含吸氢酶基因（hup）嵌合质粒的构建和吸氢酶活性在阴沟肠杆菌中的表达

以质粒ｐＲＫ４０４为载体亚克隆含大豆根瘤菌吸氢酶结构基因（ｈｕｐ）的片段,构建成嵌合质粒ｐＨＲ１１、ｐＨＲ４和ｐＨＲ１０。通过三亲本杂交将这些嵌合质粒导入无吸氢活性的Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ２４１菌株（Ｈｕｐ－）,均获得Ｈｕｐ＋的接合子。利用启动子检测质粒ｐＭＰ２２０证明,在ｈｕｐ对结构基因上游１．２ｋｂ内存在ｈｕｐ启动基因片段。以ｐＲＫ２０１３为助质粒可将ｐＨＲ１１导入Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ和Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ等土壤固氮菌株。本文以接合子Ｅ．ｃｌｏａｃａｅＥＨ１１１３为例,通过对基因组ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析证明,嵌合质粒ｐＨＲ１１在ＥＨ１１１３中稳定贮存和复制。Ｈ２诱导接合子ＥＨ１１１３吸氢酶活性高表达,吸氢活性与放氢活性比值约为对照的两倍。当以延胡索酸为电子受体时,吸氢酶的吸氢作用支持菌株固氮酶活性的提高。     

玉米根微粒体ABA结合蛋白的性质及逆境胁迫的影响

以玉米根微粒体为材料进行的微量放射配体结合（ＭＲＬＢ）实验表明玉米根微粒体膜上存在着ＡＢＡ结合位点,ＡＢＡ与ＡＢＡ结合蛋白（ＡＢＡ－ＢＰ）结合的最适ｐＨ为６．５,结合反应对温度（０℃和２５℃）不太敏感,ＡＢＡ与ＡＢＡ－ＢＰ的结合反应是一个动态平衡过程,５ｍｉｎ即可达最大结合（Ｂｍａｘ）的５０％,３０ｍｉｎ达到最大结合,１ｈ内基本保持不变。胰蛋白酶处理表明此结合位点为蛋白质,冻融实验则表明此蛋白与ＡＢＡ的结合不仅要求其自身具有特定构象而且需要有一定的膜脂环境,ＤＴＴ处理实验结果显示ＡＢＡ－ＢＰ中可能存在着二硫键。逆境处理可以提高玉米根微粒体膜对ＡＢＡ的结合活性,盐胁迫、渗透胁迫、干旱胁迫和热冲激处理分别使结合活性上升３４．９％、１７．８％、２３．１％和１３．３％。     

一个未知的特异结合雌激素效应元件编码链的单链结合蛋白

本文介绍一个不是雌激素受体（ＥＲ）却能专一地结合雌激素效应元件（ＥＲＥ）编码单链的单链结合蛋白,对此蛋白在细胞中的定位、组织中的分布、热稳定性、同二价金属离子的关系作一初步研究。发现其受雌激素负调控。此蛋白在人病理样品２９例乳癌中同ＥＲ的含量似有一定的负相关关系,讨论了上述结果的意义。     

大肠杆菌rpoH基因的克隆,表达及其产物的纯化

本文用ＰＣＲ方法获得大肠杆菌热休克蛋白转录因子σ３２的编码基因ｒｐｏＨ,并克隆在含有ｔａｃ启动子的表达载体ｐＵＨＥ中,经ＩＰＴＧ诱导,在大肠杆菌中表达了Ｃ端融合有６个寡聚组氨酸的σ３２。表达产物经金属螯合层析一步纯化,达到ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染一条带纯度,氨基酸组成分析及Ｎ端序列分析结果与文献报道一致。３５Ｓ细胞内参入实验表明：即使在较低的温度下,表达产物σ３２（Ｈｉｓ）６也能导致热休克蛋白如ＧｒｏＥｌ、ＤｎａＫ、Ｈｔｐ的大量合成．     

广东滩涂经济鱼类寄生吸虫──Ⅳ．独睾科─新属─新种记述（复殖目）

本文对广东滩涂经济鱼类寄生复殖吸虫独睾科ＭｏｎｏｒｃｈｉｉｄａｅＯｄｈｎｅｒ,１９１１中一新属新种;椭囊吸虫属。Ｅｌｌｉｐｔｏｂｕｒｓａｇｅｎ．ｎｏｖ．、单睾椭囊吸虫Ｅｌｌｉｐｔｏｂｕｒｓａｓｉｎｇｌｏｒｃｈｉｓｓｐ．ｎｏｖ．进行了记述。     

人体超微弱发光图像中的信号检验

用近期研制的具有单光子探测能力的超高灵敏度成像系统获得了人体体表生物超微弱发光的强度数据。为分析图像中的信号检验,二项分布被用于人手不同时间累积发光图像中的信号显著性检验,证实人手存在超微弱生物发光,手指的发光强度在３００～５５０ｐｈｏｔｏｎｓ／ｓ范围内,全手的发光强度在８５０～１２００ｐｈｏｔｏｎｓ／ｓ范围内。     

Distribution and Significance of Nitric Oxide Synthase in Brain Tissues of Rats Exposed to Deltamethrin Insecticide

The distribution of nitric oxide synthase(NOS)in brain tissues of rats exposed to deltamethrininsecticide has been examined by histochemical NADPH-diaphorase staining techniques on frozen sec-tions.After injection of deltamethrin(12.5mg/kg,i.p.),a reproducible sequence of toxic signs ofhyperexcitability were elicited.The observation and image analysis showed that,within brain sec-tions of rats exposed to deltamethrin,the numbers and the total staining areas of the NOS positiveneurons were greatly increased,especially in cerebral cortex,hippocampal formation and paraventric-ular nucleus.In addition,the density of single neuron and the processes were also increased.The re-sults suggested that deltamethrin may induce the NOS expression or activate the NOS activity.TheNOS activation may involve in the chains responsible for the excitatory neurotoxicities induced bydeltamethrin.     

生物超微弱发光的两维探测

本文介绍了自行研制的二套系统及其应用。1．高灵敏荧光显微镜系统,该系统探测灵敏度达到10－6lx量级,比普通CCD系统提高了104倍,系统用宽量程照度计对微弱光成象性能进行了标定,在给出细胞荧光图象的同时,可以给出每一象元的发光强度,并可给出视觉更易分辨的光强的三维显示和伪彩色图象。在该系统上得到了分红菌甲素在Hela细胞中的分布图象,Hela细胞加入竹红菌甲素后的光照损伤及抗氧化剂维生素E等对细胞的保护图象。2．光子计数成象系统,该系统灵敏度达10-8lx量级,可探测到单个光子及其分布,在其上得到了绿豆芽,树叶,昆明鼠,人手及手指的超微弱发光的光子图象,并用统计理论进行了信号检验。     

光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白

光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白吴忠义,陈珈,朱美君（北京农业大学生物学院,１０００９４）关键词结合蛋白;光亲和标记;ＡＢＡ;受体;微粒体脱落酸（ＡＢＡ）作为一大类植物激素,在高等植物的生长发育以及对逆境的适应过程中发挥着重要作用。在探讨激素作用的...     

枯草杆菌蛋白酶E的156和165位突变

应用定点突变方法,在M222A突变的枯草杆菌蛋白酶E基因上进行E156S和V165I定点突变. 将突变基因插入大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pBE-2中,在碱性和中性蛋白酶缺陷型的枯草杆菌DB104中进行表达,得到突变种(M222A,E156S)和(M222A,E156S,V165I)蛋白酶E. 性质测定表明,E156S突变使蛋白酶比活力增加90%,并不影响酶的热稳定性和抗氧化性. 而V165I突变使蛋白酶比活力降低.