染色体分析法（chromosome analysis）

人们已经知道染色体的变化与癌症等疾病相关。作为一种视觉检测方法，FISH法受到人们的关注。将正常细胞和痛细胞的染色体进行比较的CGH法也在开发当中。本讲由东京医科齿科大学的稻泽让治教授进行讲解。[编者按]     

血清APOC1、LDH及炎性感染指标在难治性支原体肺炎患儿中的表达水平及其与肺通气功能、预后效果的相关性分析

摘要 目的：分析血清载脂蛋白C1（APOC1）、乳酸脱氢酶（LDH）及炎性感染指标在难治性支原体肺炎患儿中的表达水平及其与肺通气功能、预后效果的相关性。方法：选择我院自2019年1月至2022年12月接诊的130例难治性支原体肺炎患儿作为观察组，另选同期在我院体检且结果正常的儿童作为对照组。检测两组入选者血清APOC1、LDH及炎性感染指标[C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）]表达水平、肺通气功能指标[用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV₁）、呼气峰流速（PEF）]；观察组患儿均严格按照《儿童社区获得性肺炎诊疗规范（2019年版）》接受治疗，通过ROC曲线下面积（AUC）评价血清APOC1、LDH及炎性感染指标对难治性支原体肺炎患儿预后不良的预测效能。结果：观察组血清APOC1、LDH、CRP、IL-6表达水平均高于对照组（P＜0.05）；在观察组患儿中，重症组血清APOC1、LDH、CRP、IL-6表达水平均高于轻症组（P＜0.05）；经Pearson相关性分析，难治性支原体肺炎患儿血清APOC1、LDH、CRP、IL-6表达水平均与FVC、FEV1、PEF呈负相关（P＜0.05）；经多因素Logistic回归分析，难治性支原体肺炎患儿血清APOC1、LDH、CRP、IL-6均是其预后不良的独立预测因素（P＜0.05）；经ROC曲线分析，难治性支原体肺炎患儿血清APOC1、LDH、CRP联合IL-6预测其预后不良的AUC为0.930。结论：血清APOC1、LDH及炎性感染指标在难治性支原体肺炎患儿中的表达水平明显升高，与其肺通气功能密切相关，其中APOC1、LDH、CRP联合IL-6预测预后不良的效能较好，值得进一步研究应用。     

鳗弧菌毒力相关基因的研究进展

鳗弧菌是引起多种海水鱼类出血性败血症的病原菌。其致病机理与各个毒力基因的协同作用密切相关。文中综述了鳗弧菌的主要毒力基因,包括编码外毒素、粘附因子、侵袭因子、细胞表面成分以及铁吸收系统的基因和部分检测方法。     

水体中诺瓦克病毒RT-PCR检测研究

诺瓦克病毒是公认的食源性或水源性非细菌性胃肠炎的主要致病因子之一。建立诺瓦克病毒的RT-PCR检测方法,验证其特异性及灵敏度,并在实验室人工污染水样,进行模拟水样的检测,验证RT-PCR检测方法的实用性。所用引物为RNA多聚酶区的JV12/JV13,多次反复实验,均可产生327bp预期大小的特异条带,并通过杂交进一步证实了其特异性和正确性;在临床粪样中,可达到的最高检测限为50pg/mL。在共42份模拟样品的检测中,经过播毒、富集和浓缩,38份均可检出诺瓦克病毒。其中4份池塘水未检出。在模拟水样中的检测灵敏度为200pg/mL。实验中所建立的试验条件和体系可用于实际水样中诺瓦克病毒的筛选,对水质控制起到了很好的监控作用。     

PCR技术检测食源性致病菌的研究进展

食源性致病菌的检测技术是食源性疾病预防与控制的关键环节。PCR是近年来广泛应用于食源性致病菌快速检测的方法之一。在食源性致病菌中,用于PCR检测的靶基因包括各种毒力基因、酶基因及特异性鉴别基因。这些靶基因的发现推动了食源性致病菌PCR快速检测的发展。     

分子信标-实时 PCR法快速检测双歧杆菌的研究

为建立双歧制品中双歧杆菌快速、敏感、特异的检测方法,根据双歧杆菌16SrRNA/16SrDNA基因设计合成了双歧杆菌属特异性引物和分子信标探针,建立了快速检测双歧杆菌的分子信标-实时PCR检测方法,并对反应条件进行优化。检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%;特异性强,扩增曲线呈现明显的S型,无非特异性扩增;灵敏度高,是普通PCR的100倍,对纯双歧杆菌DNA的检出限为5.7fg/PCR反应体系,纯双歧杆菌菌液的检出限为2×103CFU/mL;线形范围宽,起始模板数在2×108CFU/mL～2×104CFU/mL之间具有良好的线性关系,相关系数大于97%。该方法具有灵敏、特异、简便和快速的特点,可用于对双歧杆菌原位菌数的定量检测。     

液滴检测禽流感

也许存不久的将来．禽流感的检测将非常容易。JuergenPipper和同事发明了一种廉价、快速又有效的液滴检测方法，这种方法能够在30min的时间内从～份鼻咽喉抹检样品中直接检测出禽流感病毒H5N1。新方法还可应用于SARS、艾滋病和乙肝等疾病病毒的检测。     

一种巴西小绿蛙分泌物可治疟疾

巴曲一所大学的研究人员最近发现，一种雨蛙科巴西小绿蛙的皮肤分泌物中所含的成分，可能具有治疗疟疾的功效据当地媒体8月29日报道，巴西利亚大学的研究人员从2001年开始对这种小绿蛙的分泌物进行研究，日前已从中提取出6种蛋白质。检测结果显示，这些蛋白质对疟疾、利什曼病和其他一些病症具有治疗作用。[第一段]     

应用激光显微切割技术检测单个结肠细胞的基因表达

目的：探讨检测单个结肠细胞的基因表达的方法。方法：应用激光显微切割技术(1aser micmdissection)从冰冻切片上将单个结肠细胞切下,提取总RNA,将RNA逆转录成cDNA,采用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT—PCR)检测mRNA的表达。结果：在显微镜下用紫外激光显微切割机,将单个结肠细胞成功切下,提取RNA后,逆转录成cDNA,经过巢式RT—PCR扩增后,扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见。结论：联合应用激光显微切割和巢式RT—PCR可以检测单个结肠细胞的基因表达。