L-脯氨酸羟基化酶的提纯及活性研究

目的,以猪肺为原料,提取能把游离的L-脯氨酸羟化脯氨酸的羟基化酶。方法：把新鲜猪肺在提取液中低温高速匀浆,然后用4000r/min离心分离20min,取上清液进一步用8000r/min高速离心后,分别用盐析和有机溶剂的方法提取羟基化酶;结果;不同的方法都得到棕色的固体。经电泳测定该固体纯度高,溶于水中后能把游离的L-脯氨酸羟化为L-羟脯氨酸。测定其分子量约为66.000;等电点约为4。结论：所采用的提取工艺流程具有简单,效率高和实用的特点,且猪肺便宜,易得,适合较大规模的制备。     

基因工程猪生长激素的分离提纯及变复性技术的研究

生长激素 (Ｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ ;Ｓｏｍａｔｏｔｒｏｐｉｎ)调节动物的生长及其体内多种代谢过程。文献报道使用猪生长激素 (ＰＧＨ)可显著加快猪生长速度 ,提高胴体瘦肉率和饲料报酬[1 ] 。因为ＰＧＨ潜在的巨大经济价值 ,国内外一些科研机构都研究采用基因工程的方法实现产业化生产。这些研究几乎都是采用原核表达系统 ,产物都是形成包含体[2 ,3] 。但在包含体的分离提取及变复性的方法上差别极大。 1987年ＫｅｉｔｈＥ .Ｌａｎｇｌｅｙ在做蛋白复性时创新性地采用了包含体蛋白在高浓度的变性剂溶液中直接氧化复性的方法 ,此方法…     

芸薹链格孢致病毒素分析Ⅰ.：腐败菌素B的分离提纯和结构鉴定

芸薹链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｂｒａｓｓｉｃａｅ）在ＰＤ液体培养其中黑暗培养２０ｄ,过滤获得培养滤液,经乙酸乙酯萃取,４５℃减压浓缩得ＡＢ－粗毒素。ＡＢ－粗毒素经ＨＰＬＣ分析,在λ＝ｎｍ波长下具有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ４个明显的吸收峰。组分Ⅲ的红外吸收光谱、ＦＡＢ／ＭＡＳＳ和＾１Ｈ－ＮＭＲ与已报道的腐败菌素Ｂ基本一致,由此确定组分Ⅲ为腐败菌素Ｂ。试验发现,芸薹链格孢的培养滤液,ＡＢ－粗毒素和毒素组分Ⅲ     

酶法制备低聚木糖中木二糖的提纯与色谱鉴定

半纤维素经木聚糖酶水解得到混合的低聚木糖,用葡聚糖凝胶柱SephadexG-10层析分离后,出现四个组分峰,经高效液相色谱分析鉴定,其中3号峰为木二糖纯组分峰.结果表明:利用φ2.5 cm×120 cm凝胶柱,以蒸馏水为流动相,流速为10ml/h,在室温下,可以分离出高纯度的木二糖.     

蚯蚓超氧化物歧化酶理化性质的研究

从蚯蚓中提取超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase简称SOD),经硫酸铵分级沉淀分离、透析除盐后测定SOD活性得知:50~70%饱和度硫酸铵沉淀的SOD活性最高,比活性也最高;蚯蚓体内此酶在35~40℃之间表现出最高活性;最适pH值为7.8~8.2;提取蚯蚓SOD的最适提取液体积应为蚯蚓鲜重的4倍(v/w)。     

大孔树脂吸附法提纯苦楝素的研究

研究了大孔树脂吸附法从苦楝树皮的提取液中提纯苦楝素的工艺条件及参数,并筛选出较为理想的大孔吸附树脂。研究结果表明,S-8型吸附树脂的静态饱和吸附量明显大于AB-8型和NKA-9型。该树脂吸附提纯苦楝素的优化吸附条件为吸附温度40℃,溶液pH值8．0,上柱液质量浓度9．127mg／mL,溶液流速2BV／h;优化的解吸条件为：洗脱剂为70％乙醇-水溶液,溶液流速1BV／h,洗脱剂用量为8倍量树脂体积。在优化条件下,可以得到含量达75．2％的苦楝素提取物,表明S-8树脂对苦楝素有良好的吸附选择性。     

水稻条纹病毒病害特异蛋白的提纯及血清学特性

应用差别ｐ Ｈ 值沉淀蛋白质的原理,建立了水稻条纹病毒病特异蛋白（ Ｓ Ｐ） 的两种提纯方法。这两种方法都可以从病叶中提纯到大量的 Ｓ Ｐ,其粗提纯量分别为０ ．８ 和２ ．０ ｍｇ／ｇ 病叶。通过 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 分离后得到了精提纯的蛋白,其分子量为２０ ．１ ｋ Ｄａ 。将粗提纯和精提纯的 Ｓ Ｐ 分别免疫兔子,制备出效价为５１ ２００ 和６ ４００ 的抗血清。将效价为６ ４００ 的高度特异性的抗血清用于研究 Ｒ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 与 Ｒ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ 及同属的水稻草状矮化病毒（ Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ） Ｓ Ｐ、 Ｃ Ｐ 之间的血清学关系,结果表明, Ｒ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 的抗血清与 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ、 Ｒ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ 之间无反应,但可与 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 微弱反应;而 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ、 Ｃ Ｐ 及 Ｒ Ｓ Ｖ Ｃ Ｐ 的抗血清与 Ｒ Ｓ Ｖ Ｓ Ｐ 之间都无血清学反应。结果证实了 Ｒ Ｓ Ｖ 和 Ｒ Ｇ Ｓ Ｖ 之间存在着进化上的亲缘关系     

一种类SOD物质的基本性质与结构研究

玫瑰果（Ｒｏｓａｒｕｇｏｓａｖａｒ．ｃｈａｍｉｓｏｎｉａｎａ）果实中有一种具有高ＳＯＤ活性的成分,系统研究表明,这是一个小肽,定名为类ＳＯＤ物质。用有机溶剂分级、聚几内酰胺、ＤＥＡＥ１１、Ｚｅｒｏｌｉｔ２２５柱分离纯化,提纯物经紫外光谱、圆二色谱分析、氨基酸分析、邻菲咯啉定铁、ＤＮＳＣｌ法检测末端氨基酸等实验,证实类ＳＯＤ物质的等电点为５．２,每分子肽含一个Ｆｅ原子,有７０个氨基酸左右,分子量约为７０００,可能是一种结合多肽,末端氨基酸被封闭,富含ｃｙｓ,呈无规卷曲状态,这与其很高的温度稳定性及ｐＨ稳定性是一致的。