上约需30min,当菌液浓度为5亿/ml,用Ф10的变幅杆,破碎80次的效率高达99.8%。     

浅谈Caco-2细胞在药物研究中的改良与进展

目的:将Caco-2细胞模型的改良研究特征及其在药物研究中的应用进展进行系统的总结,便于相同领域的研究人员能在实际研究中更科学有效的利用该细胞模型。方法:概述了近年来Caco-2细胞模型在药物相互作用、代谢及在药物剂型开发中应用情况,并查阅有关改良研究的文献,总结对Caco-2细胞模型进行的改良方法。结果与结论:Caco-2细胞模型在药物研究中有良好的吸收、代谢规律。其中包括通过基因重组、基因敲除或化学物质诱导改变转运蛋白表达和细胞内的代谢酶,增加私液层可以通过加入私蛋白或细胞共培养方式来完成,将培养周期缩短,增加药物溶解性与减少非特异性结合等。这些改良使该模型能更好地模拟体内生理条件,Caco-2细胞模型是药物体外研究十分稳定且良好的方法,能够使其在研究药物的吸收、代谢及高通量筛选中发挥及其显著的作用。     

不稳定生物样品的前处理

本文综述了几种不稳定生物样品的前处理方法,如易被酶解的蛋白变性或加入抑制剂使酶失活,易被氧化的加入抗氧剂或衍生化掩蔽不稳定基团,光不稳定的避光操作,易受pH值和温度影响的选择合适条件等,最大程度保证测定结果的准确性。     

ERCC1对H520细胞Mdr1及SP细胞的影响分析

目的:分析ERCC1对H520细胞中Mdr1及SP细胞比例的影响。方法:利用RNA干扰技术构建ERCC1-shRNA重组质粒表达载体,转染并筛选出阳性稳定转染的H520细胞;采用RT-PCR和WesternBlot的方法检测ERCC1对H520细胞多药耐药1(Mdr1)的影响;采用流式细胞仪检测ERCC1对H520细胞SP细胞比例的影响。结果:RT-PCR检测出Mdr1 mRNA在含有ERCC1-shRNA的H520细胞和含有空载体的细胞中和内参的A比值分别为0.423±0.147和0.468±0.02(n=5),两者有显著性差异;Western-Blot检测出Mdr1蛋白浓度在含有ERCC1-shRNA的H520细胞较含有空载体的细胞中明显降低。含有ERCC1-shRNA的H520细胞SP细胞比例达到0.8%,而含有空载体的H520细胞的SP细胞比例则达到2.2%。结论:RNA干扰技术可以构建重组质粒,稳定转染的H520细胞能被筛选出,当ERCC1基因被抑制时,Mdr1基因也会收到抑制,同时使H520细胞SP细胞比例明显降低。     

大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较

定向进化的突变体库建立是定向进化是否成功的关键因素,只有建立足够大的库容才有可能筛选到合适的突变体。然而用来做定向进化的宿主菌的转化效率并不总是那么高,难以达到建库要求。而且在以常规分子克隆方法做连接转化时,耗时长,效率低等问题也影响了突变体库的建立,高效的克隆转化方法是定向进化所需求的。本文以大肠杆菌BL21(DE3)为转化宿主菌,挑选了一种新的高效的克隆转化方法,与现在实验室常规克隆转化方法进行了比较,证明了PCR多聚质粒的克隆转化方法在定向进化突变体库构建中的优势。为定向进化突变体库的构建提供了新的高效可靠的技术方法。     

浅议瘤背石磺酶解多肽开发前景

作为海洋活性物质的重要组成部分,多肽类化合物在人体降血压、抗氧化、抗肿瘤等诸多方面有着重要的作用。本文在阐述近些年来贝类酶解多肽研发的基础上,论述了瘤背石磺酶解多肽的开发前景。     

Secretory/releasing proteome-based identification of plasma biomarkers in HBV-associated hepatocellular carcinoma

For successful therapy, hepatocellular carcinoma (HCC) must be detected at an early stage. Herein, we used a proteomic approach to analyze the secretory/releasing proteome of HCC tissues to identify plasma biomarkers. Serum-free conditioned media (CM) were collected from primary cultures of cancerous tissues and surrounding noncancerous tissues. Proteomic analysis of the CM proteins permitted the identification of 1365 proteins. The enriched molecular functions and biological processes of the CM proteins, such as hydrolase activity and catabolic processes, were consistent with the liver being the most important metabolic organ. Moreover, 19% of the proteins were characterized as extracellular or membrane-bound. For validation, secretory proteins involved in transforming growth factor-β signaling pathways were validated in plasma samples. Alphafetoprotein (AFP), metalloproteinase (MMP)1, osteopontin (OPN), and pregnancy-specific beta-1-glycoprotein (PSG)9 were significantly increased in HCC patients. The overall performance of MMP1 and OPN in the diagnosis of HCC remained greater than that of AFP. In addition, this study represents the first report of MMP1 as a biomarker with a higher sensitivity and specificity than AFP. Thus, this study provides a valuable resource of the HCC secretome with the potential to investigate serological biomarkers. MMP1 and OPN could be used as novel biomarkers for the early detection of HCC and to improve the sensitivity of biomarkers compared with AFP.     

植物激素乙烯作用机制的最新进展

气体植物激素乙烯在植物生长发育及应对胁迫的防御反应中起重要调控作用．通过20多年的研究,利用模式植物拟南芥,勾画出一条自内质网膜受体至细胞核内转录因子的线性乙烯信号转导通路．本文概述了研究乙烯信号转导的方法及乙烯信号转导的基本过程;阐述了最新发现的乙烯信号从内质网膜传递到细胞核的分子机制,即原本定位于内质网膜上的EIN2蛋白其C端被剪切之后进入细胞核,然后通过抑制EBF1／2而稳定转录因子EIN3／EIL1;根据最近多个小组报道EIN3／EIL1直接调控除乙烯响应基因之外的其他生物学过程相关基因,提出了EIN3／EIL1可以作为网络节点整合多条信号通路的新观点;通过分析不同信号通路调控EIN3／EIL1的方式,发现不仅EIN3／EIL1的蛋白稳定性受到调控,而且其转录活性还受到诸如JAZ,DELLA等转录调节因子的调控．本文展望了未来乙烯信号转导通路的研究方向与研究热点．