氮和土著AMF对黄瓜间作土壤酶活性及氮利用的影响

设施土壤氮（N）肥的大量不合理施用和高残留是导致作物硝态N含量超标和农业面源污染的主要因素之一。研究土著丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi,AMF）与间作体系强化蔬菜对不同形态N的利用并结合土壤酶活性的反馈作用,可为设施土壤N素的高效利用和降低土壤N残留提供依据。本研究采用盆栽试验,设置黄瓜单作和黄瓜//大豆间作种植模式,不同AMF处理[不接种（NM）、接种土著AMF]和不同形态N处理[不施N（N0）、有机N（谷氨酰胺120mg/kg,ON120）、无机N（碳酸氢铵120mg/kg,ION120）],探讨了设施条件下施用不同形态N、接种土著AMF与间作大豆对黄瓜根围土壤酶活性及氮利用的影响。结果表明,与NM相比,接种土著AMF使设施黄瓜地上部、根系生物量及植株N吸收量均有不同程度的增加,根围土壤NH₄ ⁺-N、NO₃ ^--N含量呈现降低趋势。同一N处理-土著AMF条件下,间作大豆处理下的黄瓜根系菌根侵染率显著高于单作处理;间作大豆也使黄瓜植株地上部、根系生物量及N吸收量显著增加,同时显著降低了根围土壤铵态N含量。此外,间作-土著AMF条件下,ON120和ION120处理的黄瓜根围土壤脲酶活性较N0处理分别提高了30%和14%,蛋白酶和硝酸还原酶活性也呈现出相同趋势。可见,所有复合处理中,以间作体系接种土著AMF与施用适量有机N的组合明显促进了设施黄瓜生长和N素利用率。     

45S rDNA基因的不稳定性及其与转录的相关性

45S rDNA基因由串联重复序列构成,是遗传不稳定性的热点区域,易于发生DNA断裂和重组。以Hela和CHO细胞系为研究对象,运用荧光原位杂交技术检测有丝分裂不同时期的45S rDNA基因的不稳定性表型。结果表明,位点特异性的染色体浓缩失败是其在中期染色体上不稳定性的主要表型。具有这种表型的染色体在后期可能会出现落后或粘连现象,甚至有可能引发断裂,形成卫星核。同时,免疫荧光双染色技术检测表明DNA双链断裂的标记蛋白(γH2AX)和RNA聚合酶I的上游结合因子(UBF)在有丝分裂的不同时期都存在共定位现象。该结果为探讨45S rDNA基因的不稳定性与转录的关系提供了直观的细胞学证据。     

地塞米松对哮喘豚鼠血清白细胞介素-4 变化及肺组织形态的影响

目的:观察地塞米松对哮喘豚鼠血清白细胞介素-4(IL-4)及肺组织形态的影响,探讨糖皮质激素治疗哮喘的机制。方法:30只健康雄性Hartley系豚鼠随机分为空白对照组,病理模型组,地塞米松组。用卵白蛋白(OVA)复制哮喘豚鼠模型。采用流式细胞术分析CD4+interleukin-4(IL-4)细胞占CD4+T细胞的比例,光镜检查肺组织形态变化。结果:病理模型组外周血中IL-4明显高于空白对照组(P<0.05),地塞米松组外周血中IL-4较病理模型组明显降低(P<0.05),且地塞米松组支气管上皮损伤,粘液腺增生等病理改变较病理模型组明显改善。结论:地塞米松治疗哮喘的作用与抑制Th2的活化,改善支气管上皮损伤,粘液腺增生等病理改变有关。     

成骨细胞特异性转录因子Cbfa1重组腺病毒质粒的构建与鉴定

目的:构建成骨细胞特异性转录因子——核心结合因子α1(Cbfa1)重组腺病毒载体,为后期应用Cbfa1基因治疗股骨头坏死、骨折和骨缺损等疾病奠定基础。方法:以目的基因Cbfa1全长cDNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pShuttle-CMV载体的相应酶切位点,获得目的基因载体pShuttle-CMV-Cbfa1,在大肠杆菌BJ5183中和pAdEasy-1同源重组,筛选阳性克隆,经酶切、PCR及测序鉴定,线性化后用脂质体法转染HEK293细胞进行包装、扩增,用报告基因GFP对病毒滴度和感染效率进行监测,酚氯仿抽提纯化病毒,AdEasy1/Cbfa1感染间充质干细胞(MSC)后检测Cbfa1的表达。结果:测序、酶切及PCR证实Cbfa1基因重组腺病毒载体构建成功,AdEasy1/Cbfa1感染MSC后Cbfa1的表达显著升高。结论:构建了含Cbfa1基因的重组腺病毒载体,该基因能促进MSC向成骨细胞分化,预示其可作为治疗基因应用于股骨头坏死、骨折和骨缺损的治疗。     

乌天麻与红天麻杂交制种中定植升温时间研究

分析不同升温时间对乌天麻（Gastrodia elata f. glauca）、红天麻（Gastrodia elata f. elata）箭麻生长习性、花期同步及杂交种子发育影响，为早期获得高质量天麻杂交种子材料，促进天麻杂交种高效育苗提供科学依据。对乌天麻和红天麻箭麻不同时间定植升温（22 ℃）下花茎出苗时间、始花时间、花茎高度、杂交种子质量等进行分析。结果显示，不同升温时间是影响箭麻出苗时间、始花时间的主要因素，乌天麻集中于2月中下旬出苗，红天麻升温10~15 d后陆续出苗；生态变型是影响箭麻生育期长短、花期花朵数的主要因素，乌天麻比红天麻生育期长21.47 d，对花期及蒴果采收期无较大影响，红天麻比乌天麻更易完成抽薹；不同升温时间条件下，乌天麻挂果率为87.76%，红天麻挂果率为94.53%；母本决定杂交种子质量，以红天麻为母本、乌天麻为父本所得杂交种子活性为94.32%，优于以乌天麻为母本、红天麻为父本所得杂交种子活性。因此，生产中应于1月中旬对乌天麻开始升温，待乌天麻出苗后（15 d左右）开始对红天麻升温催芽，使得乌天麻与红天麻于3月中上旬花期同步，4月初可获得优良杂交天麻种子。     

探讨不同浓度的清郁和降汤对反流性食管炎大鼠肠道菌群的影响

【目的】观察不同浓度的清郁和降汤对反流性食管炎（reflux esophagitis，RE）的治疗效果，并探讨其对肠道菌群的影响。【方法】将36只健康雄性SD大鼠随机分为6组，其中1组为假手术组，剩余5组大鼠采用“前胃结扎+外置幽门部分结扎术”手术造模方法建立反流性食管炎模型。造模2周后将术后全部存活的30只大鼠随机分成对照组、中药高剂量组（予高剂量清郁和降汤）、中药中剂量组（予中剂量清郁和降汤）、中药低剂量组（予低剂量清郁和降汤）、西药组（予泮托拉唑钠肠溶胶囊+枸橼酸莫沙比利分散片+复方嗜酸乳杆菌片），每组6只。于术后第15天开始灌胃，其中假手术组及对照组予蒸馏水灌胃，其他组分别给予相应的药物灌胃，持续灌胃14 d后将所有大鼠处死后进行取材。以苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察大鼠食管组织的病理学改变；采用16S rRNA基因高通量测序检测其肠道黏膜的菌群构成。【结果】反流性食管炎大鼠存在着较为明显的肠道菌群结构变化及肠道菌群多样性较低的情况，B组（对照组）中厚壁菌门和拟杆菌门占比减少，变形菌门占比增多，且假单胞菌属、青枯菌属等细菌增多。低、中、高3种浓度的清郁和降汤均能够提升RE大鼠的肠道菌群多样性，增加拟杆菌门及厚壁菌门，降低变形菌门的占比，从属水平上看，清郁和降汤能够提升大鼠肠道中拟杆菌属、乳杆菌属、瘤胃球菌属、颤螺旋菌属、双歧杆菌属和狄氏副拟杆菌属等益生菌占比。以D组（中剂量组）对大鼠肠道菌群多样性提升最为明显，其效果最接近假手术组。特征微生物方面，B组以变形菌门为特征性微生物，D、E两组出现了放线菌门及拟杆菌门下属细菌为特征微生物的情况，在门水平与F组相同。【结论】清郁和降汤能够有效地治疗反流性食管炎，其机制可能与改变RE大鼠的肠道菌群结构、减少有害菌、提升益生菌的占比和改善肠道菌群多样性有关。