用免疫单扩散法测定低pH静注丙球IgG含量及其影响因素初探

本文报道了低ＰＨ值注丙球ＩｇＧ含量测定免疫单扩散法的建立,并对其影响因素进行了初步试验。结果表明,试验方法较为稳定,简单易行。在低ＰＨ静注丙球ＩｇＧ含量检测时,进口Ｓｉｇｍａ琼脂糖效果优于国产琼脂糖（Ｐ〈０．０１）,国产（东海）琼脂糖不适于ＩｇＧ含量的定量检测;应先将静注丙球ＰＨ调至中性后进行ＩｇＧ含量测定（Ｐ〈０．０５）样品中含有的１０％麦芽糖对试验结果无影响（Ｐ〉０．０５）。     

蛋白质微阵列生产用琼脂糖修饰玻片制备的条件优化

目的:建立一种以琼脂糖修饰的玻片为载体的蛋白质微阵列制备的优化方法,比较琼脂糖修饰玻片和醛基修饰玻片及氨基修饰玻片对蛋白质固定效率的优劣。方法:将羊IgG固定在载体表面,经过洗涤、封闭,再加入Cy3标记的兔抗羊IgG,孵育,洗涤后用共聚焦激光扫描仪获取图像,检测各点的荧光强度,根据荧光强度确定最佳琼脂糖浓度,最佳NaIO4浓度,最佳固定时间以及封闭时间等实验条件。结果:琼脂糖浓度为1.2％、NaIO4浓度为20mmol／L、固定时间为1h、孵育时间为45min时,蛋白质在载体上的固定效率和反应活性最高。在固定的抗体浓度相同的情况下,琼脂糖修饰玻片荧光强度是醛基修饰玻片的2.6倍,是氨基修饰玻片的9倍。结论:确立了蛋白质微阵列生产用琼脂糖修饰玻片制备的优化条件,用该优化条件制备的琼脂糖玻片更适合用于蛋白质微阵列载体。     

一种快速、高效提取多种样品DNA的方法

“DNA的提取和鉴定”是高中生物学课程中的重要实验之一,基于学生提出的问题,笔者引导学生对DNA提取方法进行文献梳理和实验优化,探索出了一种快速、高效提取DNA的方法,该方法适用范围广,可以有效提取动物组织、植物组织、土壤微生物、粪便等材料的DNA,该探究活动激发了学生的学习兴趣,培养了学生总结归纳能力、创新思维和实验探究能力。     

用透析膜从琼脂糖胶中回收DNA片段

分离与回收DNA片段是基因操作的重要环节之一。本文介绍了一个用透析膜从琼脂糖胶中回收 DNA 片段的改进方法。利用本法回收DNA片段洗脱容易、节约时间、回收率在80％ 左右。回收的 DNA片段可用于酶切反应、连接反应和用缺口位移反应制备32p标记DNA探针。     

RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳的优化及探讨

目的：优化RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳条件。方法：对实验器材进行彻底的RNase灭活处理;在原有电泳过程的基础上,增加预电泳、缓冲液液面的处理和制胶过程中未加入溴化乙锭等优化过程。结果：优化后的电泳不仅能验证总RNA的完整性,而且能鉴定RNA的分子大小。结论：优化的RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳法操作简单、省时、快速,RNA条带清晰、定位准确、无弥散及非特异条带。     

RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳的优化及探讨

目的:优化RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳条件。方法:对实验器材进行彻底的RNase灭活处理;在原有电泳过程的基础上,增加预电泳、缓冲液液面的处理和制胶过程中未加入溴化乙锭等优化过程。结果:优化后的电泳不仅能验证总RNA的完整性,而且能鉴定RNA的分子大小。结论:优化的RNA甲醛琼脂糖凝胶电泳法操作简单、省时、快速,RNA条带清晰、定位准确、无弥散及非特异条带。     

一种高效、快速从凝胶中回收DNA的方法

目的:介绍了一种从普通琼脂糖电泳中回收DNA的简便、快捷、高效且廉价的方法.方法:利用0.5 mL离心管、1.5mL离心管、尼龙膜做成的一个小装置.把含有DNA的凝胶放在膜上,离心,收集从管底流出来的液体,用乙醇沉淀DNA.结果:最终回收率为60%左右,回收率大约为市售试剂盒的90%,接近市售DNA回收试剂盒.结论:该方法操作简单,回收率高,无其他试剂污染.     

一种新的小分子DNA纯化方法——石英棉纯化法

建立了小分子DNA的高效分离纯化方法,适合于分离几十到300个核苷酸组成的基因,在此基础上,建立更大的DNA片段的分离纯化方法。对不同大小的DNA片段经琼脂糖凝胶电泳后,采用石英棉分离纯化法纯化DNA。结果显示,石英棉的分离效果最好,对于200个碱基以下的DNA的回收率约高达90%以上,对于300个碱基的DNA回收率为约85~90,该项技术纯化的DNA的酶切、酶连效率与试剂盒法纯化的DNA的酶切、酶连效率相同。该分离纯化DNA技术明显优于试剂盒方法。     

新品了望

PCR试剂的缓冲液 Thermo Fisher Scientific宣布Thermo Scientific Thermo-Start系列热起始RCR试剂现提供Reddymix缓冲液可进行更方便,无误差的配置．改善了反应的再现性。缓冲液含有惰性红色染料增加了试剂和塑料容器之间的对比度从而一眼就可以方便的判断是否准确移液。该试剂为每个反应含有正确体积提供了再次保证增加了实验的再现性。缓冲液内含有的红色染料和沉淀剂使终PCR产物可以直接进行琼脂糖凝胶上样,减少了PCR后处理步骤．节省了可观的时间。