利用逆转录酶的聚合酶链式反应检测外周血中的肿瘤细胞

本文就RT－PCR技术检测外周血中肿瘤细胞的基本原理及其在黑色素瘤,肝癌,乳腺癌,结直肠癌,前列腺癌等检测中的应用加以综述。     

无CpG基序的短磷酸二酯寡核苷酸作免疫激活剂

以前发现细菌的DNA能作用于免疫效应细胞。据报道,这种免疫调节作用是因为存在有未甲基化的CpG二核苷酸,在二核苷酸的侧面分别毗邻两个5′嘌呤和两个3′嘧啶,合成的8～100个碱基的寡核苷酸至少含有这样一个CpG基序以刺激免疫系统。这些寡核苷     

人外周血树突状细胞亚型的形态学观察

Ｓ１００ 蛋白染色是鉴定树突状细胞（ＤＣ） 的一种重要而可靠的方法。本文采用Ｓ１００ 蛋白免疫细胞化学方法及电镜观察, 对人外周血树突状细胞的亚型进行研究。结果表明： 人血ＤＣ在形态学上分为两个亚型－ Ⅰ型中等淋巴细胞大小, 线粒体少, 核内异染色质多; Ⅱ型胞体较大, 线粒体丰富, 异染色质少     

结核丸联合含环丝氨酸化疗方案对耐多药肺结核患者肺功能和外周血Th1/Th17细胞免疫反应的影响

摘要 目的：探讨结核丸联合含环丝氨酸化疗方案对耐多药肺结核（MDR-TB）患者肺功能和外周血辅助性T细胞（Th）1/Th17细胞免疫反应的影响。方法：将我院于2018年5月~2020年3月期间收治的98例MDR-TB患者根据信封抽签法分为对照组（49例,含环丝氨酸化疗方案治疗）和观察组（49例,结核丸联合含环丝氨酸化疗方案治疗）。对比两组痰菌阴转率、病灶吸收率、空洞闭合率、肺功能指标、外周血Th1/Th17细胞免疫反应相关指标和不良反应发生率。结果：观察组的病灶吸收率、痰菌阴转率、空洞闭合率均高于对照组,不良反应总发生率显著低于对照组（P<0.05）。观察组治疗后最大呼气流量（PEF）、第1秒用力呼气容积（FEV₁）、用力肺活量（FVC）高于对照组同期（P<0.05）。观察组治疗后Th1、γ-干扰素（IFN-γ）高于对照组同期,Th17、白细胞介素（IL）-17低于对照组同期（P<0.05）。结论：含环丝氨酸化疗方案联合结核丸治疗MDR-TB,可有效改善患者的肺功能,调节外周血Th1/Th17细胞免疫反应。     

人结核病的免疫应答调节

肺结核患者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）经纯蛋白衍生物（ＰＰＤ）刺激后母细胞化能力下降,且ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ产生减少,循环Ｔ细胞和单核细胞可在原位被非特异性激活,结核患者的单核细胞经ＰＰＤ直接刺激后,可产生大量的细胞因子如转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）和ＩＬ－１０,这将抑制ＰＰＤ引起的母细胞化和细胞因子的表达。     

甲2巨球蛋白制剂对正常人外周血淋巴细胞周期的影响

采用外周血淋巴细胞姐妹染色单体差别法(SCE)检测技术,研究甲_2巨球蛋白制剂α_2M对人外周血淋巴细胞周期的影响,在人外周血淋巴细胞培养中加入α_2M制剂浓度在≤0.5mg/ml培养液时,第一次细胞周期(M_1)、第二次细胞周期(M_2)、第三次细胞周期(M_3)、细胞增殖速度指数(PRI)改变不大。在加入的α_2M制剂浓度(?)1.0 mg/ml培养液时,M_1百分数增加(r=0.977,P<0.001)、M_2百分数也随α_2M浓度递增而增高(r=0.956,P<0.001)而M_3百分数则随α_2M浓度递增而减少(r=-0.979,P<0.001)、细胞增殖速度指数则随α_2M浓度递增而减少(r=-0.983,P<0.01),表明在人外周血淋巴细胞离体培养时,当每毫升培养液中α_2M浓度等于或大于1mg时,细胞分裂周期延缓。讨论了它的意义和可能作用的环节。     

猴泡沫病毒（SFV）RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用

目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒（SFV）的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞（PBLs）,常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。     

人外周血淋巴细胞核心钟基因Clock和Bmal1的昼夜节律性表达

探讨自然光制下正常成年人外周血淋巴细胞钟基因Clock和Bmal1的昼夜节律性表达。用实时定量RT-PCR方法,测定不同昼夜时点(ZT)受试者外周血淋巴细胞总RNA中核心钟基因Clock和Bmal1的mRNA表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验分析是否存在昼夜节律。结果发现正常成年人外周血淋巴细胞钟基因Clock和Bmal1的mRNA表达呈昼夜节律性振荡(P0.05),Clock的峰时和谷时分别位于ZT13和ZT1,Bmal1的峰时和谷时分别位于ZT12和ZT24;两个基因在所检测的各个昼夜时点中表达水平均有明显差异(P0.05),Bmal1的表达水平较Clock降低;二者表达的峰值相位、振幅、峰时和谷时相一致(P0.05),但Bmal1转录的中值水平以及峰时mRNA水平和谷时mRNA水平降低(P0.05)。提示正常成年人外周血淋巴细胞钟基因Clock和Bmal1的表达存在同步化的昼夜节律性转录特征。     

家族性高胆固醇血症HDL-miRNAs调节血单核细胞功能机制

本研究通过生物信息学方法分析家族性高胆固醇血症患者外周血单核细胞差异表达基因、HDL载体差异表达miRNA及其生物学功能,研究差异HDL-miRNA与单核细胞差异基因的相关性,探讨HDL-miRNA调控外周血单核细胞功能机制,寻找动脉粥样硬化防治新靶点。运用R语言分析GEO数据库共享平台家族性高胆固醇血症外周血单核细胞基因及HDL-miRNA探针芯片得到差异基因及差异miRNA,利用miRwalk2. 0预测miRNA靶基因,并利用STRING进行蛋白互作分析,构建差异miRNA与差异基因之间的调控网络。运用GO及KEGG分析研究基因功能。利用GEO数据(GSE6054)筛选出834个差异表达基因,利用GEO数据(GSE25108)筛选出HDL上差异miRNA28个。交叉匹配得到由19个差异miRNA和56个差异基因组配对的74对miRNA-靶基因。GO富集分析56个差异基因主要富集于肾上腺素受体信号等分子功能。KEGG分析56个差异基因主要富集于造血谱系通路上。家族性高胆固醇血症差异HDL-miRNA与外周血单核细胞差异mRNA具有相关性,HDL-miRNA有通过调控血单核细胞功能的可能性,可能参与高胆固醇血症导致动脉粥样硬化过程。     

新型截短肠毒素C2突变株抑制肿瘤细胞生长

在恶性肿瘤的治疗中,肠毒素C2 (SEC2) 的临床应用由于其副作用而被严重限制。利用SEC2基因截短技术,获得保留T细胞刺激活力又不引发催吐效应的SEC2突变株,可有效解决这个问题。根据噻唑蓝比色法 (MTT) 分析结果,新型截短肠毒素C2突变株 (NSM) 可显著刺激T细胞增殖,并且可显著抑制人大肠癌细胞 (CX-1) 和人乳腺癌细胞 (MCF-7) 生长。NSM的T细胞刺激能力和抑瘤效果与SEC2相似。动物研究结果证明NSM不再引发呕吐效应,且可显著抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长。因此,这种可抑制肿瘤细胞生