提高重组TRAIL表达产率的优化策略

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（Apo2L/TRAIL）是一种新型的抗肿瘤蛋白。针对缩短发酵周期,提高生产效率这一目标,首先在摇瓶中利用响应面设计优化发酵表达条件,总TRAIL蛋白的表达量提高到25.7%。在此基础上研究了发酵条件对可溶性TRAIL蛋白表达量的影响。于3.7L发酵罐放大进行补料-分批发酵实验时,单位菌体可溶性TRAIL蛋白的表达量提高了67%,实现了在大肠杆菌高密度培养过程中单位细胞重组TRAIL蛋白的可溶性表达和体积生产率的提高。     

利用超低温保存方法脱除香蕉束顶病毒的研究

香蕉束顶病毒(BBTV)是香蕉生产中的严重病害之一,主要通过感病材料和香蕉交脉蚜等昆虫进行传播,目前尚无有效防治方法.本研究以感染BBTV的巴西蕉(Musa AAA Cavendish)为材料,研究了感染BBTV的巴西蕉离体再生和超低温保存技术条件,表明离体茎尖在MS+6-BA 4 0 mg/L+NAA 0 4 mg/L的培养基上分化不定芽较好;采用玻璃化法超低温保存技术保存带有BBTV的香蕉茎尖,再生后植株BBTV脱除率达到60 6%,而常规的茎尖培养对BBTV的脱除率仅为26 7%.     

狭义小奥德蘑属（膨瑚菌科,蘑菇目）的一个新系统

本文对狭义小奥德蘑属Oudemansiella s. str.的概念做了修订,在修订后的属中,狭义干蘑属Xerula s. str.的物种不纳入其中。在狭义小奥德蘑属下,提出了一个包含4个组O. sect. Oudemansiella、Mucidula、Dactylosporina 和 Radicatae的新系统。小奥德蘑组sect. Oudemansiella包括热带至南温带的一些物种,如新热带小奥德蘑O. platensis、澳洲小奥德蘑O. australis、旧热带小奥德蘑O. canarii和宽褶小奥德蘑O. crassifolia,这些物种的菌盖表皮为粘栅栏型,由菌丝组成,但其中常夹杂有链状排列的膨大细胞。粘蘑组sect. Mucidula包含北半球温带至亚热带的一些物种,如粘小奥德蘑O. mucida、网褶小奥德蘑O. venosolamellata和近粘小奥德蘑O. submucida,其菌盖表皮为粘子实层-栅栏型,由近棒状的顶端膨大细胞组成。小奥德蘑组和粘蘑组的物种,在外形和小生境上有相似之处,其担子果皆生于地表外的腐木上,菌柄上有或无菌环。刺孢组sect. Dactylosporina包含中南美洲那些孢子表面有指状凸起的物种。长根组sect. Radicatae由长根小奥德蘑O. radicata及其近缘种为代表,是该属中最大的组,包括该属其他三组之外的所有种。北美的O. americana、欧洲的O. caussei 和东亚的O. hongoi曾被置于小奥德蘑属中的白毛组O. sect. Albotomentosae或干蘑属的亮毛组X. sect. Hyalosetae,在本系统中它们没有纳入小奥德蘑属,因为它们可能代表一个单独的属。本文还提出了1新等级、32个新组合和1个新名称。     

Dynamic monitoring of changes in endothelial cell-substrate adhesiveness during leukocyte adhesion by microelectrical impedance assay

Adhesion of leukocytes to endothelial cells in inflammation processes leads to changes of endothelial cellsubstrate adhesiveness, and understanding of such changes will provide us with important information of inflammation processes. In this study, we used a noninvasive biosensor system referred to as real-time cell electronic sensor （RT-CES） system to monitor the changes in endothelial cell-substrate adhesiveness induced by human monoblastic cell line U937 cell adhesion in a dynamic and quantitative manner. This assay, which is based on cell-substrate impedance readout, is able to monitor transient changes in cell- substrate adhesiveness as a result of U937 cell adhesion. The U937 cell adhesion to endothelial cells was induced by lipopolysaccharide （LPS） in a dose-dependent manner. Although the number of adherent U937 cells to the endothelial cells was verified by a standard assay, the adhesiveness of endothelial cells after addition of U937 cells was monitored by the RT-CES system. Furthermore, focal adhesion kinase protein decrease and F-actin rearrangement in endothelial cells were observed after addition of U937 cells. Our results indicated that the adhesion of U937 cells to LPS-treated endothelial cells reduced the substrate, and such infiltration of leukocytes. the cell adhesiveness to reduction might facilitate     

念珠菌性阴道炎实验诊断方法评价

念珠菌性阴道炎是妇科常见的感染性疾病,曾称为霉菌性阴道炎,多由白念珠菌引起。由于临床抗菌素和激素类药物等的广泛应用,目前该病发病率高达30％～40％,且易复发。临床妇科检查阴道分泌物增多,外观呈白色稠状、白膜状或豆渣状^[1]。阴道分泌物的实验室检测方法有：涂片的直接镜检法、革兰氏染色法、快速凝集法、真菌培养和分子生物学等方法^[2]。为了适合门诊常规检验的快速和准确报告的要求,对现在常用的直接涂片镜检法和快速乳胶凝集法两种检测方法进行结果对比,为临床提供可靠的检验结果。     

蛭龙活血通瘀胶囊的质量标准研究

目的:建立蛭龙活血通瘀胶囊的质量标准.方法:采用薄层色谱法对蛭龙活血通瘀胶囊中黄芪进行定性鉴别;采用HPLC-ELSD法对君药黄芪中的黄芪甲苷进行含量测定.结果:蛭龙活血通瘀胶囊中的黄芪薄层色谱中,在与对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点;黄芪甲苷在0.0236mg/ml～0.236mg/ml间呈良好的线性关系,r2=0.9998,样品平均回收率为99.02%(n=6),RSD为1.02%.结论:所建立的鉴别法专属性强,定量方法操作简单,精密度、重现性好,可以作为控制活血蛭龙通瘀胶囊的有效方法.     

日本NEDO等通过微剂量给药法的转化研究

日本医药品开发支援机构（APDD）和日本东京大学、摄南大学、理化学研究所、放射线综合研究所等6所大学和3所公立研究机关,与日本制药企业联合会的14家企业,将着手通过微剂量给药法的临床试验开发药物动态预测技术。日本新能源产业技术综合开发机构（NEDO）的“促进基础研究向临床研究转化的技术开发”工程将向该项目提供经费保障。     

法30年前诞生20万试管婴儿

法国人口研究所日前宣布,在过去近30年的时间里,该国共诞生了约20万名试管婴儿,与2000年一年全球诞生的试管婴儿数量相当.     

大青杨基因组DNA提取方法的比较

本研究采用改良SDS法、常规CTAB法和改良CTAB法(1.5×CTAB,2×CTAB,3×CTAB)提取大青杨基因组DNA,并用紫外光普分析、凝胶电泳、限制性内切酶消化和RAPD方法进行鉴定.结果表明:5种方法中,改良SDS法DNA提取率最高,但CTAB法比改良SDS法提取获得的DNA纯度高,OD260/OD280为1.73～1.81.与常规CTAB法比较,改良SDS法和改良CTAB法能有效去除蛋白、多糖、酚类及次生代谢物质.综合分析确定改良2×CTAB法为大青杨基因组DNA的最佳提取方法.     

香蕉条斑病毒PCR检测方法的正交优化

香蕉条斑病毒引起的香蕉条斑病,对香蕉生产的危害越来越严重,因此对该病毒的检测也变得很重要.而PCR法已广泛用于植物病毒的检测,所以控制PCR的反应条件对结果的准确性有很大影响.由于在检测过程中使用的是较为敏感的简并引物,因此对PCR反应条件的要求较高.本文采用L9(34)正交设计对PCR体系的反应条件进行了优化.最终获得最佳反应条件为Mg2+ 1.5 mmol/L,dNTP 0.15 mmol/L,Primer0.5μmol/L,TaqDNA聚合酶1.5 U.通过最佳反应条件对采集回来的其他带BSV的植株叶片和吸芽的总DNA进行PCR扩增,其结果均表现为比较稳定.