剪切应力环境下的内皮祖细胞对肝星状细胞增殖和生物功能的影响

目的：研究流体剪切应力条件下的内皮祖细胞（EPCs）对肝星状细胞（HSCs）增殖、粘附、迁移、凋亡等生物学功能以及成纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、胶原I （Col-I）、胶原III （Col-III）表达的影响。方法：将HSCs与EPCs分别接种于共培养小室的上层和下层,共培养24 h后,给EPCs细胞施加12 dyne/cm²剪切应力,持续24 h。消化细胞,采用CCK-8法检测HSCs的增殖;流式细胞术检测HSCs的凋亡率;细胞贴壁法检测HSCs的粘附功能;Boyden小室检测HSCs的迁移;荧光定量PCR法及Western blot分别检测HSCs的α-SMA、Col-I、Col-III mRNA和蛋白质的表达情况。结果：在剪切应力条件下,EPCs生态小境能明显抑制HSCs的增殖、粘附和迁移能力,促进HSCs凋亡,下调HSCs中Col-I、Col-III mRNA和蛋白质的表达。结论：在剪切应力条件下,EPCs生态小境对HSCs纤维化的发展具有一定抑制作用。     

共存甲烷短杆菌Methanobrevibacter thaueri F1提高梨囊鞭菌Piromyces sp. F1对硝呋烯腙的耐受性

【背景】硝呋烯腙能够抑制厌氧真菌。共存甲烷菌可以促进厌氧真菌的生长以及对木质纤维素的降解,然而关于共存甲烷菌对厌氧真菌抗逆性影响的研究较少。【目的】旨在研究甲烷菌共存对厌氧真菌耐受硝呋烯腙的影响。【方法】采用体外批次培养,以稻草为底物,添加不同浓度的硝呋烯腙(0、5、10、25 mg/L),分别接种厌氧真菌纯培养和厌氧真菌与甲烷菌共培养悬浮液,于39°C静置培养96 h。测定不同时间点的产气量和甲烷产量,结束后测定p H、干物质降解率(DMD)、中性洗涤纤维消失率(NDFD)、半纤维素消失率(ADSD)、酸性洗涤纤维消失率(ADFD)以及上清液中甲酸、乳酸和乙酸的浓度。【结果】添加5、10和25 mg/L硝呋烯腙皆显著降低了厌氧真菌纯培养的发酵活性(P0.05);添加5 mg/L硝呋烯腙没有显著降低厌氧真菌与甲烷菌共培养的发酵活性(P0.05),添加10和25 mg/L硝呋烯腙则显著降低了共培养发酵活性(P0.05);比较5、10 mg/L硝呋烯腙对纯培养和共培养发酵活性影响的结果表明,共培养发酵活性显著高于纯培养发酵活性(P0.05)。【结论】硝呋烯腙对厌氧真菌纯培养和厌氧真菌与甲烷菌共培养的抑制作用都存在剂量效应,在一定添加浓度范围内(25 mg/L),甲烷菌共存可以显著提高厌氧真菌对硝呋烯腙的耐受性。     

烟草花叶病毒外壳蛋白的基因导入和转化烟株的再生

用T-DNA区携有嵌合的烟草花叶病毒外壳蛋白基因和卡那霉素抗性基因(NPTⅡ)的土壤农杆菌株pACK403和pACK404与烟草品种SRl和斯佩特G-28单倍体无菌菌叶碟片进行共培养转化。转化后的叶碟片在含有头孢噻肟钠500毫克/升和卡那霉索300毫克/升的培养基上诱导芽,在含有头孢噻肟钠500毫克/升和卡那霉素100毫克/升的培养基上诱导生根。Nopaline测定,烟草花叶病毒外壳蛋白基因的表达检测、转化烟株对烟草花叶病毒侵染抗性的检测结果证明:用这种方法能可靠地将外源基因导入烟草,并能在转化烟株中表达。再生得到的转化烟株在烟草花叶病毒强感染情况下能延迟病症表现4—25天。     

嗅鞘细胞对神经干细胞分化的影响

目的:探索体外嗅鞘细胞对神经干细胞分化的影响.方法:体外培养、纯化及鉴定神经干细胞和嗅鞘细胞.实验组采用嗅鞘细胞和神经干细胞采用共培养液培养;对照组采用神经干细胞单独培养.观察嗅鞘细胞对神经干细胞分化的影响.结果:共培养液培养4d后,实验组与对照组的分化情况没有差异.7d后,对照组神经干细胞分化为GFAP阳性细胞绝对数和百分比明显高于4d时(P＜0.05);实验组GFAP和CNPase的阳性细胞绝对数以及CNPase的百分比较4d时显著增加(P＜0.05),并高于对照组(P＜0.05).结论:共培养液培养促进神经干细胞向少突胶质细胞分化.     

血管外膜成纤维细胞诱导BMSCs向平滑肌细胞定向分化

观察大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)与血管外膜成纤维细胞(ad-ventitial fibroblasts,AF)直接接触培养后,BMSCs向血管成分细胞分化的情况.将BMSCs(DAPI标记)与外膜成纤维细胞按一定的比例混合培养7 d,BMSCs单独培养作对照,显微镜下观察细胞形态变化;用免疫荧光染色检测BMSCs的血管平滑肌细胞表型标志物肌动蛋白(SMα-actin)表达的情况;RT-PCR检测SMα-actin mRNA表达的情况.BMSCs与血管外膜成纤维细胞共培养后可见细胞核蓝染的BMSCs与SMα-actin表达阳性(红色)的双标细胞出现,且随培养时间的延长,BMSCs的SMα-actin表达阳性率增高.结果可见:与血管外膜成纤维细胞直接接触有诱导BMSCs向血管平滑肌细胞分化的趋势.     

Effect of peripheral nerve on the neurite growth from retinal explants in culture

The effect of peripheral nerve (PN) on neurite outgrowth from retinal explants of adult hamsters was examined.Cultures of retinal explants,and co-cultures of retinal explants and PN were performed using chick retinal basement memebrane (BM) as substrate.The presence of PN increases the number and length of neurite outgrowth.In addition,a high proportion of neurites situated close to PN tend to grow towards it.Since there was no contact between retinal explants and PN,we suggest that PN might secete diffusible substances to attract the neurites to grow towards it.     

Generation of Hematopoietic Stem Cells from Purified Embryonic Endothelial Cells by a Simple and Efficient Strategy

Recent progress by versatile approaches supports the new hypothesis that multi-potent hematopoietic stein cells （HSCs） are directly formed from a rare population of endothelial cells in mid-gestation mouse embryos. This process is therefore known as the endothelial-to- hematopoietic transition （EHT）. Nevertheless, there is no functional evidence that documents the HSC transition from purified endothelial cells. In this study, we developed an OP9-DLl-based co-culture system that was able to facilitate the HSC specification and/or expansion in vitro of mouse embryonic day 10.5 （El0.5） Tie2~ cells remarkably. Then, the immunophenotypically defined endothelial ceils were harvested by a combination of surface markers （Flkl＋CD31 ~CD41 CD45 Ter119 ） from the caudal half of EI0.0-EI 1.0 mouse embryos. The transplantation of the endothelia/OP9-DL1 co-cultures led to long-term, high-level, multi-lineage, and multi-organ he- matopoietic reconstitution in the irradiated adult recipients. The induced HSC activity was initially observed at El0.5, and a significant increase was detected at El 1.0, which suggests a temporally specific regulation. Taken together, tbr the first time, we provide functional evidence showing the HSC potential of purified embryonic endothelial cells, which is indispensable for the emerging EHT concept. Moreover, the newly defined co-culture system will aid the exploration of the key molecules governing the HSC transition from embryonic and even postnatal endothelial cells, which has enormous significance in basic and translational research.     

蓝细菌固碳合成乳酸技术的发展与展望

乳酸是一种重要的工业化学品,被广泛应用于各个行业。近年来,随着聚乳酸(PLA)市场的兴起,乳酸原料的需求也在不断增加。糖基异养生产乳酸所带来的高昂成本与市场需求的矛盾吸引着研究人员积极寻找其他有利的解决方案。蓝细菌光合固碳生产乳酸是一种潜力巨大的新型原料供应策略,基于光合自养的细胞工厂,可以在单一平台上以太阳能为驱动力,从二氧化碳中直接生产出高光学纯度的乳酸。该方法原料廉价易得、过程简单可控、产物明确且易分离,同时达到节能减排和高附加值产品生产的双重效果,具有重要的研究与应用价值。文中回顾了蓝细菌固碳产乳酸技术的发展历程,从代谢基础、代谢工程策略、代谢动力学分析与技术应用等方面,梳理其研究进展和所遇到的技术难点,并对该技术的未来进行展望。     

诱导多能干细胞向巨噬细胞分化研究进展

诱导多能干细胞 (Induced pluripotent stem cells,iPSCs) 是通过体细胞重编程得到类似胚胎干细胞特性的一种细胞类型。通过iPSCs的体外分化,可以了解巨噬细胞的进化历史和各种特性。iPSCs来源的巨噬细胞不仅是药物筛选的良好模型,也是进行免疫治疗的重要手段。本文综述了近年来iPSCs及其向巨噬细胞分化的相关研究进展、所面临的问题以及未来的发展方向。     

脂肪干细胞的共培养及其分化应用概述

干细胞在体外特定培养条件下可以被诱导分化成具有不同体细胞表型的细胞。除了通过不同培养条件进行体外诱导分化的方法外,用成熟体细胞与干细胞共培养同样可以诱导干细胞定向分化。以下首先简述了脂肪干细胞 (Adipose-derived stem cells,ADSCs) 的来源及其标志,然后重点就ADSCs的不同培养方法、诱导分化及最新的临床应用进行阐述,包括药物及化学诱导培养、体细胞与ADSCs二维、三维共培养等,最后提出ADSCs的问题所在并对此技术进行展望。