奈替米星发酵放大工艺研究

考察了奈替米星摇瓶发酵代谢特征,研究了磷酸盐和甲硫氨酸对菌丝生长和发酵单位的促进与提高作用。进而,以相同单位体积搅拌功率为基准放大,使１５ｔ发酵罐奈替木星发酵过程接近摇瓶水平。     

用放大纸代替胶片放大低倍化石薄片照片的方法

化石照片是鉴定或研究古生物最重要的资料之一,一张清晰、逼真的化石照片所起的作用不亚于精采的文字描述。因此,化石照片质量的好坏与研究成果的质量有一定的直接关系。以往,习惯用胶片拍摄低倍化石薄片。由于胶片的感光度比放大纸高,所需的曝光时间很短,在拍摄时难以对薄片厚薄不均匀的部分进行遮挡,在一定程度上,影响照片的质量。     

重组flap核酸内切酶1的表达及活性测定方法的建立

Flap核酸内切酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)是一种能催化核酸侵入反应的核酸内切酶,可应用于信号放大检测方法,但该酶详细的表达纯化工艺尚无报道,并且活性难以准确测定,限制了其应用。通过合成嗜热古球菌Archaeoglobus fulgidus来源的FEN1基因序列,构建了p ET24a(+)-FEN1-His重组质粒,并通过优化表达条件,得到了FEN1最优表达条件为:37℃、200 r/min振荡培养8 h后,加入诱导剂IPTG至终浓度为0.05 mmol/L,再于37℃、200 r/min诱导表达11 h,最终经镍亲和层析成功纯化得到了分子量约为38 k Da的重组FEN1。同时建立了基于荧光标记探针的FEN1活性测定方法,准确测定了重组FEN1的活性,为建立基于该酶的核酸检测方法提供了可靠的酶活力依据。最终将重组FEN1用于实时荧光PCR偶联高特异核酸侵入信号扩增法检测了乙醛脱氢酶2基因(aldh2)的基因型,得到了准确的分型结果,表明重组FEN1能用于基因多态性的分型检测中,为发展基于核酸侵入反应的核酸检测方法提供了可靠的工具酶。     

胃镜对咽喉部恶性病变诊断的临床应用价值

目的:探讨胃镜在对于咽喉部恶性疾病诊断的临床应用价值。方法:对2013年11月至2014年9月因声音嘶哑或咽部异物感或吞咽困难为主诉就诊的患者,给予电子喉镜或间接喉镜检查,以在喉镜下发现咽喉部肿物或喉镜下发现黏膜异常增生不能明确判定病灶性质的12例患者为研究对象。继而给予窄带成像(Narrow-band imaging,NBI)及放大胃镜检查,对病灶进行性质及病变范围的判定。病理结果作为金标准,比较喉镜及胃镜两种方式对咽喉恶性病灶的正确诊断率。结果:12例患者中共发现15处病灶,其中炎性反应5处,单纯性鳞状上皮增生3处,鳞状细胞癌6处,神经纤维瘤1处。喉镜对病灶的正确诊断率是40.0%(6/15),NBI放大胃镜对病灶的正确诊断率是93.3%(14/15),两者差异有统计学意义(x~2=9.60,P=0.005)。结论:NBI放大胃镜对咽喉部肿瘤诊断正确率高于普通喉镜,充分证明了胃镜在咽喉部恶性疾病的诊断方面的临床价值。在行胃镜检查时,同时对咽喉部进行仔细观察检查是十分必要的。     

关于图、表的要求

图要具有自明性,应精选、精制,其内容不可与文字、表格重复。图中的量、单位、符号、缩写词和文字等须与正文一致。病理组织照片,应在文题后的括号内注明染色方法和放大倍数,必要时应附有表示目的物尺寸大小的标度。表一般采用三线式,应力求简洁,主谓合理。表须置于文中相应处,图可附另页。图表的题     

激光显微切割分选少量胃癌细胞中PSCA基因的SNP分析

随着基因组关联分析方法的应用,越来越多与胃癌相关的易感基因被发现．易感基因的多态性检测已逐步进入胃癌临床诊断和研究．然而,利用少量胃粘膜细胞开展单核苷酸多态性（SNP）分析对胃癌进行早期诊断常遇下述困难,一是少量胃癌细胞混杂在多种细胞中,异常信号常易被淹没,二是细胞量极少,因此获得的基因组DNA量微,进行多位点或全基因组分析存在困难. 本文利用激光显微切割技术分选少量胃癌细胞,结合全基因组放大技术,进行胃癌相关的前列腺干细胞抗原基因(PSCA)的SNP分析．通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和克隆测序方法分析,在分选的胃癌细胞中检测到PSCA的rs2976392位点胃癌相关的“A”等位与rs2294008位点胃癌相关的“T”等位．研究结果表明,所采用的全基因组放大方法保真性高,经过分选的胃癌细胞中SNP位点的检测灵敏度和可靠性大为提高．所建立的少量细胞基因多位点检测方法将同样应用于其它肿瘤和组织的少量细胞研究中,全基因组放大产物也可进行高通量的基因芯片和第二代测序研究．     

A glucocorticoid amplifies IL-2-induced selective expansion of CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ regulatory T cells in vivo and suppresses graft-versus-host disease after allogeneic lymphocyte transplantation

Regulatory T （Treg） cells are a subpopulation of T cells that not only prevent autoimmunity, but also control a wide range of T cell-dependent immune responses. Glucocorticoid treatment （dexamethasone, or Dex） has been reported to amplify IL-2-mediated selective in vivo expansion of Treg cells. We simultaneously administered Dex and IL-2 to the donor in a murine allogeneic lymphocyte transplantation model to expand functional suppressive CD4＋CD25＋FOXP3＋ T cells in the graft and to raise the regulatory T cell/effector T cell （Treg/ Teff） ratio to prevent graft-versus-host disease （GVHD）. After combined treatment of the donor with Dex （5 mg/kg/day） and IL-2 （300,000 IU/mouse/day） for 3 days, grafts were subjected to flow cytometric analysis, and transplantation was carried out from male C57BL/6 mice to female BALB/c mice aged 8-12 weeks. Results showed that short-term simultaneous administration of Dex and IL-2 markedly expanded functional suppressive CD4＋CD25＋FOXP3＋ T cells in the murine spleen. In this murine allogeneic transplantation model, the grafts from donors with Dex and IL-2 pre-treatment led to a longer survival time for the recipients than for the control group （median survival time 〉 60 day vs. 12 day, P = 0.0002）. The ratio of Treg/Teff also increased remarkably （0.43 ±0.15 vs. 0.14 ± 0.01, P = 0.01）. This study demonstrated that co-stimulation with Dex and IL-2 selectively expanded functional CD4＋CD25＋FOXP3＋ T cells in vivo, and that grafts from donors pre-treated with Dex and IL-2 led to longer survival time and greater suppression of GVHD after allogeneic transplantation. Thus, GVHD can be suppressed by the specific expansion of regulatory T cells with Dex and IL-2 in graft donors.     

光耦功率放大技术在CT超低剂量扫描的研究

目的将全新的光电耦合高电压强电流放大处理技术用于CT机的前置放大处理中,隔离噪声和高电压大电流放大图像信号,实现超低剂量扫描,高清晰成像。方法将光电耦合放大器制作成射线剂量仪,并用CT机等超低剂量120KV、3-6mA…对其曝光,并与标准射线剂量仪校准,使其输出值不仅为射线剂量值,更能显示为高电压和大电流的优质图像信噪比。结果超小电流扫描经探测和光耦放大后最大值为87.5V和0.96A,而噪声电压为0.13μV、电流仅为0.02μA,给超低剂量扫描和传输处理时的功耗及高电压的宽动态范围显示留了很大空间。结论 CT超低剂量扫描时光耦放大器可在源头彻底隔离各种噪声并超高倍放大、高电压大电流输出图像信号,可保证高清晰高分辨率成像。     

关于图、表的要求

图要具有自明性,应精选、精制,其内容不可与文字、表格重复。图中的量、单位、符号、缩写词和文字等须与正文一致。病理组织照片,应在文题后的括号内注明染色方法和放大倍数,必要时应附有表示目的物尺寸大小的标度。表一般采用三线式,应力求简洁,主谓合理。表须置于文中相应处,图可附另页。     

Metal concentrations of insects associated with the South African Ni hyperaccumulator Berkheya coddii （Asteraceae）

The high levels of some metals in metal hyperaccumulator plants may be transferred to insect associates. We surveyed insects collected from the South African Ni hyperaccumulator Berkheya coddii to document whole-body metal concentrations （Co, Cr, Cu, Mg, Mn, Ni, Pb, Zn）. We also documented the concentrations of these metals in leaves, stems and inflorescences, finding extremely elevated levels of Ni （4 700-16 000μg/g） and high values （5-34μg/g） for Co, Cr, and Pb. Of 26 insect morphotypes collected from B. coddii, seven heteropterans, one coleopteran, and one orthopteran contained relatively high concentrations of Ni （〉 500μg/g）. The large number of high-Ni heteropterans adds to discoveries of others （from California USA and New Caledonia） and suggests that members of this insect order may be particularly Ni tolerant. Nymphs of the orthopteran （Stenoscepa） contained 3 500 μg Ni/g, the greatest Ni concentration yet reported for an insect. We also found two beetles with elevated levels of Mg （〉 2 800 μg/g）, one beetle with elevated Cu （〉 70 μg/g） and one heteropteran with an elevated level of Mn （〉 200 μg/g）. Our results show that insects feeding on a Ni hyperaccumulator can mobilize Ni into food webs, although we found no evidence of Ni biomagnification in either herbivore or carnivore insect taxa. We also conclude that some insects associated with hyperaccumulators can contain Ni levels that are high enough to be toxic to vertebrates.