乳酸杆菌脂磷壁酸通过下调脂筏中Lck 激酶水平抑制大鼠肝脏Kupffer 细胞TLR4 通路

目的:探讨保加利亚乳酸杆菌脂磷壁酸(Lipoteichoic Acid of Lactobacillus bulgaricus,LBG-LTA)是否能下调细胞膜脂筏中的淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase,Lck),进而抑制大鼠肝脏Kupffer细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)通路。方法:分离培养10只雄性Wistar大鼠的Kupffer细胞;培养LBG并制备LBG-LTA;有或无LBG-LTA、脂筏裂解剂甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrine,MβCD)、Lck抑制剂PP2分别预处理情况下,以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激Kupffer细胞,提取各组细胞的膜-浆蛋白及核蛋白,蔗糖密度梯度离心法提取膜-浆蛋白中的脂筏及非脂筏组分,Western blot检测脂筏及非脂筏组分中TLR4、TANK结合激酶1(TANK binding kinase-1,TBK1)、Lck及核蛋白中的核因子B(nuclear factor-κB,NF-κB),酶联免疫吸附法检测培养上清中的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)。结果:LPS上调的TLR4、Lck主要在脂筏内(与对照孔脂筏相应数值之比为0.95 0.23 vs 0.0120.0023,1.05 0.26 vs 0.022 0.0052,P均0.05),TBK1主要在非脂筏组分中(与对照孔非脂筏组分数值之比1.02 0.21 vs 0.0480.011,P0.05),核蛋白中的NF-B及培养上清中的TNF-α和IL-1β亦明显升高(与对照孔相应数值之比为0.78 0.16 vs 0.0760.014,189.2 27.1 vs 5.62 0.82,131.6 18.8 vs 7.24 1.14,P均0.05)。与MαCD或PP2一样,LBG-LTA也明显抑制LPS的作用(LTA+LPS孔脂筏中TLR4、Lck与LPS孔相应数值之比为0.15 0.036 vs 0.95 0.23,0.17 0.052 vs 1.05 0.26,非脂筏组分中TBK1与LPS孔的比较为0.25 0.062 vs 1.02 0.21,NF-B、TNF-α及IL-1β与LPS孔相应数值之比为0.17 0.035 vs 0.78 0.16,32.2 4.37 vs189.2 27.1,23.4 3.29 vs 131.6 18.8,P均0.05)。结论:LBG-LTA下调大鼠Kupffer细胞膜脂筏中的Lck,进而抑制其TLR4通路。     

环介导等温扩增技术的常见问题分析与研究进展

环介导等温扩增(LAMP)技术是近年发展起来的新型核酸体外等温扩增技术,具有快速、特异、敏感、简便等特点,使该技术在核酸快速检测领域得到了广泛的应用,但LAMP技术也在不断完善与发展中。本文就LAMP扩增产物的污染,引物间非连续配对的假阳性问题的对策,以及在LAMP技术基础上发展起来的其他相关技术进行综述,为该技术在基层的推广应用提供参考。     

USP10的分子功能及在肿瘤中的研究进展

泛素特异性蛋白酶10(ubiquitin-specific protease 10,USP10)是去泛素化酶(deubiquitinating enzymes,DUBs)家族中的一个重要成员。近年来的研究发现USP10参与了细胞中多种生命活动的调节,如细胞增殖、细胞凋亡、DNA损伤修复、炎症应答等。同时,USP10在多种肿瘤的发生发展过程中表现出其重要作用。现就USP10的分子功能及其在肿瘤中的研究进展进行综述,以期发现与USP10相关的某些关键的分子机制,为肿瘤诊断与治疗提供参考。     

045树突细胞前体可受登革病毒和人类免疫缺陷病毒感染

黏膜表面、皮肤和血液中的树突细胞（dendritic cells，DC）由于能在这些部位摄取抗原，易成为病毒感染的初始靶细胞。含有Birbeek颗粒的CDl4^＋细胞亚群能分化成朗格汉斯型DC，表明了这些亚型是DC的前体。这些CDl4^＋细胞具有髓样DC前体的特性，能表达凝集因子XⅢa或C型凝集素（lectin）DC，SIGN等特异性表面标志。通过加入单核细胞集落刺激因子（M-CSF）对CD34^＋前体细胞进行培养可以获得CDl4^＋亚群，     

研究选萃

昆虫是大多数生态系统中的主要力量，而在关于生物多样性的研究中它们却经常没有鸟类、哺乳动物和植物受到的关注多。2007年8月9日出版的《Nature》上2篇论文改变了这种不平衡状态。Novotny等人研究了巴布亚新几内亚75000m^2雨林中的大约500种鳞翅目昆虫、甲虫和果蝇。他们发现，食草性昆虫的大多数种都广泛分布。物种丰富度很高，这在热带很正常，但即便在数百公里距离内所发现的物种也没有很大改变。Dyer等人记录了从加拿大到巴西的地域范围内大量植物被蝴蝶和蛾幼虫取食的寄主特异性，该项研究得出了很不相同的结论。他们发现，一种昆虫所食的树种的平均数量在热带要少于在”西半球”的温带部分，从而证实了自达尔文和华莱士时代以来就被生物学家讨论很多的生态学中的纬度梯度。     

PSMA mimotope isolated from phage displayed peptide library can induce PSMA specific immune response

Prostate-specific membrane antigen (PSMA) is a cell surface glycoprotein expressed predominantly in prostate secretory acinar epithelium and prostate cancer cells as well as in several extraprostatic tissues.Mouse monoclonal antibody 4G5 specific to the extracellular domain of PSMA was used to screen two phage displayed peptide libraries (9aa linear and 9aa cys library).Three 4G5-reactive phagotopes were identified.Sequence analysis of isolated clones demonstrated that the interaction motif“VDPA/SK” has high homology to 719-725aa on PSMA.Immunohistochemical staining of the prostate cancer sample with the psma-mimic phagotope(mimotope) immunized serum antibodies demonstrate that the mimotope isolated from the phage displayed peptide libraries can induce PSMA specific immune response in vivo.     

无指盘臭蛙体内寄生双睾虫属多盘吸虫一新种

于云南一平浪镇无指盘臭蛙Rana grahami Boulenger膀胱内检获单殖吸虫多盘科双睾虫属l新种,以宿主名命名为无指盘臭蛙双睾虫Diplorchis grahami sp. Nov..检查36只无指盘臭蛙,感染率为19.4%,感染虫体1～94枚,平均感染强度为31,相对密度为6.02.新种模式标本具有典型双睾属多盘吸虫的特征:消化道两侧均未形成肠盲突,末端不形成联合,不延伸进入后吸器.阴道孔隆起明显,子宫具升支和降支,向后延伸至后吸器内.卵黄腺发达,滤泡状,沿肠管两侧分布至后吸器内.生殖棘7枚排列为冠状.本双睾虫体长平均4.627 mm,虫体最宽处平均1.611mm,与黑斑蛙双睾虫、拉氏双睾虫和杭州双睾虫均属于大型虫体,但新种的几丁质结构与上述3种已记录的双睾虫存在显著差异,其后吸器相对较小,平均为0.681 mm×1.178mm,吸盘直径平均284.22μm,大钩较小,平均295.87μm,X/Y为1.255;但与小型的石林双睾虫比较,大钩X/Y值差异不显著.     

siRNA理性设计原理分析

siRNA作为基因功能研究和临床治疗的重要工具,已经引起了科学界的广泛关注,世界上许多学术和商业机构也开发了相应的siRNA设计程序.近年来,随着对siRNA机制研究的不断深入,尤其是2004年Reynolds等提出siRNA理性设计规则之后,许多新的理论极大地推动了siRNA设计程序的发展.本文就siRNA设计程序所普遍考虑的设计原理,从基本经验规则、siRNA序列特征、靶mRNA的可接近性、热动力学特征以及特异性检验方法等5个方面进行了分析和论述,为国内科研机构开发自己的siRNA设计程序提供思路和方法.