DNA核酸酶与猪链球菌9型毒力的关系

【目的】除了猪链球菌2型外,猪链球菌9型(SS9)也是目前流行血清型,同时也是人畜共患病原菌。前期研究发现,DNA核酸酶(Ssn A)存在于SS9毒力株中,在SS9无毒株中不存在。为明确Ssn A对SS9毒力的影响,本研究构建ssn A缺失株Δssn A,并研究其生物学功能。【方法】用穿梭质粒p SET-4s构建Δssn A,并通过斑马鱼毒力试验、HEp-2细胞黏附、猪全血存活和酶活检测等试验,评价Ssn A对SS9毒力的影响。【结果】斑马鱼毒力试验显示,Δssn A对斑马鱼毒力显著降低,半数致死量是野生株的11.2倍;Δssn A对HEp-2细胞的黏附率为野生株的60.61%;Δssn A在猪全血中的存活率为野生株的71.88%;酶活试验表明,Ssn A可降解线性和环状DNA。【结论】本研究表明SS9 Ssn A具有降解线性和环状DNA能力,该基因缺失后细菌对斑马鱼毒力、黏附HEp-2细胞能力、在猪全血中存活及分解DNA能力都显著降低,证实Ssn A是SS9的一个毒力因子。     

二花脸猪乳中蛋白组分的动态变化

分析了10头二花脸猪乳个主要蛋白质组分在泌乳1-20天的含量及其动态变化。结果表明，α-乳白蛋白(α-La)浓度前4天至上升趋势，1周后略有下降，然而其浓度和百分比均差异不显著。β-轧球蛋白(β-Lg)、总路蛋白(tCN)和清蛋白(SA)的浓度第一天最高，β-Lg有下降趋势，SA缓慢下降，而tCN规律性不强。β-Lg百分比差并不显著。tCN百分比随着泌乳天数逐日上升。SA的百分比在泌乳一周内变化不大，后开始下降。免疫球蛋白(Igs)、乳铁蛋白(Lf)浓度以及Igs百分比第一天显著高于其它泌乳天数，然后急剧下降，在一周后处于很低的水平，Lf百分比至下降趋势。一组高分子量蛋白质(HMWP)浓度和百分比在一周内逐渐上升。     

鸡传染性贫血病毒研究进展

鸡传染性贫血病毒研究进展卢春，陈溥言，蔡宝祥（南京农业大学动物医学院，南京２１００９５）ＡｄｖａｎｃｅｓｏｆＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＣｈｉｃｋｅｎＡｎａｅｍｉａＶｉｒｕｓ￥ＬｕＣｈｕｎ；ＣｈｅｎＰｕｙａｎ；Ｂａｏｘｉａｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉ...     

乙酰基转移酶毒素SsGNAT影响猪链球菌的黏附能力

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人畜共患病病原，本研究旨在鉴定猪链球菌乙酰基转移酶毒素类毒素-抗毒素系统，并对其毒素功能进行分析，探讨猪链球菌毒素-抗毒素系统在细菌感染过程中发挥的作用。【方法】前期预测猪链球菌血清型5型菌株HN105基因组中假定的Ⅱ型毒素-抗毒素系统。进一步鉴定毒素-抗毒素系统的活性并分析该毒素-抗毒素系统的遗传进化关系；运用Westernblotting揭示毒素在猪链球菌内的表达情况。同时以HN105为亲本株，构建毒素缺失株、抗毒素缺失株以及毒素-抗毒素缺失株，研究该系统对猪链球菌黏附能力、生物被膜形成能力、抗吞噬与胞内存活能力的影响。【结果】预测并鉴定出猪链球菌血清型5型菌株HN105基因组中DF184＿RS00980-DF184＿RS00985编码的乙酰基转移酶(Gcn5-related N-acetyltransferase,GNAT)毒素类毒素-抗毒素系统，根据保守结构域将该系统命名为SsMarR-SsGNAT。SsGNAT毒素在大肠杆菌(Escherichia coli)的周质间隙发挥毒性作用，且抗毒素可以中和毒素的毒性...     

广西、四川两地屠宰场猪链球菌致病特征分析

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis)是猪的重要致病菌，同时也是一种人畜共患病原。屠宰场健康猪的猪链球菌感染率较高，血清型多而复杂，是人和猪的重要传染源。四川、广西两地都曾暴发猪链球菌疫情，大量生猪发病死亡的同时，也导致部分与病猪有密切接触的人群发病死亡。因此，对上述两地区屠宰场进行猪链球菌感染调查，明确其致病特征，具有重要公共卫生意义。【方法】本研究自2021-2022年采集广西、四川两地屠宰场健康猪扁桃体，分离鉴定猪链球菌并进行血清型分型，对分离株进行斑马鱼毒力、小鼠毒力试验，并对毒力株进行基因组测序，进行多序列位点分型(multilocus sequence typing, MLST)及毒力标志基因分析，探究其致病特征。【结果】广西57份健康猪扁桃体样品猪链球菌阳性率为84.21%(48/57)，分离鉴定出60株猪链球菌，其中分离率最高的是血清31型(16.67%, 10/60)，其次为9型(11.67%, 7/60)、4型(10.00%, 6/60)、12型(8.33%,5/60)等，2型菌株仅分离出1株，含2种及以上不同血清型猪链球菌的扁桃体占33.33%(...     

噬菌体裂解酶Lysin1902原核表达及其与ε-聚赖氨酸联用效果评价北大核心

【目的】研究裂解酶Lysin1902与ε-聚赖氨酸(ε-PL)对大肠杆菌O157:H7的协同抗菌作用。【方法】通过Mega构建进化树、使用在线工具等分析大肠杆菌噬菌体裂解酶Lysin1902氨基酸序列组成和结构等;原核表达并纯化Lysin1902;通过平板裂解实验检测Lysin1902对大肠杆菌O157:H7灭活菌株的裂解活性;用96孔板法检测Lysin1902或ε-PL的活菌裂解能力;棋盘法验证Lysin1902和ε-PL联用效果。【结果】体外成功表达并纯化了Lysin1902。Lysin1902对大肠杆菌O157:H7灭活菌株具有裂解活性,但不能有效裂解活的大肠杆菌。噬菌体裂解酶与ε-PL联用结果表明,加入Lysin1902后,ε-PL能够完全控制大肠杆菌O157:H7增殖的使用浓度由0.7mg/mL降低到0.1 mg/mL。【结论】体外原核表达并纯化Lysin1902,其单独使用对活的大肠杆菌O157:H7无裂解活性,但与ε-PL联用可显著提高ε-PL对大肠杆菌O157:H7的裂解能力。     

基于GEO数据分析的猪病毒源siRNA

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是宿主细胞抗病毒的关键方法之一，其核心切割酶Dicer会将病毒复制过程中产生的双链RNA切割成长度为21-23 nt小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)。病毒源siRNA可直接靶向降解病毒的mRNA，阻断病毒复制。本研究一方面筛选NCBI GEO(National Center for Biotechnology Information Gene Expression Omnibus)数据库中有关猪病毒感染后产生的小RNA序列，分析比对病毒vsiRNA以探讨vsiRNA数量和其在病毒基因区域的存在规律。研究结果表明RNAi系统中Dicer对正链RNA病毒有一定的切割偏好性，并且可以识别与切割DNA病毒转录过程中产生的双链RNA。另一方面，本研究发现猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）感染猪骨髓源树突状细胞后，宿主细胞的IFN-α、IFN-β与Dicer的表达量均显著下调，表明PEDV通过抑制IFN及RNAi的产生来实现免疫逃避。综上，本研究以...