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902.
微载体培养技术的研究进展 总被引:4,自引:0,他引:4
本文对近年来广泛用于动物细胞培养的微载体技术的特点,培养过程的优化作了详细的评述。 相似文献
903.
目的:探讨半夏多糖对希罗达干预下抑制小鼠结肠腺癌的作用机制.方法:观察半夏多糖对希罗达干预下小鼠结肠腺癌的生长状态,应用流式细胞术分析瘤细胞表面MHC-Ⅱ的表达.结果:流式细胞仪检测半夏多糖对希罗达干预下可提高CD4/CD8的比值,并能增强小鼠结肠腺癌细胞表面MHC-Ⅱ表达.结论:半夏多糖可提高希罗达的抑瘤作用,其机理可能与半夏多糖提高小鼠结肠腺癌细胞表面MHC-Ⅱ表达,增强荷瘤小鼠细胞免疫的作用有关. 相似文献
904.
目的:研究不同方法检测血清HBVDNA水平的比较.方法:采用151份标本分别采用COBAS Amplicor、实时定量PCR(LightCycler及Mx3000p)方法进行平行检测.结果:①检测灵敏度:COBAS Amplicor方法灵敏度高于实时PCR方法(P=0.005、0.014),而Mx3000p灵敏度高于LightCycler方法(P=0.042).②相关性:实时定量PCR(LightCycler及Mx3000p)与COBAS Amplicor方法所测HBV DNA结果均呈线性相关(r=0.842,P<0.01;r=0.946,P<0.01).结论:实时定量PCR方法是较为经济且准确的HBV DNA检测方法,而Mx3000p在准确性和灵敏度上可能优于LightCycler方法. 相似文献
905.
基因的表达和功能研究作为当前分子生物学领域的热点,其研究方法也在不断发展,本文对发展过程中出现的应用较为广泛和近年来新发展起来的几种技术作一简要的概述。 相似文献
906.
Cheng Zhan Yongxing Zhang Jun Ma Lin Wang Wei Jiang Yu Shi Qun Wang 《Acta biochimica et biophysica Sinica》2014,(4):330-337
Although the accuracy of quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) is highly dependent on the reliable reference genes, many commonly used reference genes are not stably expressed and as such are not suitable for quantification and normalization of qRT-PCR data. The aim of this study was to identify novel reliable reference genes in lung squamous-cell carcinoma. We used RNA sequencing (RNA-Seq) to survey the whole genome expression in 5 lung normal samples and 44 lung squamous-cell carcinoma samples. We evaluated the expression proffies of 15 commonly used reference genes and identified five additional candidate reference genes. To validate the RNA-Seq dataset, we used qRT-PCR to verify the expression levels of these 20 genes in a separate set of 100 pairs of normal lung tissue and lung squamous-cell carcinoma samples, and then analyzed these results using geNorm and NormFinder. With respect to 14 of the 15 common reference genes (B2M, GAPDH, GUSB, HMBS, HPRT1, IP08, PGK1, POLR2A, PPIA, RPLPO, TBP, TFRC, UBC, and YWHAZ), the expression levels were either too low to be easily detected, or exhibited a high degree of variability either between lung normal and squamous-cell carcinoma samples, or even among samples of the same tissue type. In contrast, 1 of the 15 common reference genes (ACTB) and the 5 additional candidate reference genes (EEFIA1, FAU, RPS9, RPSll, and RPSI4) were stably and constitutively expressed at high levels in all the samples tested. ACTB, EEFIAI, FA U, RPS9, RPSl l, and RPS14 are ideal reference genes for qRT-PCR analysis of lung squamous-cell carcinoma, while 14 commonly used qRT-PCR reference genes are less appropriate in this context. 相似文献
907.
丙酮酸脱氢酶E1组分β亚基-1 (pyruvate dehydrogenase E1 component subunit beta-1,PDHB-1)基因是编码丙酮酸脱氢酶复合物E1酶β亚基的基因,在果实酸度积累过程中具有重要作用。为了探究苹果(Malus domestica L.) PDHB-1家族的进化特征及其在不同酸含量苹果中的表达情况,本研究利用NCBI、Pfam等数据库和Clustal X、MEGA、TBtools等软件进行生物信息学分析,通过结合可滴定酸含量测定与实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,q RT-PCR)分析,获得该家族基因在‘艾斯达’和‘成纪1号’2个不同酸含量的苹果中的表达情况。PDHB-1家族主要定位于叶绿体、细胞质和线粒体中,α-螺旋和不规则卷曲是该家族二级结构形成的主要因素。组织特异性表达谱显示大部分成员的表达量在果实中高于其他组织。q RT-PCR结果表明,大部分成员其表达量变化趋势与可滴定酸含量变化趋势一致,在果皮中,有14个成员的表达水平在酸含量较高的‘艾斯达’苹果中显著高于酸含量较低的‘成纪1号’,其中M... 相似文献
908.
【目的】荧光定量PCR法具有特异性高、灵敏度高等优点,在定量复杂环境中微生物数量方面得到广泛应用。本文采用荧光定量PCR方法对固态白酒发酵过程产土味素链霉菌进行定量分析并验证其准确性。【方法】通过优化大曲和酒醅中微生物基因组提取方法,并建立相应的大曲和酒醅两种基质条件下的荧光定量PCR标准曲线,并对方法的精度和准确度进行验证分析。采用荧光定量PCR方法对大曲和酒醅中产土味素链霉菌进行定量分析。【结果】结果表明大曲中产土味素链霉菌数量在105数量级,并且清茬曲中此类链霉菌数量最高。酒醅发酵起始阶段产土味素链霉菌数量在104数量级,而后随着发酵的不断进行,酒醅中此类链霉菌数量有所减少。【结论】荧光定量PCR方法能够对白酒固态发酵过程中产土味素链霉菌准确进行定量分析,对采用此方法定量其他微生物具有借鉴意义。 相似文献
909.
探讨多层螺旋CT(multi—slice spiral computed tomography,MSCT)灌注成像与肿瘤血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的相关性以评估兔VX2乳腺种植瘤抗血管生成治疗的疗效。将69R乳腺VX:瘤兔于肿瘤生长2周后随机分为对照组(生理盐水1、恩度组(Endostar)、cEF组[环磷酰胺(Cyclophosphamide C)、表阿霉素(EpirubicinE)和5-氟尿嘧啶(5.FluorouracilF)]、联合治疗CR(Endostar和CEF)。治疗2周后对瘤兔进行MSCT灌注扫描,获得血流量(bloodflow,BF)、血容量(bloodvolume,BV)、平均通过时间(meantransittime,MTT)及表面通透性(permeabilitysurface,PS)等灌注参数均值:随后取瘤组织进行免疫组化及Westernblot检测 VEGF蛋白表达情况。结果显示,对照组、CEF组、恩度组、联合治疗组BF、BV和Ps均与VEGF表达结果呈正相关(R对照组=0.896、0.680、0.765,RCEF组=0.877、0.876、0.852,R恩度组=0.804、0.924、0.888,R联合治疗组=0.780、0.735、0.744;P〈0.05),MTT均与VEGF表达结果呈负相关(R对照组=-0.591,RCEF组=0.678,R恩度组=0.793,R联合治疗组=-0.687;P〈0.05)。MSCT灌注参数与VEGF蛋白表达具有相关性,MSCT灌注参数可以反映肿瘤治疗后免疫组化与分子水平VEGF表达的变化,MSCT可以在体无创评价兔VX2乳腺种植瘤抗血管生成治疗的疗效。 相似文献
910.
荷花LEAFY基因的克隆及表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
LEAFY(LFY)基因是花分生组织形成的必需基因,在成花过程中发挥重要作用。本研究以荷花品种‘红霞满天’为材料,利用已经获得的荷花LFY基因片段,采用RT-PCR和RACE技术克隆得到荷花LFY基因cDNA序列,命名为NnLFY。NnLFY全长cDNA为1 494 bp,开放阅读框(ORF)为1 173 bp,编码390个氨基酸,预测其相对分子量为44 517.1 Da。与其他物种已知的LFY基因序列进行同源性对比分析并构建系统进化树,结果显示荷花LFY基因与甜瓜LFY基因的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明,LFY基因在荷花幼叶期、花蕾期、盛花期的根、茎、叶、花中均有表达,其中,花蕾期各器官的表达量较高。 相似文献