建立小鼠淋巴瘤模型所需环磷酰胺最佳预处理剂量探索

目的:探讨不同剂量环磷酰胺对小鼠肿瘤成模情况的影响,寻找一种简单、有效的建立肿瘤模型的预处理方法。方法:给予BALB/c裸鼠腹腔注射不同剂量环磷酰胺,72小时后再给予小鼠皮下接种淋巴瘤细胞,观察预处理前后小鼠外周血白细胞数量及体重变化情况,以及肿瘤成模率、急性死亡率等。结果:①组1(NS对照组)、组2(100mg/kg×1d)、组3(125mg/kg×1d)、组4(75mg/kg×2d)预处理后体重较处理前无显著性变化,亦无急性死亡情况发生;而组5(125mg/kg×2d)、组6(200mg/kg×2d)、组7(125mg/kg×3d)、组8(250mg/kg×3d)小鼠体重较预处理前明显减轻,且急性死亡率依次为30%、58.3%、50%、75%;②组1和组2小鼠预处理后72小时外周血白细胞数较处理前无明显差异,同时均未成模;而组3、组4、组5、组6、组7、组8小鼠白细胞较预处理前均显著下降,成模率依次为20%、83.3%、60%、33.3%、50%、25%。结论:使用环磷酰胺75mg/kg连续2天腹腔注射的预处理方案,操作简单,成本低廉,通过观察外周血白细胞数和小鼠体重水平等指标即可初步判断建模情况,同时肿瘤成模率高,毒副作用小,是理想的预处理方案。     

环磷酰胺对长爪沙鼠精子畸形的影响

目的探讨环磷酰胺（CP）对长爪沙鼠精子畸形的影响。方法取长爪沙鼠随机分成正常对照组,CP组（低、中、高剂量组即剂量分别为20 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg）,环磷酰胺经腹腔注射,连续注射5 d,药后30d麻醉沙鼠,剖腹取出两侧附睾制备精子悬液涂片,用甲醇固定10 min,用2%的伊红染色30 min,蒸馏水洗片,显微镜观察精子形态。结果低、中、高剂量组分别与正常对照组比较,长爪沙鼠精子畸形率差异极显著（P〈0.01）;低、中剂量组分别与高剂量组相比较,长爪沙鼠精子畸形率差异极显著（P〈0.01）;低剂量组与中剂量组比较,精子畸形率差异不显著（P〉0.05）。形态学观察显示：环磷酰胺对长爪沙鼠精子影响畸形类型主要为尾折叠、尾粗细/长短/扭曲和无钩。结论环磷酰胺对长爪沙鼠精子有一定的致畸率,且对长爪沙鼠精子尾部影响最大。在一定剂量内范围内,环磷酰胺对长爪沙鼠的精子致畸率无明显区别;当高于一定剂量,随着环磷酰胺用药剂量的增加,长爪沙鼠的精子致畸率也增加。     

骨髓间充质干细胞对环磷酰胺诱导卵巢损伤的保护作用

目的:研究骨髓间充质干细胞(MBSc)对注射环磷酰胺(CTX)引起的大鼠卵巢损伤的保护作用。方法:将30只SD大鼠按随机数字表随机分为三组,即对照组,模型组及细胞移植组,分别经尾静脉接受生理盐水,CTX和CTX+MBSc移植。监测大鼠体重,动情周期的变化,用药结束后一周处死大鼠,测定血清雌二醇(E2),卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)的变化,观察各组大鼠卵巢形态学及卵泡数量变化,并利用原位细胞凋亡TUNEL法检测3组大鼠卵巢中细胞凋亡指数(AI)。结果:与对照组比较,模型组大鼠体重下降,动情周期延长,卵泡数量下降,E2下降,FSH及LH升高,组织细胞AI增加。与模型组比较,细胞移植组大鼠体重增加,动情周期缩短,卵泡数量增加,尤其是中大卵泡数增加,E2上升,LH下降,FSH接近正常。结论:MBSc移植能通过减少卵巢组织AI而在一定程度上减少环磷酰胺引起的卵巢功能损伤。     

人参多糖对环磷酰胺的增效减毒作用

目的探讨人参多糖（ginseng polysaccharide,GPS）对化疗药物环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）抗肿瘤的增效减毒作用。方法建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,随机分组,设模型对照组（生理盐水）、环磷酰胺组（30 mg/kg）、人参多糖给药组（7.5、15、30 mg/kg剂量组）和联合给药组（GPS 7.5、15、30 mg/kg,CTX 30 mg/kg）;人参多糖尾静脉注射,CTX腹腔给药,连续给药10 d;测定抑瘤率、血液学指标、脾脏系数和胸腺系数,评价人参多糖对环磷酰胺的增效减毒作用。结果 GPS、GPS＋CTX各组肿瘤生长明显低于模型对照组（P〈0.01）,GPS中、高剂量＋CTX联合给药组肿瘤生长明显低于CTX组（P〈0.05,P〈0.01）。GPS高剂量＋CTX组与CTX组相比,体重、脾脏指数和胸腺指数明显升高（P〈0.05）。结论人参多糖对化疗药物环磷酰胺抗小鼠肝癌H22肿瘤具有增效减毒作用。     

环磷酰胺诱导小鼠血小板减少症模型的建立(英文)

比较由环磷酰胺两种不同给药方式诱导小鼠血小板减少症模型的效果,并对效果较稳定的一种给药方式进行最佳造模剂量摸索,以期确定一个造模效果较好,毒副作用较低,利于观察治疗药物疗效的血小板减少症模型.模型A组,第1天尾静脉注射环磷酰胺200 mg/kg,然后连续6 d,每天1次以维持剂量30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺.模型B组,按150 mg/kg皮下注射环磷酰胺,每天1次,连续3 d.结果显示模型B组造模效果较好,故以模型B组给药方法进行剂量摸索实验.由第7天的血小板计数可知环磷酰胺低(100 mg/kg)、中(120mg/kg)、高(140 mg/kg)剂量均可引起血小板减少症,而低剂量组与其他组比较有高效低毒的特点,更有利于观察治疗药物的作用,可用于具有升血小板作用药物的药效学研究.     

联合使用低剂量环磷酰胺有效增强热休克蛋白gp96免疫佐剂功能

前期研究发现热休克蛋白gp96作为分子伴侣,能特异结合乙肝病毒(HBV)表位肽,并将结合的多肽交叉呈递给MHCⅠ类分子,从而激活病毒特异性CD8+ T细胞(CTL).在此基础上,研究BALB/c小鼠模型联合低剂量环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对热休克蛋白gp96免疫佐剂功能的影响.以gp96或其N端片段(N355)与H-2Kd限制的乙肝病毒核心蛋白表位HBcAg87-95作为佐剂联合低剂量CTX免疫BALB/c小鼠.联合使用低剂量CTX的试验组CD8+T细胞、IFN-γ+CD8+T细胞、乙肝抗原特异T细胞比例显著高于未使用CTX的对照组(P＜0.05),且联合使用CTX的试验组CD4+CD25+调节性T细胞(T Regulatory Cells ,Treg)比例显著低于单独使用gp96和N355试验组(P＜0.05),说明低剂量的CTX能特异性抑制Treg从而导致T细胞的增加.以上研究表明联合使用低剂量的环磷酰胺能有效增强gp96免疫佐剂功能,这为进一步优化gp96佐剂疫苗的使用提供了依据.     

TCD方案治疗MM疗效观察

目的观察TCD方案治疗初发多发性骨髓瘤的效果及其毒副作用。方法反应停400mg/d口服6个月,环磷酰胺每次0.2g,隔日静滴(至血WBC<3.0×109/L时停),地塞米松40mg/d于第1~4、9~12、17~20天静滴。1个月为1疗程,休息1个月后再行下1疗程治疗,共3~4个疗程。结果疗程结束时,完全缓解6例,部分缓解5例,轻微反应1例;总缓解率78.6%,总反应率85.7%。毒副反应较轻,未发生治疗相关性死亡。结论TCD方案治疗初发多发性骨髓瘤疗效较好,毒副反应轻。     

大豆提取物（CKBN）对免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的观察大豆提取物（CKBN）对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法腹腔注射环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）建立免疫功能低下小鼠模型,观察1、25、50、100 mg/kg剂量CKBN对免疫低下小鼠免疫功能的影响。结果25 mg/kg组的CKBN可显著增加免疫低下小鼠的脾指数;25、50、100 mg/kg组均能明显抑制环磷酰胺对小鼠外周血白细胞数量的影响,1 mg/kg组可显著提高单核细胞百分率,50 mg/kg组可显著提高中性粒细胞百分率;100 mg/kg组的IgG2a水平高于环磷酰胺组;1、25、50 mg/kg可显著提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能;25 mg/kg组可显著提高NK细胞杀伤活性。结论CKBN能显著增强CTX造成的免疫低下小鼠的免疫功能。     

杨树桑黄饮片水提物对免疫低下小鼠的免疫功能的影响

探究桑黄饮片水提物对环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能的影响。本研究以桑黄饮片为原料,采用超声和沸水提取方法得到桑黄饮片水提物,注射环磷酰胺造成小鼠免疫功能低下,通过测定脾脏和胸腺指数、血清免疫球蛋白和细胞因子、脾淋巴细胞增殖、碳粒廓清等实验,对免疫低下小鼠的免疫功能进行研究评价。结果表明,灌胃桑黄饮片水提物的小鼠与模型组相比,免疫器官指数、血清中免疫球蛋白含量、细胞因子水平、脾淋巴细胞增殖程度、巨噬细胞的吞噬速率和吞噬指数、小鼠耳肿胀度均有提高,脾脏苏木精-伊红(HE)染色也表明桑黄饮片水提物可以改善环磷酰胺导致的脾脏组织病理状态。本研究表明桑黄饮片水提物对环磷酰胺所致的免疫抑制小鼠具有良好的免疫保护作用,为桑黄饮片扩大临床应用提供实验依据。     

促性腺激素释放激素类似物缓解环磷酰胺导致卵巢损伤的机制研究

目的:通过动物实验和细胞实验初步探索促性腺激素释放激素类似物在环磷酰胺暴露下保护卵巢功能的机制。方法:构建乳腺癌荷瘤小鼠36只,随机分成Control组,CTX组和CG(CTX+GnRHa)组,药物干预后麻醉下剥离肿瘤和子宫卵巢并称重,计数卵巢原始卵泡和生长卵泡数目,提卵巢蛋白进行Western blot检测抗缪勒氏管激素(Anti-Müllerian hormone,AMH)蛋白表达量,提取卵巢RNA进行qRT-PCR实验检测mRNA水平,心尖取血检测血清AMH水平。卵巢颗粒细胞加药处理36小时后,收细胞蛋白进行Western blot检测AMH蛋白表达量,提细胞RNA进行qRT-PCR检测mRNA水平,ELISA法检测细胞培养基上清中AMH水平。结果:成瘤后第21天,CTX组和CG组小鼠肿瘤质量无统计学差异(P>0.05)且均小于Control组(P<0.05);CTX组子宫和卵巢的总重量均显著低于Control组和CG组(P<0.01),卵巢内原始卵泡数量均低于Control组和CG组(P<0.001),生长卵泡数量无统计学差异(P>0.05)。动物实验,Western blot结果提示,CTX组卵巢AMH蛋白含量显著高于Control组或CG组(P<0.05);由ELISA结果提示,CTX组血清AMH蛋白浓度显著低于CG组(P<0.01)。细胞实验,由Western blot可见,CTX组AMH蛋白含量显著高于Control组和CG组(P<0.05);由ELISA实验可见,CG 750组和CG1000组培养基上清的AMH蛋白浓度均高于对应CTX剂量组(P<0.01)。无论在动物实验还是细胞实验中,各组AMH的mRNA表达水平均无统计学差异(P>0.05)。结论:在CTX化疗的同时运用GnRHa,可以在不干扰化疗疗效的前提下,通过减少CTX所致细胞内AMH潴留程度,增加细胞外和血清中的AMH浓度从而发挥保护卵巢储备的功能。