猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用 |
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引用本文: | 栗景蕊,付瑞,李晓波,贺争鸣.猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用[J].中国实验动物学杂志,2010(1):46-51,I0003. |
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作者姓名: | 栗景蕊 付瑞 李晓波 贺争鸣 |
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作者单位: | 中国药品生物制品检定所,北京100050 |
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摘 要: | 目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞(PBLs),常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。
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关 键 词: | 猴泡沫病毒 逆转录-巢式PCR 外周血淋巴细胞 |
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