可溶性CD40配体的表达及其对树突状细胞和恶性B？…

ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）是ＴＮＦ超家族成员,表达于人活化的ＣＤ４＾＋Ｔ细胞表面,与存在于Ｂ细胞、抗原递呈细胞表面的相就受体ＣＤ４０分子相互作用,促发并调节机体的体液免疫和细胞免疫应答。用ＰＣＲ法从ＣＤ４０Ｌ全长ｃＤＮＡ质粒中扩增ＣＤ４０Ｌ胞外段编码ｃＤＮＡ,即可溶性ＣＤ４０Ｌ（ｓＣＤ４０Ｌ）编码ｃＤＮＡ,并克隆入ｐＳＫ质粒;ｃＤＮＡ序列经测序证实后与ｐＰＩＣＺαＡ质粒重组构建成ｐＰＩＣＺαＡ－ｓ     

中国海南岛人恶性疟原虫基因文库的构建及环子孢子蛋白基因的筛选

本文介绍了以噬菌体λEMBL3为载体的中国海南岛人恶性疟原虫FCC1/HN分离株基因文库的构建。所得重组体的数目为3.3×10~4pfu,其相当于构建完整基因库理论计算值的6倍。作者以人工合成的巴西株恶性疟环子孢子蛋白基因重复序列区的24-mer寡核苷酸(AATGCAAACCCAAATGCAAACCCA)作探针,进行噬斑原位杂交,筛得三株阳性克隆。对其一重组体进行酶谱分析和Southern印迹实验,环子孢子蛋白基因被定位于HindⅢ和BamHI联合降解后所得的的4kb大小的片段上。     

恶性胆道梗阻患者所行经皮穿刺肝内胆管引流术中成功置入金属支架的术前影响因素分析

目的:探讨恶性胆道梗阻患者行PTBD(Percutaneous Transhepatic Biliary Drainage)术中金属支架置入成功率的影响因素。方法:回顾性搜集2010年10月-2017年1月上海市第一人民医院收治的因患有近端恶性胆道梗阻行PTBD术患者的相关临床资料。比较不同原发病因患者支架置入情况。根据患者支架置入是否成功将其分为支架组和非支架组,比较患者的一般临床特征。结果:胰腺癌、胃癌和胆囊癌为本研究中数量上前3位的肿瘤,将以上3组分别按照支架置入数行x~2检验,其中胰腺癌(n=18,支架=6)和胃癌(n=14,支架=11)有统计学意义。将50例患者分为支架组(n=28)和非支架组(n=22),组间比较差异有统计学意义的因素包括:白细胞计数(支架组=6.40±3.40×10~9/L,非支架组=10.74±6.41×10~9/L),中性粒细胞计数(支架组=4.90±3.06×10~9/L,非支架组=8.92±6.25×10~9/L),胆道感染(支架组=9,非支架组=15)。进一步将该50例患者分为6组:胰腺癌-胆道感染组、胃癌-胆道感染组、其他肿瘤-胆道感染组、胰腺癌+胆道感染组、胃癌+胆道感染组、其他肿瘤+胆道感染组。将以上6组分别按照支架置入数行x~2检验,胰腺癌+胆道感染组(n=11,支架=1,P=0.001)有统计学意义。结论:PTBD术对于恶性胆道梗阻是一种有效的姑息治疗手段。胆道感染是PTBD术中支架置入成功的不利因素,胰腺癌合并胆道感染会显著降低PTBD术中支架置入成功率。     

恶性疟原虫杂合多肽抗原融合基因的克隆和表达

合成了５对寡核苷酸片段,分别连接在两种恶性疟原虫杂合多肽（４５肽和５８肽）抗原基因片段（ＨＰＦＧＡ和ＨＰＦＧＢ）的头部和尾部,将这两种片段分别与霍乱毒素Ｂ亚单位（ＣＴ－Ｂ）基因末端融合。两种杂合多肽抗原分别含有数个红内期和红外期有代表性的、并能被Ｔ或Ｂ淋巴细胞识别的保护性抗原表位,ＣＴ－Ｂ基因前端具有促使分泌的信号肽序列。将这两种融合基因的不同重组质粒分别转化大肠杆菌,对转化菌的培养上清检测表明融合蛋白被分泌性表达,既具有恶性疟原虫和ＣＴ－Ｂ抗原性,又保持了ＣＴ－Ｂ与其受体神经节苷脂ＣＭ１结合的生物学活性。     

Oltipraz对细胞恶性转化抑制作用的研究

选用人胚肺为实验材料,研究了十字花科蔬菜提取物ｏｌｔｉｐｒａｚ对人肺癌病变早期细胞恶性转化的阻断作用。将阻断按时间分为ｏｌｔｉｐｒａｚ在ＣＳＣ作用前、后和同时三组,并设ＣＳＣ、ｏｌｔｉｐｒａｚ、ＤＭＳＯ三组对照,将上述６组体外培养处理的人胚肺组织,提取ＤＮＡ转染Ｒａｔ－１细胞,用低血清筛选、作软琼脂培养、裸鼠接种鉴定,结果在ＣＳＣ、ＣＳＣ→ｏｌｔｉｐｒａｚ两组获得恶性转化细胞,ＣＳＣ组恶性度更大。提示ｏｌｔｉｐｒａｚ对ＣＳＣ所致的细胞恶性转化具有一定阻断作用,ｏｌｔｉｐｒａｚ在ＣＳＣ运用前或同时运用效果较好;进一步推断ｏｌｔｉｐｒａｚ对人肺癌变早期具有一定防治作用。     

恶性疟原虫多抗原表位基因的融合与表达

本研究以霍乱毒素B亚基(CT-B)基因为载体,构建了含不同抗原表位的恶性疟原虫的融合基因CTB/ATE和CTB/AWTE。前者除含有恶性疟原虫裂殖子表面主要抗原表位杂合多肽基因SPf66外,还含有很强的T辅助细胞表位CST3和Tc细胞表位;后者在此基础上将我国发现的B细胞表位NKNDD基因经8次串联后融合其中、两种形式的融合基因经测序正确后转入大肠杆菌TK1046中,产量分别为10mg/L及5mg/L。表达产物CTB/AWTE经亲和层析纯化的双抗夹心ELISA测定表明,该融合蛋白在保留了与抗CTB抗体结合的同时,与抗NKNDD单抗的结合效价达1∶8000。     

恶性疟原虫无性期疫苗研究及进展

疟疾是威胁人类健康和生命的主要寄生虫疾病之一,近年来在世界上尤其是落后及发展中国家有卷土重来之势。恶性疟原虫是这类寄生虫中危害最大的病原体,它感染力强,症状严重,初次感染者致死率高,是医务工作者和疫苗人员的主要征服目标。世界各地的科技工作者为此付出了不懈的努力,本文拟对近几年来恶性疟原虫疫苗的研究作一综述。     

恶性疟原虫SURFIN4.1蛋白氨基端在介导蛋白转运过程中作用机制的研究

明确SURFIN_(4.1)蛋白氨基(N)端在转运过程中的作用。通过恶性疟原虫转染筛选表达SURFIN_(4.1)~(2Myc-N-T-Cyt)重组蛋白的MS822转染株;通过IFA和Western Blot方法对比分析N端Myc标签对SURFIN_(4.1)重组蛋白定位和可溶性影响;通过免疫共沉淀(Co-IP)和质谱分析(LC-MS/MS)方法,明确SURFIN_(4.1)蛋白N端转运过程中的相互作用蛋白。成功筛选并获得表达SURFIN_(4.1)~(2Myc-N-T-Cyt)重组蛋白的恶性疟原虫MS822转染株;SURFIN_(4.1)~(2Myc-N-T-Cyt)与SURFIN_(4.1)~(N-T-Cyt)的定位和可溶性无明显差异。Co-IP和LC-MS/MS结果显示,SURFIN_(4.1)蛋白N端与茂氏点定位蛋白MAHRP1,PTEX复合体成员EXP2,棒状体蛋白RAP3,红细胞膜表面多种原虫蛋白及HSP60相互作用。结果表明,SURFIN_(4.1)蛋白N端在转运过程中不水解,且N端Myc标签不影响蛋白可溶性和定位;SURFIN_(4.1)蛋白N端与多种恶性疟致病性相关蛋白相互作用,提示SURFIN_(4.1)蛋白作为红内期疫苗候选抗原研制靶位的可能性。     

腹腔灌注化疗联合内生场热疗治疗胰腺癌恶性腹水的疗效

目的:探讨腹腔灌注化疗联合内生场热疗治疗胰腺癌恶性腹水的临床疗效。方法:将50例晚期胰腺癌合并恶性腹水患者随机分为实验组与对照组,每组25例。实验组行腹腔灌注化疗联合内生场热疗治疗,对照组单纯行腹腔灌注化疗。比较两组患者腹水控制疗效、生活质量改善、疼痛程度和不良反应情况。结果:实验组患者治疗后腹水控制总有效率为68.0%,明显高于对照组的36.0%(P0.05);实验组生活质量改善率达60.0%,远高于对照组的40.0%(P0.05);实验组患者疼痛水平明显好于对照组(P0.05);两组患者不良反应发生率无明显差异(P0.05)。结论:腹腔灌注化疗联合内生场热疗治疗胰腺癌恶性腹水效果显著,能明显改善患者生活质量、缓解疼痛,值得临床推广。     

CVTP联合化疗方案对初治和复治难治恶性淋巴瘤的临床疗效研究

目的:比较环磷酰胺-西艾克-吡柔比星-泼尼松(Cyclophosphamidum-Vindesine-Tetrahydropyranyl-Prednisone,CVTP)联合化疗方案对初治和复治、难治恶性淋巴瘤的临床疗效。方法:按照化疗史将102例恶性淋巴瘤患者分为初治组59例和复治难治组43例,两组患者均给予CVTP联合化疗方案治疗,比较两组化疗效果、外周血淋巴细胞亚群、毒副反应差别。结果:初治组患者部分缓解(partial remission,PR)率和总有效率(overall response rate,ORR)均显著高于对复治难治组,差异具有统计学意义(P0.05);初治组患者治疗后CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~++、NK细胞含量均显著高于复治难治组,CD8~+水平显著低于复治难治组,差异具有统计学意义(P0.05);初治组患者化疗期间白细胞下降、血红蛋白下降、血小板减少、恶心呕吐发生率均显著低于复治难治组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:CVTP联合化疗方案治疗初治恶性淋巴瘤近期疗效优于复治难治患者。