全文获取类型
收费全文 | 33055篇 |
免费 | 2847篇 |
国内免费 | 13489篇 |
出版年
2024年 | 287篇 |
2023年 | 1109篇 |
2022年 | 1244篇 |
2021年 | 1278篇 |
2020年 | 1244篇 |
2019年 | 1230篇 |
2018年 | 928篇 |
2017年 | 1169篇 |
2016年 | 1161篇 |
2015年 | 1304篇 |
2014年 | 2125篇 |
2013年 | 1657篇 |
2012年 | 2070篇 |
2011年 | 2379篇 |
2010年 | 2236篇 |
2009年 | 2447篇 |
2008年 | 2809篇 |
2007年 | 2268篇 |
2006年 | 2135篇 |
2005年 | 2072篇 |
2004年 | 2154篇 |
2003年 | 1794篇 |
2002年 | 1640篇 |
2001年 | 1497篇 |
2000年 | 1178篇 |
1999年 | 1091篇 |
1998年 | 861篇 |
1997年 | 823篇 |
1996年 | 781篇 |
1995年 | 645篇 |
1994年 | 654篇 |
1993年 | 555篇 |
1992年 | 499篇 |
1991年 | 473篇 |
1990年 | 371篇 |
1989年 | 389篇 |
1988年 | 169篇 |
1987年 | 128篇 |
1986年 | 97篇 |
1985年 | 190篇 |
1984年 | 70篇 |
1983年 | 70篇 |
1982年 | 38篇 |
1981年 | 44篇 |
1980年 | 1篇 |
1975年 | 1篇 |
1963年 | 7篇 |
1958年 | 1篇 |
1955年 | 1篇 |
1950年 | 17篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 0 毫秒
81.
生长抑制激素基因的化学合成与克隆 总被引:3,自引:2,他引:1
采用固相亚磷酸三酯法化学合成生长抑制激素基因的两个DNA片段As2,A23,退火聚合成平端双链后,插入到经Smal酶切的pUCl2质粒DNA中。通过抗性筛选,正性标记筛选以及酶切位点分析,分子杂交,序列分析,证实化学合成的生长抑制激素基因已在大肠杆菌JM83中无性繁殖。 相似文献
82.
以大肠杆菌质粒pBR322为载体进行了野生型酿酒酵母(S.cerevisiae)的基因组克隆。以人工合成的寡聚核苷酸(3’GTGCGTACATAGATAGAGTA5’)为探针进行分子杂交,分离到的阳性克隆经限制性内切酶酶谱、southem杂交分析证实,插入序列中的2.1kb Hind Hi片段含有GPD基因。其中650bpTaq I片段的部分序列分析结果初步表明,该区域可能包含了高表达GPD基因的启动子。 相似文献
83.
钙调蛋白(CaM)是一种多功能调节蛋白,它含有4个Ca~(2+)结合域.晶体研究表明所有Ca~(2+)都与主链氧原子及酸性残基侧链氧原子配位,但Ca~(2+)的配位层中是否有水分子存在尚未确定.木文利用核磁共振技术,以Mn~(2+)为探针,通过测定水质子的核磁弛豫速率T_(1P)_(-1)建立了有关Ca~(2+)配位层中水分子数目的模型,该模型指出Cam中高、低亲和位上Ca~(2+)结合水的能力不同,高亲和位上Ca~(2+)的配位层中没有水分子存在,而低亲和位上Ca~(2+)配位层中含两个水分子. 相似文献
84.
盐泽螺旋藻藻胆蛋白的分离和特性研究 总被引:11,自引:0,他引:11
盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)的水溶性色素粗提物经过硫酸铵沉淀和羟基磷灰石(HA)柱层析后可以分出两种藻胆蛋白,即藻蓝蛋白(c-PC)和别藻蓝蛋白(APC)。它们的纯度(指其在可见光部分的最大吸收与280nm处吸收之比)可分别达到7.27(c-PC)和6.55(APC)。而一般认可的纯度标准,PC为5,APC为6。纯化后的c—PC和APC在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中仅见一条色带,其最大吸收峰分别在620nm和650nm,其室温荧光发射峰分别为642nm和657nm。 相似文献
85.
86.
87.
单克隆抗体对肾综合征出血热病毒50k蛋白的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
用18株抗肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,以下简称HFRS)病毒McAb,以Western-blot技术分析了纯化的该病毒50k蛋白。结果有7株McAb可与该蛋白反应。这7株McAb的特性(包括感染细胞膜抗原免疫荧光染色模式、中和活性及HI活性等)亦各不相同,提示它们所针对的抗原决定簇的特性也不同。用ELISA阻断试验等证明,上述7株McAb中,有5株所针对的抗原决定簇之间有部分相同或重叠,提示这些具有不同特性的抗原决定簇确实位于同一结构蛋白上。分析结果表明,该50k蛋白的特性及结构均较复杂,尚须进一步研究。 相似文献
88.
使用寡核苷酸指导的定点突变方法,将人αA型干扰素的完整基因与γ干扰素C端16个氨基酸的编码序列融合,在噬菌体λP_L启动子控制下,合成了一个杂交蛋白质。此蛋白质经抗人α干扰素单克隆抗体纯化后,在MDBK细胞上具有抗病毒活性,并像γ干扰素一样,可被依赖于cAMP的蛋白激酶磷酸化。[γ-~(32)P]杂交蛋白与MDBK细胞的结合,可被αA型干扰素大大抑制(70%)。 相似文献
89.
小鼠Lewis肺癌组织中层粘连蛋白受体的分离及其性质的研究 总被引:2,自引:2,他引:0
层粘连蛋白(Laminin,LN)是基膜(basement membrane)中的一种主要大分子糖蛋白。一些研究资料表明肿瘤细胞的浸润转移可能与LN有关。肿瘤细胞与LN的作用可能是通过细胞表面LN受体进行的。本文采用亲和层析法从小鼠Lewis肺癌组织中分离LN受体并对其理化性质进行研究。Lewis肺癌LN受体的表观分子量为70,000,还原后SDS电泳图为一条较宽的条带。氨基酸组成中疏水氨基酸占38%,苏氨酸、絲氨酸、门冬氨酸(包括门冬酰胺)占23.5%,通过硝酸纤维素膜片法用HRP-LN测定受体与LN的结合特性,证明具有配基结合专一性,饱和性及高亲和性(Kd=0.95×10~(-9)mol/L)。 相似文献
90.
利用氨化还原的方法把高量子产率的荧光标记物——α-萘胺,接到异麦芽糖寡糖的还原端。用硅胶薄层色谱、荧光光谱及快原子轰击质谱证实反应物的完全性及其结构。高效液相色谱用Micropak si5硅胶柱,以乙腈-水(含0.05%三乙胺)为梯度洗脱液可使含有二到九个糖残基的异麦芽糖寡糖的α-萘胺衍生物全部分离。本法对异麦芽糖二糖的荧光检测灵敏测度为2.35Pmol。 相似文献