一株斜纹夜蛾核型多角体病毒毒力及基因组酶切的研究

一株斜纹夜蛾核型多角体病毒毒力及基因组酶切的研究王晓容,刘明富,刘润忠,兰萍章,张友清（中国科学院武汉病毒研究所,武汉４３００７１）关键词斜纹夜蛾,核多角体病毒,毒力测定,限制酶分析斜纹夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｌｅｒａｌｉｔｕｒａ）是重要的农业害虫之一。关...     

伪狂犬病毒闽A株基因文库的构建及物理图谱分析

本文报道以质粒ｐＢＲ３２２作载体,用鸟枪法克隆出了ＰＲＶ闽Ａ株除ＢａｍＨＩ－１,２外的所有酶切片段,构建了ＰＲＶ闽Ａ株基因文库,并以克隆出的ＢａｍＨＩ片段用光生物素标记作探针,应用分子杂交法确定了ＰＲＶ闽Ａ株绝大部分限制性内切酶位点的位置。     

地高辛标记反意RNA探针检测脑组织切片生长抑素mRNA

本实验采用含大鼠生长抑素基因的ｐＳＰ６５ｃＤＮＡ质位通过转化至噬菌体内大量扩增,经提取,纯化后,用限制性内切酶进行酶切使质枝线性化,并将其作为模板,用地高辛（ＤｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎＤｉｇ）作为标记物,体外转录合成生长抑素反意ＲＮＡ（ｃＲＮＡ）探针。实验动物选用ｗｉｓｔａｒ新生大鼠。冰冻切片,端、间脑切片经杂交前用Ｄｉｇ－ＵＴＰ标记的ｃＲＮＡ探针杂交,杂交后用抗Ｄｉｇ－碱性磷酸酶复合物进行酶联免疫反应。Ｘ－磷酸盐－ＮＢＴ显色。结果显示新生大鼠脑内生长抑素ｍＲＮＡ神经元着紫蓝色。杂交反应物集中于核周的胞浆及短小的突起内。胞核不着色。胞体轮廓清晰,周围背底浅淡。结果表明Ｄｉｇ标记ｃＲＮＡ探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能快速和准确检测组织细胞内ｍＲＮＡ的表达。     

评世界保护联盟新的物种受威胁分类系统草案

为了进一步了解物种受威胁的情况和发展,以加强物种保护工作,世界保护联盟制定了一个新的物种受威胁分类系统草案,把物种受威胁的程度分为９个级别,即绝灭种、野生状态下的绝灭种、极危种、濒危种、渐危种、敏感种、安全的／危险性小的种、不充分了解的种和未估价的种。本文对这个分类系统草案作了简略的评介。     

用平截末端使大豆根瘤菌苹果酸脱氨酶基因插入失活及电激法转化

本实验用平截末端连接法把卡那霉素抗性基因插入到大豆根瘤菌（Ｂｒａｈｙｒｈ;ｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）１１０的苹果酸脱氢酶（ｍｄｈ）基因中,致使ｍｄｈ基因失活,再通过电激法把这一重组基因转入大豆根瘤菌（Ｂｒａｈｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ）２１４３中,进而探讨ｍｄｈ基因失活对大豆固氮作用的影响。     

异质性荧光染色的巨噬细胞功能研究I．异质性荧光染色的巨噬细胞吞噬活性

利用淀粉多糖和免疫促进剂（白喉类毒素和卡介苗）诱导和活化小鼠腹腔巨噬细胞,观察了四种异质性荧光染色的巨噬细胞非特异性和特异性吞噬活性。实验证明,深蓝色和淡蓝色荧光的巨噬细胞是分化程度低的幼稚细胞,非特异性吞噬功能较弱,但在特异性吞噬过程中呈现了活跃的吞噬活性,特别是在免疫促进剂的活化下,它们的特异性吞噬功能显著增强、淡蓝绿色荧光的巨噬细胞是分化程度较高、非特异性和特异性吞噬功能最旺盛的巨噬细胞,而黄色荧光的巨噬细胞是分化程度最高、特异性吞噬功能较减退的巨噬细胞。     

草鱼出血病病毒多肽的荧光染色

将草鱼出血病病毒（ＧｒａｓｓＣａｒｐＨｅｍｏｒｒｈａｇｅＶｉｒｕｓ,ＧＣＨＶ）置于还原性的溶液中,然后加入等体积的ＮａＨＣＯ３配制的异硫氰酸荧光索溶液进行多肽的标记,再经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,在紫外灯下即可检测到ＧＣＨＶ全部的１１个结构多肽的荧光带。该方法最小检测量为５００ｎｇ,由该方法回收的多肽具有抗原活性,可作为抗原进行免疫学实验。     

印度木薯花叶病毒DNA在寄主植物中可能存在的形式

从印度木薯花叶病毒（ＩＣＭＶ）侵染的植物中纯化特异的核酸,经ＲＮＡａｓｅ,ＤＮＡａｓｃ,Ｎｕｃｌｅ－ａｓｅＳｌ,ＥｘｏｎｕｃｌｅａｓｅⅢ和ＥｃｏＲＩ酶切,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｄｏｔｂｌｏｔｓ杂交证实,在感病的植株中,存在两种形式的病毒核酸：环状双链ＤＮＡ和环状单链ＤＮＡ,后者可能是病毒ＤＮＡ的（－）链,环状双链ＤＮＡ经限制性内切酶作用可得２．７ｋｂ的线性双链ＤＮＡ纯化的病毒核酸含ＤＮＡ１和ＤＮＡ２两个分子量相近的组份。     

用732阳离子交换树脂柱提取碱性氨基酸工艺研究

本文是从棉籽饼粕中,应用７３２阳离子树脂柱提取碱性氨基酸。研究结果表明,碱性氨基酸与中性氨基酸之间交叉部分较小。因此,本法即简化了提取工序,又缩短了操作时间,大大提高了氨基酸的分离效果。     

双裂解法提取血清HBV DNA技术的建立

为进行ＰＣＲ实验建立了一种两步裂解血清ＨＢＶ提取其ＤＮＡ的方法。该法首先用ＳＤＳ及蛋白酶消化裂解病毒,随后再进行碱裂解,操作较酚提取法大为简化,而ＰＣＲ实验进行的两法的灵敏性比较,说明双裂解法至少不低于酚法。