浅谈计算机辅助人体寄生虫教学

近年来 ,校园网 ,计算机中心 ,多媒体教室 ,电子阅览室等已成为高校新的风景点 ,教学环境得到明显改善和提高。计算机等现代高科技手段应用于教学活动 ,赋予教与学以全新的手段和形式 ,构造一崭新的医学教学方法 ,有利于教学效果提高 ,有利于教学目标实现 ,已成为现代化教育发展的趋势。在欧洲 ,远程教育已用于各种医学基础教育、在校教育、临床教育、继续教育。如丹麦阿柏格大学远程医学教育项目以问题为基础和以器官为基础的学习课程。“信息技术教育培训”(ＩＴ -ＥＤＵＣＴＲＡｈｔｔｐ ://ＷＷＷ .ｆｕｎ ｄｅｓｃｏ .ｅｓ/ｉｎｔｅｒ…     

核酸适配体在感染性疾病诊治中的研究进展

临床上，感染性疾病由于诊断不明或诊断时间较长导致严重后果的情况并不罕见。近年来，由于新型病原体感染报道层出不穷，现有病原体出现耐药也十分普遍，导致感染性疾病的诊断和治疗仍是临床上亟待解决的难题。核酸适配体是通过体外反复筛选或指数富集配体系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX)技术筛选出来的一类具有特异性识别能力的寡核苷酸序列，具有靶向结合目标分子的能力，可用于病原体检测和新型治疗性药物的开发。适配体已在感染性疾病诊治中显现良好的应用前景，进一步推进相关研究有望为感染性疾病的诊治提供新的途径。     

HIV Gag CAP2NC噬菌体蛋白酶切割模型的构建

HIV蛋白酶(protease,PR)耐药突变的大量出现严重地影响了AIDS的治疗.应用突变PR对展示HIVPR靶序列随机文库的噬菌体进行切割筛选,可获得突变PR的敏感噬菌体,该噬菌体可用于针对HIVPR耐药突变株的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor,PI)新药筛选.为了探索这一可能性,将包含HIVPR靶位点P2/NC序列的Gag蛋白CAP2NC片段展示于噬菌体表面,并在该片段的N端连接一可与人免疫球蛋白分子特异结合的固相化标签序列LD3,将该噬菌体固定于人免疫球蛋白包被的酶标板上,用HIVSF2PR进行切割,用抗M13噬菌体酶标抗体ELISA法检测未被切割的剩余噬菌体以反映切割效果.结果表明,所构建的噬菌体能被HIVPR有效切割,最大切割效应可达80%以上,其ELISA检测值明显下降,并且该切割效应与HIVPR呈明显的量效关系,能被PI类药物Indinavir(IDV)特异抑制.首次成功构建了展示HIV Gag CAP2NC片段的噬菌体蛋白酶切割模型,不仅可为研究HIVPR的耐药性变异及其靶序列的适应性变异提供一新的研究平台,同时也为构建一种全新的PI类药物,尤其是针对耐药的PI类药物大规模体外噬菌体筛选模型打下基础.     

基底外侧杏仁核对睡眠-觉醒的调节作用

采用多道睡眠描记方法,观察了基底外侧杏仁核在睡眠－觉醒调节中的作用。结果发现,电损毁双侧ＢＬＮ引起慢波睡眠和快波睡眠增加,觉醒减少;在双侧ＢＬＮ内注射选择性损毁神经元胸体剂量的红藻氨酸引起双相效应,注射ＫＡ后第１天出现失眠,自第３天开始,ＳＷＳ增多,Ｗ减少,但ＰＳ无显著变化。     

pRNA导入型Ribozyme的设计和体外转录制备

目的:枯草杆菌的包装RNA分子pRNA是新型纳米分子载体,将其同锤头型核酶Ribozyme重组可以构建结构稳定、能进入细胞、主动识别结合和剪切基因RNA的pRNA-Ribozyme.由于目前100 nt以上的RNA分子采用化学合成制备较为困难,实验采用基因重组构建并体外转录制备170 nt的pRNA-Ribozyme....     

肠道菌群核酸提取自动化流程的优化

目的:优化肠道菌群核酸提取自动化流程。方法:收集粪便样本,分别采用手工方法、核酸提取工作站提取核酸,然后利用液体工作站制备PCR反应液进行PCR扩增,最后采用文库工作站建库测序。结果:400μl样品用QIAamp~ Fast DNA Stool Mini Kit试剂盒裂解液裂解后,用MagMAX~(TM) Express 96机器提取核酸的方法与用QIAamp~ Fast DNA Stool Mini Kit试剂盒手工提取核酸的方法相比,测序得到的序列数基本一致,分析结果也没有明显区别;而单独采用MagMAX~(TM)Viral RNA Isolation Kit试剂盒提取核酸由于样品投入体积受限(50μl)、核酸浓度低、测序得到的序列数太少,不能满足后续的分析要求。结论:通过结合使用两种不同的试剂盒,可以实现核酸提取、PCR反应液配制及文库制备的全流程自动化操作,从而大大提高工作效率和结果的稳定性。     

外敷栀子柏皮汤对田径运动员胫骨疲劳性骨膜炎治疗的作用

目的：探讨外敷栀子柏皮汤是否具有缓解和治疗胫骨疲劳性骨膜炎的作用。方法：60例患有胫骨疲劳性骨膜炎的田径运动员随机分为A、B、C、D 4组,每次进行训练之后,A组通过按摩缓解症状,B、C、D组在按摩后,分别将浓度1、5、10 g/ml的栀子柏皮汤外加温水水浴并外敷于疼痛的小腿胫骨上,每次1 h,每天上下午训练后各一次,用有效率和视觉模拟评分法（visual analog scale, VAS）指标对患者治疗前后的疗效进行评定。结果：经5 d治疗后,C、D组的有效率显著高于A、B组（P<0.05,P<0.01）,D组有效率明显高于C组（P<0.05）;C、D组的VAS指数明显低于A、B组（P<0.05, P<0.01）,D组VAS指数明显低于C组（P<0.05）。结论：外敷有效浓度的栀子柏皮汤对田径运动员胫骨疲劳性骨膜炎患者有显著的治疗作用,可以作为田径运动员胫骨疲劳性骨膜炎的治疗方法。     

超支化聚合物新材料富集糖肽方法的研究

目的：将自合成的超支化聚合物固定到氨基硅球上形成一种新型的糖肽富集材料,用于糖肽的高效分离与富集。方法：阴离子开环聚合法合成的超支化聚缩水甘油,经高碘酸氧化成为超支化聚甘油醛（hyperbranched polyglycerol-aldehydes,HPG-ALD）后固定于氨基硅球上,再用己二酸二酰肼修饰得到的酰肼材料应用于糖肽富集。结果：经扫描电镜（Scanning Electron Microscope,SEM）、热重分析（thermogravimetric analysis,TGA）等手段证明材料被成功合成。同时,使用制备成功的新材料来富集标准糖蛋白和糖肽都获得了良好的富集效果。结论：实验证明超支化缩水甘油酰肼材料（hyperpolymer-assisted hydrazide functionalized microspheres,HHMs）可用于低丰度糖蛋白/糖肽的富集。     

敲除Pofut1不影响胚胎干细胞向神经元分化

蛋白O-连接岩藻糖基转移酶1 (Pofut1)基因缺失可导致Notch分子无法与配体结合并启动信号传递. 为研究Pofut1基因对哺乳动物胚胎干细胞（ESC）向神经分化的影响,利用Pofut1基因敲除的胚胎干细胞与野生型胚胎干细胞,经体外培养诱导拟胚体（EB）分化为神经细胞,计数分化为神经细胞的比例,采用细胞免疫组化染色和real-time PCR等方法,分析神经细胞特异性标志分子的表达. 结果显示,Pofut1基因缺失后,对EBC生长没有明显影响,分化过程中形成的拟胚体数量明显增多,分化的神经样细胞以及神经标志物分子的表达也明显多于对照组;Notch信号缺失对小鼠胚胎干细胞生长无明显影响,但可以促进ES细胞向神经细胞分化.     

β-arrestin的生物学研究进展

β-arrestin 1和2是一类介导受体脱敏的重要可溶性蛋白质,对绝大部分与受体偶联G蛋白介导的信号转导具有重要调节作用,在G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors, GPCRs)脱敏、内化、复敏、细胞增殖反应和基因转录中具有重要地位.对β-arrestin介导的复杂信号通路的研究将揭示它们的调节功能对人类健康的影响,有助于开发新一代影响GPCRs的药物.