PCR和生物素探针对HFRSV的检测和分型的探讨

分析比较肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）７６／１１８株和Ｒ＿（２２）株的核苷酸序列,根据引物设计原则及检测分型的目的,设计并合成了３对引物。１对引物取于两毒株间的高同源区段,作为共同引物和外引物;另两对引物取于两毒株间的低同源区段,分别作为野鼠型引物、家鼠型引物和内引物。建立了ＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＮｅｓｔＰＣＲ方法,并用ＮｃｓｔＰＣＲ合成了两种型特异的生物素探针。ＰＣＲ检测７６／１１８、Ａ＿９、陈、Ｒ＿２、Ｒ＿２２５个毒株,用外引物时均扩增出１条约３００ｂｐ的条带;用内引物的野鼠型引物时,除Ｒ＿（２２）株之外,其余４株均扩增出１条约７０ｂｐ的条带。斑点杂交试验证实了ＰＣＲ检测分型的准确性。ＮｅｓｔＰＣＲ和生物素探针斑点杂交试验可以测出１－１０ｂｇ的目的ｃＤＮＡ。     

KM－1d突变株小鼠的模型建立及遗传分析

在饲养经剖腹产净化后的ＫＭ种群时,我们发现了一些后肢畸形的动物、通过挑选后已成为一个稳定遗传的突变株,由于此群体产生的后代１００％均为后肢畸形动物,因此可以认定为１ｄ／１ｄ纯合子动物。命名为ＫＭ—１ｄ小鼠。将ＫＭ－１ｄ纯合子动物与近交系ＤＢＡ／２小鼠杂交得到Ｆ１代,再经Ｆ１代互交或与双亲回交。通过对后代的形态学观察及遗传方式的分析,证明为常染色体隐性单基因遗传。另外,对１３８只ＫＭ－１ｄ畸形小鼠进行解剖观察还发现有４２％的动物在骨骼畸形的同时伴有左侧泌尿系统畸形。因此可以认定ＫＭ－１ｄ小鼠是一种患有骨－肾先天性畸形综合症的动物模型。     

渔游蛇（Natrix piscator）的雄性生殖周期及其肾性节的生殖生理学研究：…

福州近郊分布的渔游蛇睾丸精子发生在１０月达最高峰。全年出现二次雄性激素高峰。肾性节在１０月份达发育高峰,其上皮细胞中的分泌颗粒含糖类、缩醛磷脂、酸性磷酸酶和乳酸脱氢酶,不含酸性粘多糖、碱性磷酸酶、琥珀酸脱氢酶或含量（活性）极低。肾性节的组织变化与睾丸的精子发生活动呈同步性。     

渔游蛇(Natrix piscator)的雄性生殖周期及其肾性节的生殖生理学研究:Ⅰ.雄性生殖周期及肾性节的组织学和组织化学

福州近郊分布的渔游蛇睾丸精子发生在10月份达最高峰。全年出现二次雄性激素高峰。肾性节在10月份达发育高峰,其上皮细胞中的分泌颗粒含糖类、缩醛磷脂、酸性磷酸酶和乳酸脱氢酶,不含酸性粘多糖、碱性磷酸酶、琥珀酸脱氢酶或含量(活性)极低。肾性节的组织学变化与睾丸的精子发生活动呈同步性。     

痢疾志贺氏毒素B亚单位在大肠杆菌中的高效表达

本文从痢疾志贺氏Ⅰ型菌W30864的染色体克隆了编码志贺氏毒素(Stx)的基因,表达Stx的基因位于约4．5kb的EcoRl片段内。一系列的生物学试验表明：我们构建的杂种质粒(pMGC001)能产生Stx,产量为亲代株的16倍,克隆株不仅有细胞毒和肠毒作用,而且还有神经毒性。我们又从质粒pMGC001将志贺氏毒素的B亚单位(Stx—B)的基因克隆至表达载体pJLA503,获得了Stx—B在大肠杆菌中的高效表达,Stx—B已被纯化,其特异的多克隆和单克隆抗体也被制备。Westem blot表明它们能与Stx—B进行特异的抗原抗体反应。     

大鼠肾髓质活体微循环及观察方法

采用肾乳头暴露方法活体观察Sprague-Dawley大鼠肾髓质微循环。结果发现:正常成年大鼠肾乳头可暴露1.1±0.5mm; 乳头表面直血管数29.8±6.3;升、降支比例3.4:1。升支平均直径13.68±6.13μm,降支10.8±2.57μm。肾乳头连续暴露观察10h,其微循环未发生明显病理性改变。说明这一方法可以用于肾髓质微循环活体研究。     

肾脏对钾平衡的调控及临床意义

饮食摄入的K⁺在肠道中几乎全部被吸收,肾脏是机体排钾最重要的器官,占机体排出钾总量的90%以上。肾脏对钾的排泄主要取决于醛固酮敏感的远端小管主细胞对钾的分泌,该分泌过程与主细胞顶端膜上的上皮钠通道(epithelial sodium channel,ENaC)对Na⁺的重吸收相耦联。当ENaC将Na⁺从管腔中转入细胞内,管腔中负电荷相对增加,而K⁺外流、H+外流和Cl-内流是应对Na⁺内流的3条途径,即3条途径均与Na⁺内流耦联。一般情况下,Na⁺内流=K⁺外流+H⁺外流+Cl^-内流,Na⁺内流、H+外流和Cl-内流中任一因素发生变化,均可影响K⁺外流,从而影响肾脏对K⁺的排泄：(1) Na⁺内流受ENaC表达水平的影响,而ENaC的表达主要受醛固酮-盐皮质激素受体(mineralo...     

非线性渗透压条件下肾近曲小管内流体流动分析

肾是人体中最重要的物质输运器官，近曲小管是肾中主要的体液重吸收管道，本文研究体液在近曲小管内的流动，认为管壁的重吸收由反映一般滤过现象的Starling定律所控制，并提出渗透压是非线性的假定，不可压缩牛顿流体以小雷诺数在管道中流动的基本议程是Stokes议程，由量级估计得到初级近似和次级近似议程。解这两组议程组得到了压力、速度和流量的分析表达式。表征管壁重吸收特征的参数根据实验流量数据确定。本文结果与其他作者相比较更加符合实验结果。     

家蚕内网虫属微孢虫核糖体小亚单位RNA(SSUrRNA)核心序列的克隆和序列分析

Endoreticulatus bombycis is a new pathogenic microspordia isolated from the silkworm larvae.With polymerase chain reaction(PCR) method,we amplified a fragment of the core sequence of the small subunit ribosomal RNA( SSUr-RNA) of Endoreticulatus bombycis.The SSUrRNA fragment was inserted into pMD18-T Vector and then cloned.It had a length of 1230 nucleotides and a percentage GC content of 51.3%.The accession number in Genbank is gill 181769|AY009115.The secondary structure model of the SSUrRNA of Endoreticulatus bombycis was constructed both on the bases of the sequence alignment and RNAFOLD program of the PC-GENE package.The secondary structure model revealed that Endoreticulatus bombycis lacked many cukaryotic hclices.such as heli10,helix 11.helix 18,helix 43 and helix 46,but it has V4 region and has more of prokaryotic character.Analyzed by Blast,Endoreticulatus bombycis.Endoreticulatus schubergi and pleistophora sp.(Sd-Nu-IW8201) have a high similarity,over 98%,Phylogeny tree of Endoreticulatus and Pleistophora species showed that Endoreticulatus and Pleistophora sp.(Sd0Nu-IW8201) was in a group and the other Pleistophora species were in another group[Acta Zoologica Sinica 49(3):414-420,2001].